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一氧化氮和氧化低密度脂蛋白相互作用及其与动脉粥样硬化的关系 被引量：18
1
作者 李芹 荆清 《国外医学（心血管疾病分册）》 1999年第1期10-13,共4页
一氧化氮(NO)即内皮衍生的舒张因子(EDRF)是调节正常血管张力的重要因素,具有相当重要的生物学功能。
关键词 一氧化氮 低密度脂蛋白 动脉粥样硬化 OX-LDL
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成年大鼠成肌细胞的原代培养 被引量：7
2
作者 周菲 秦永文 +2 位作者 荆清 沈茜 马大烈 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2001年第1期43-46,共4页
目的　探索成年大鼠成肌细胞的原代培养方法。方法　取成年SD大鼠的胸大肌 ,利用组织块培养法培养成肌细胞。绘制生长曲线 ,并对培养细胞进行形态学研究和免疫细胞化学鉴定。结果　采用组织块培养法 ,2周后成肌细胞的密度可达 10 7/ml,... 目的　探索成年大鼠成肌细胞的原代培养方法。方法　取成年SD大鼠的胸大肌 ,利用组织块培养法培养成肌细胞。绘制生长曲线 ,并对培养细胞进行形态学研究和免疫细胞化学鉴定。结果　采用组织块培养法 ,2周后成肌细胞的密度可达 10 7/ml,免疫细胞化学分析显示 90 %以上的细胞呈骨骼肌特异的肌细胞生成素 (myogenin)抗体染色阳性。结论　利用组织块法成功培养成年大鼠原代成肌细胞 ,该方法实用性强 ,所得成肌细胞纯度高 ,为深入研究心肌梗死疤痕中成肌细胞自体移植奠定了基础。 展开更多
关键词 成肌细胞 原代培养 大鼠 成年人 心肌梗死
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明胶法分离外周血单核细胞 被引量：9
3
作者 雷著斌 秦永文 +1 位作者 沈茜 荆清 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期1039-1040,共2页
外周血单核细胞在动脉粥样硬化(AS)形成中起着重要的作用,但人们对AS中单核细胞作用的机制仍不完全清楚,甚至有相矛盾的文献报道,这可能是由于单核细胞提纯困难的缘故。单核细胞大约占外周血单个核细胞的10%～20%[1]。以往单核细胞的提... 外周血单核细胞在动脉粥样硬化(AS)形成中起着重要的作用,但人们对AS中单核细胞作用的机制仍不完全清楚,甚至有相矛盾的文献报道,这可能是由于单核细胞提纯困难的缘故。单核细胞大约占外周血单个核细胞的10%～20%[1]。以往单核细胞的提纯方法经常会造成高比例的淋巴细胞污... 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 外周血 单核细胞 明胶法
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趋化因子及其受体与动脉粥样硬化 被引量：7
4
作者 雷著斌 荆清 《国外医学（心血管疾病分册）》 2000年第4期204-207,共4页
本文概述了近几年来趋化因子及其受体的功能及结构的有关进展,讨论在动脉粥样硬化形成中趋化因子系统的参与及调节,着重论述了动脉粥样硬化中主要参与细胞的趋化因子系统的表达及其作用。
关键词 趋化因子 趋化因子受体 动脉粥样硬化
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microRNA:心血管发育及疾病中的重要调控因子 被引量：7
5
作者 李青 荆清 《生命科学》 CSCD 北大核心 2010年第7期661-667,共7页
心脏是哺乳动物在胚胎发育时期最早形成的器官,心血管系统的正常发育及功能维持受到精确的调控。近年来,心血管疾病已成为危害人类生命的首要杀手之一,因此,对心血管的发育及疾病发生的机制研究一直是生命科学研究的热点问题。microRNA(... 心脏是哺乳动物在胚胎发育时期最早形成的器官,心血管系统的正常发育及功能维持受到精确的调控。近年来,心血管疾病已成为危害人类生命的首要杀手之一,因此,对心血管的发育及疾病发生的机制研究一直是生命科学研究的热点问题。microRNA(miRNA)是一类长约18～25nt的单链非编码小RNA,主要通过结合于靶基因的3'非翻译区抑制靶基因的翻译或导致mRNA降解,从而抑制靶基因的表达。miRNA在许多生物学过程中发挥重要的调控作用,如细胞增殖、分化、凋亡、癌症发生等。最近研究表明,miRNA也参与调控心血管系统的发育和疾病发生过程。在此,该文对miRNA在心血管系统发育和疾病中的作用做一综述。 展开更多
