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驴Zfy基因cDNA克隆及生物信息学分析 被引量：6
1
作者 营瑞文 张永生 +5 位作者 夏欢 王香祖 李超程 王绪海 席继锋 贾斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第1期39-46,共8页
本研究旨在对驴Zfy基因的cDNA序列进行克隆及生物信息学分析。根据GenBank中公布的家牛Zfy基因mRNA序列(登录号:NM_177491.1)设计特异性引物,运用RT-PCR技术获取驴Zfy基因的cDNA序列,并对Zfy基因CDS区核苷酸序列与蛋白质结构进行生物信... 本研究旨在对驴Zfy基因的cDNA序列进行克隆及生物信息学分析。根据GenBank中公布的家牛Zfy基因mRNA序列(登录号:NM_177491.1)设计特异性引物,运用RT-PCR技术获取驴Zfy基因的cDNA序列,并对Zfy基因CDS区核苷酸序列与蛋白质结构进行生物信息学分析。结果表明,驴Zfy基因CDS区序列长度为2 325bp,编码774个氨基酸;蛋白质二级结构预测结果显示,Zfy蛋白没有信号肽及跨膜结构;驴Zfy基因CDS区序列与家牛、绵羊、人、家猫、家犬、马鹿、黑猩猩、藏羚羊的同源性分别为92.9%、92.6%、91.8%、93.8%、92.5%、92.3%、91.6%和92.6%;对驴和其他8种哺乳动物Zfy基因CDS区核苷酸序列构建的系统进化树显示,驴与绵羊、藏羚羊、家牛、马鹿亲缘关系较近,与家犬和家猫的亲缘关系稍远,与人和黑猩猩亲缘关系最远。本研究成功克隆出驴Zfy基因CDS区序列,为进一步研究驴Zfy基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 驴 Zfy基因 克隆 生物信息学
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绵羊细粒棘球蚴Ag B基因的克隆、表达及其重组蛋白纯化 被引量：1
2
作者 刘田莉 易继海 +6 位作者 营瑞文 宋雪梅 乔军 孟庆玲 胡政香 才学鹏 陈创夫 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第6期687-691,共5页
为克隆、表达绵羊细粒棘球蚴Eg Ag B基因,并纯化重组蛋白,采用PCR方法从绵羊肝脏包囊病料中扩增Ag B基因,克隆入p MD18-T载体中,测序后进行序列分析。将Ag B基因亚克隆入原核表达质粒p ET-28a中,转化入E.coli BL21感受态细胞中,用IPTG诱... 为克隆、表达绵羊细粒棘球蚴Eg Ag B基因,并纯化重组蛋白,采用PCR方法从绵羊肝脏包囊病料中扩增Ag B基因,克隆入p MD18-T载体中,测序后进行序列分析。将Ag B基因亚克隆入原核表达质粒p ET-28a中,转化入E.coli BL21感受态细胞中,用IPTG诱导Ag B蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示:克隆的Ag B基因全长333 bp,通过SDS-PAGE可以检测到分子量为20 ku的特异性重组蛋白,与预期值相符;Western blot分析结果显示,该蛋白可与Eg阳性血清发生免疫学反应。本研究在大肠杆菌中成功表达的绵羊细粒棘球蚴Ag B蛋白,并证实其具有良好的反应原性,为绵羊细粒棘球蚴感染检测试剂的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 AG B基因 原核表达 绵羊
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藏獒阴道上皮细胞角质化对发情鉴定的效果观察 被引量：1
3
作者 营瑞文 张永生 +2 位作者 李超程 蒋松 贾斌 《上海畜牧兽医通讯》 2017年第4期26-27,共2页