关键词 MIRNA 心脏发育 血管新生 心血管疾病
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成肌细胞自体移植及其功能的实验研究 被引量：6
6
作者 周菲 秦永文 +3 位作者 荆清 马丽萍 陈少萍 沈茜 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期148-151,共4页
目的 :观察成肌细胞自体移植后在宿主体内生长、增殖情况及对实验动物心功能的影响。方法 :将 30只SD大鼠随机分为移植组 (n =2 0 )及对照组 (n =10 ) ,另选 6只进行皮下自体移植 ,液氮冷冻大鼠左心室游离壁 ,建立心肌梗死模型。将体外... 目的 :观察成肌细胞自体移植后在宿主体内生长、增殖情况及对实验动物心功能的影响。方法 :将 30只SD大鼠随机分为移植组 (n =2 0 )及对照组 (n =10 ) ,另选 6只进行皮下自体移植 ,液氮冷冻大鼠左心室游离壁 ,建立心肌梗死模型。将体外培养的成年大鼠成肌细胞自体移植到相应大鼠的皮下及心肌疤痕中 ,观察细胞的生长、增殖情况 ,结合心脏重量指数及血流动力学等参数评价细胞移植后对心功能的影响。结果 :6只进行皮下自体移植的大鼠中 ,有 2只在移植部位形成排列紊乱的肌纤维结构。 2 0只行成肌细胞心肌内自体移植的大鼠中 ,有 6只myogenin染色阳性 ,证明成肌细胞可在宿主皮下及心肌疤痕中存活。与移植失败者及对照组相比 ,移植成功者左心室重量、左心室重量 /体重、心脏重量 /体重及左心室舒张末期压力均降低 ,有统计学差异 (P <0 0 5～ 0 0 1)。压力变化率最大值 (dp/dtmax)升高 ,有统计学差异 (P <0 0 5 )。结论 :成肌细胞自体移植后可在宿主体内生长、增殖 。 展开更多
关键词 成肌细胞 自体移植 实验研究 心肌梗塞 原代培养
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内皮素及其受体与动脉粥样硬化 被引量：5
7
作者 荆清 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 1997年第2期172-176,共5页
近来的研究表明，内皮素及其受体在动脉粥样硬化的发生和发展中起一定的作用，冠心病临床也有迹象表明内皮素系统参与了其发病。本文对此作一综述，并探讨内皮素受体拮抗剂在冠心病治疗中具有的意义和前景。
关键词 内皮素 受体 动脉粥样硬化
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抗生素在急性胰腺炎的应用(文献综述) 被引量：6
8
作者 荆清 仲剑平 景在平 《国外医学（外科学分册）》 北大核心 1990年第1期20-22,共3页
在急性胰腺炎治疗中,全身和局部的抗感染具有重要地位.抗生素透入胰液受到多种因素的影响,而血-胰液屏障是最重要的影响因素.根据抗生素透过血-胰液屏障的浓度梯次,本文推荐在急性胰腺炎中依次选用下列抗生素:氟嗪酸、氯霉素、甲硝唑、... 在急性胰腺炎治疗中,全身和局部的抗感染具有重要地位.抗生素透入胰液受到多种因素的影响,而血-胰液屏障是最重要的影响因素.根据抗生素透过血-胰液屏障的浓度梯次,本文推荐在急性胰腺炎中依次选用下列抗生素:氟嗪酸、氯霉素、甲硝唑、氯林可霉素、TMP-SMZ、乙基西梭霉素、丙氟哌酸、头孢氨噻肟. 展开更多
关键词 抗生素 胰腺炎
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微小RNA-199a对大鼠心肌肥厚的影响 被引量：5
9
作者 许旭东 宋晓伟 +1 位作者 荆清 秦永文 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期446-450,共5页
目的 探讨微小RNA（miRNA）-199a在心肌肥厚中的作用.方法 （1）Sprague-Dawley （SD）大鼠12只,分为腹主动脉缩窄（abdominal aortic constriction,AAC）组（AAC组,n=6）和假手术组（n=6）.AAC组通过腹主动脉缩窄术建立大鼠心肌肥厚模... 目的 探讨微小RNA（miRNA）-199a在心肌肥厚中的作用.方法 （1）Sprague-Dawley （SD）大鼠12只,分为腹主动脉缩窄（abdominal aortic constriction,AAC）组（AAC组,n=6）和假手术组（n=6）.AAC组通过腹主动脉缩窄术建立大鼠心肌肥厚模型.实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测心肌中部分miRNA表达的变化.（2）SD乳鼠心肌细胞分为两组,即miRNA-199a重组腺病毒（Ad-miRNA-199a）组（n=8）和腺病毒载体（Ad-vector）组（n=8）,分别转染SD乳鼠心肌细胞48 h后qRT-PCR检测心肌细胞中miRNA-199a以及心肌肥厚标志分子α肌球蛋白重链（α-myosin heavy chain,αMHC）、β肌球蛋白重链（β-myosin heavy chain,βMHC）、心房钠尿肽（atrial natriuretic peptide,ANP）编码基因myh6、myh7、Nppa的表达变化,并利用免疫荧光分析检测细胞表面积的变化.（3）SD乳鼠心肌细胞分为两组,即miRNA-199a的反义寡核苷酸（As-miRNA-199a）组（n=8）和混杂寡核苷酸（As-ctl）组（n=8）,分别转染SD乳鼠心肌细胞48 h后qRT-PCR检测心肌细胞中miRNA-199a的表达变化.（4）SD乳鼠心肌细胞分为4组,即空白对照组（n=8）、苯肾上腺素组（phenylephrine,PE）（n=8）、PE＋As-cd组（n=8）和PE＋As-miRNA-199a绀（n=8）,分别转染SD乳鼠心肌细胞48 h,qRT-PCR检测心肌肥厚标志分子编码基因的表达变化,免疫荧光检测细胞表面积的变化.结果 （1）qRT-PCR结果显示,AAC组大鼠造模后1周miRNA-1、miRNA-133、miRNA-181a及miRNA-499的表达均显著低于假手术组,而miRNA-199a表达显著高于假手术组.（2）qRT-PCR结果显示,AdmiRNA-199a组SD乳鼠心肌细胞中miRNA-199a的表达显著高于Ad-vector组,myh7的表达亦显著高于Ad-vector组,而myh6的表达低于Ad-vector组.免疫荧光显示Ad-miRNA-199a组SD乳鼠心肌细胞的表面积大于Ad-vector组,P〈0.05.（3）qRT-PCR结果显示,As-miRNA-199a组SD乳鼠心肌细胞中miRNA-199a的表达显著低于As-ctl组,P〈0.05.（4）qRT-PCR 展开更多
关键词 心肌 微RNAS
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环状RNA:一种基因调控RNA 被引量：5
10
作者 陈丹峰 张卓 荆清 《生命的化学》 CAS CSCD 2016年第6期856-861,共6页
环状RNA是一种通过共价结合线性RNA分子的3′端和其上游5′形成的闭合环状结构RNA,广泛存在于真核生物系统内,其结构具有稳定性,序列具有保守性,表达具有时空特异性。目前研究发现环状RNA的形成是受多个因素调控的,并可通过吸附miRNA分... 环状RNA是一种通过共价结合线性RNA分子的3′端和其上游5′形成的闭合环状结构RNA,广泛存在于真核生物系统内,其结构具有稳定性,序列具有保守性,表达具有时空特异性。目前研究发现环状RNA的形成是受多个因素调控的,并可通过吸附miRNA分子,在pre-mRNA的剪切过程中与线性RNA形成竞争或促进其来源的基因表达,对基因的表达具有调控作用,同时在组织的分化发育和肿瘤、心肌肥厚、动脉粥样硬化、神经系统等多种疾病的发生发展过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 环状RNA 基因表达调控 可变剪切 “反向拼接”