本研究旨在提高藏獒受胎率,通过对发情期藏獒的阴道黏液涂片镜检,观察阴道上皮角质化细胞的数量,当阴道上皮角质化细胞数量达到80%~90%、细胞核不明显时,对藏獒进行人工授精,并且记录受孕藏獒数及其产仔数。结果显示:试验中的20条藏獒,... 本研究旨在提高藏獒受胎率,通过对发情期藏獒的阴道黏液涂片镜检,观察阴道上皮角质化细胞的数量,当阴道上皮角质化细胞数量达到80%~90%、细胞核不明显时,对藏獒进行人工授精,并且记录受孕藏獒数及其产仔数。结果显示:试验中的20条藏獒,有18条受孕,且受孕藏獒的平均产仔数为7.1条。因此以阴道上皮细胞角质化来鉴定藏獒排卵,取得了明显的效果,这对于提高藏獒的繁育具有重要意义。 展开更多
关键词 藏獒 发情 阴道上皮细胞 角质化细胞
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抗性和非抗性哈萨克羊人工感染包虫虫卵早期小肠免疫指标的差异分析
4
作者 王绪海 蒋松 +4 位作者 李鑫 张永生 李超程 营瑞文 贾斌 《现代畜牧科技》 2018年第11期1-6,103,共7页
包虫病又称棘球蚴病,是由细粒棘球绦虫引起的一种呈全球性的人畜共患病。本研究就包虫病抗性和非抗性哈萨克羊人工口服感染了细粒棘球绦虫虫卵后,对小肠组织中的免疫球蛋白和主要的细胞因子和趋化因子进行了研究。研究发现人工感染后6h... 包虫病又称棘球蚴病,是由细粒棘球绦虫引起的一种呈全球性的人畜共患病。本研究就包虫病抗性和非抗性哈萨克羊人工口服感染了细粒棘球绦虫虫卵后,对小肠组织中的免疫球蛋白和主要的细胞因子和趋化因子进行了研究。研究发现人工感染后6h、8h、10h屠宰绵羊,采集绵羊各段小肠组织并匀浆取上清液,ELISA试剂盒检测小肠组织中抗体(IgM、IgG、IgE)、细胞因子(IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-4、sIgA)和趋化因子(CCL8)的水平。结果表明,IgE(P<0.05)在空肠后段、IgM(P<0.01)在回肠、SIgA(P<0.05)在十二指肠和空肠以及IFN-γ(P<0.05)在十二指肠和空肠前段,抗性组显著高于非抗性组,IgG(P<0.05)在空肠前段、IL-2(P<0.05)在回肠抗性组显著低于非抗性组。而TNF-α、IL-4和CCL8在两组间没有显著差异。这说明携带MHC抗性基因型的绵羊在小肠组织表现出较强的包虫病抵抗力可能与其早期IFN-γ、SIgA和IgM分泌较高有关。 展开更多
关键词 哈萨克羊 人工感染 包虫虫卵 抗性 非抗性 免疫 分析
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塔里木马鹿胎儿性别鉴定
5
作者 李超程 赵喜堂 +6 位作者 杜迎春 孙丽荣 蒋松 刘明达 营瑞文 魏丽敏 贾斌 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2017年第5期632-635,共4页
为建立一种简单、准确的塔里木马鹿早期胎儿性别鉴定新方法,本研究利用妊娠马鹿血浆中胎儿游离的DNA为模板,通过常规PCR扩增牙釉蛋白特异序列,对89头妊娠12-14周龄塔里木马鹿进行胎儿性别鉴定,鉴定结果与实际产犊性别进行比较。结果表明... 为建立一种简单、准确的塔里木马鹿早期胎儿性别鉴定新方法,本研究利用妊娠马鹿血浆中胎儿游离的DNA为模板,通过常规PCR扩增牙釉蛋白特异序列,对89头妊娠12-14周龄塔里木马鹿进行胎儿性别鉴定,鉴定结果与实际产犊性别进行比较。结果表明:成功从X染色体上扩增出282 bp的片段,从Y染色体上扩增出252 bp的特异性片段;89头妊娠母鹿胎儿检测结果显示,50头为公,39头为母,与实际产仔性别比对后,鉴定准确率为91.01%。由此可知,利用胎儿游离DNA和牙釉蛋白基因对塔里木马鹿进行早期胎儿性别鉴定,方法简单且准确率高。 展开更多
关键词 胎儿性别鉴定 塔里木马鹿 牙釉蛋白 PCR
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