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MicroRNA与动脉粥样硬化 被引量：4
11
作者 安丽娜 董斐斐 +2 位作者 王国坤 单冬凯 荆清 《国际心血管病杂志》 2013年第4期210-212,共3页
动脉粥样硬化是心血管系统疾病中最常见的病变,也是众多心、脑血管疾病共同的病理基础,对人类健康造成严重威胁。MicroRNA(miRNA)是一类约由22个核苷酸组成内源性非编码小分子RNAs,通过抑制转录后基因表达或促进靶基因mRNA降解发挥重要... 动脉粥样硬化是心血管系统疾病中最常见的病变,也是众多心、脑血管疾病共同的病理基础,对人类健康造成严重威胁。MicroRNA(miRNA)是一类约由22个核苷酸组成内源性非编码小分子RNAs,通过抑制转录后基因表达或促进靶基因mRNA降解发挥重要的调节作用。miRNA可调节血管内皮细胞功能、调节血管平滑肌细胞的增生、迁移,通过调控靶基因表达来调节巨噬细胞等炎症细胞活动及炎症因子的分泌,从而在动脉粥样硬化的发生及发展过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 MICRORNA 动脉粥样硬化 血管内皮细胞 平滑肌细胞 巨噬细胞
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重组多功能抗凝多肽的表达及活性测定 被引量：1
12
作者 穆瑞斌 秦永文 +1 位作者 查艳萍 荆清 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期593-596,共4页
目的　探讨多功能抗凝多肽基因的克隆、表达的可行性及其活性的测定。方法　设计一个具有双重抗凝功能的重组多肽分子结构 ,它由谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)作为载体蛋白与重组抗凝多肽融合而成。编码重组抗凝多肽的DNA序列是根据氨基酸序... 目的　探讨多功能抗凝多肽基因的克隆、表达的可行性及其活性的测定。方法　设计一个具有双重抗凝功能的重组多肽分子结构 ,它由谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)作为载体蛋白与重组抗凝多肽融合而成。编码重组抗凝多肽的DNA序列是根据氨基酸序列逆向翻译后经人工合成 ,并插入表达质粒pGEX 5X 3中 ,与其中的编码GST序列的 3′端融合。采用大肠杆菌DH5α进行原核表达。应用亲和层析的方法得到纯化的融合蛋白。重组抗凝多肽含有 31个氨基酸 ,由 3个功能部分组成 :(1)Lys Gly Asp(KGD)氨基酸序列 ,可抑制血小板GpⅡb/Ⅲa受体与纤维蛋白原的结合 ;(2 )纤维蛋白单肽A的 7 16残基 (FBA7 16) ,是凝血酶的抑制剂。 (3)水蛭素C末端的 12肽 ,可直接抑制凝血酶。结果　纯化的融合蛋白能抑制二磷酸腺苷诱导的血小板聚集 (10 0 μmol/L时其活性为对照组的 2 0 7% ) ;随浓度增加而显著延长部分凝血活酶时间 (80 μmol/L时凝血活酶时间为 74 7s)和凝血酶时间 (80 μmol/L时为 10 2 3s)并抑制凝血酶的蛋白酶分解活性 (10 0 μmol/L时活性为对照的 11% )。同时 ,也发现GST也有抗血小板作用 ,但其作用要明显弱于融合蛋白。 展开更多
关键词 重组多功能抗凝多肽 表达 活性 测定 水蛭素 血小板聚集抑制剂
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内皮素A受体在oxLDL促血管平滑肌细胞增殖中的作用
13
作者 荆清 秦永文 +2 位作者 沈茜 张国元 吴宗贵 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期941-943,共3页
目的:研究氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对培养血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中内皮素受体A亚型(ETRA)mRNA表达水平的影响。方法:Cu2+氧化法制备oxLDL,观察oxLDL对大鼠主动脉VSMC增殖和ETRAmRNA表达的影响。将VSMC用非肽类ETRA拮抗剂BMS-182874... 目的:研究氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对培养血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中内皮素受体A亚型(ETRA)mRNA表达水平的影响。方法:Cu2+氧化法制备oxLDL,观察oxLDL对大鼠主动脉VSMC增殖和ETRAmRNA表达的影响。将VSMC用非肽类ETRA拮抗剂BMS-182874预处理后,加入10μg/mloxLDL温育24h。采用非核素MTS吸光度法测定细胞增殖,RNA印迹法检测ETRAmRNA水平。结果:低浓度oxLDL促进VSMC增殖,高浓度引起细胞毒作用;oxLDL升高ETRAmRNA水平;ETRA拮抗剂BMS-182874明显抑制oxLDL引起的增殖作用。结论:动脉粥样硬化形成中有ETRA参与,ETRA拮抗剂可能具有临床应用价值。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 内皮素A受体 OXLDL 细胞增殖
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MicroRNA在血小板产生和激活中的作用 被引量：3
14
作者 丁雪燕 宋晓伟 +1 位作者 荆清 秦永文 《国际心血管病杂志》 2013年第3期161-163,177,共4页
MicroRNA(miRNA)是调节蛋白表达的小分子非编码RNA在各种生理和病理过程中发挥重要作用。最近研究表明,大量的miRNAs如miR-150、miR-155、miR-146a、miR-27a等,在巨核细胞细胞核的分化成熟、巨核细胞胞浆内颗粒脱落形成血小板、血小板... MicroRNA(miRNA)是调节蛋白表达的小分子非编码RNA在各种生理和病理过程中发挥重要作用。最近研究表明,大量的miRNAs如miR-150、miR-155、miR-146a、miR-27a等,在巨核细胞细胞核的分化成熟、巨核细胞胞浆内颗粒脱落形成血小板、血小板成熟并具有活性的过程中发挥重要作用。由于血小板中也具有功能完整的miRNA调控机制,因此某些miRNA在血小板的表达水平与血小板特异性激动以及病理状态的反应性相协调。该文对miRNA在巨核细胞分化和血小板功能中的研究进行概述。 展开更多
关键词 MICRORNA 巨核细胞 血小板
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microRNAs：心血管疾病重要的调控因子 被引量：3
15
作者 朱霓 秦永文 荆清 《生命科学》 CSCD 2008年第2期218-221,共4页
微RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性19-25个核苷酸大小的非编码RNA分子,在进化中具有高度保守性,并且能够通过碱基匹配原则识别靶基因3'非翻译区的靶位点,从而抑制编码蛋白靶基因的翻译或(和)降解靶基因。目前的研究表明,miRNA在生... 微RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性19-25个核苷酸大小的非编码RNA分子,在进化中具有高度保守性,并且能够通过碱基匹配原则识别靶基因3'非翻译区的靶位点,从而抑制编码蛋白靶基因的翻译或(和)降解靶基因。目前的研究表明,miRNA在生物体发育、心血管疾病以及肿瘤发生等过程中起重要作用。本文对miRNA在心血管系统生理病理中的作用做一综述。 展开更多
关键词 MICRORNA 血管生成 心肌肥厚 心力衰竭 心律失常
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环状RNA:生物合成、功能及其在心血管疾病中的作用 被引量：4
16
作者 胡杨兮 油红敏 荆清 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1059-1068,共10页
环状RNA是具有环状结构的非编码RNA,其性质稳定、不易被核酸外切酶降解,进化上保守,在生物体内广泛存在,是近年来基础医学研究的热点之一。研究发现,环状RNA参与调控多种心血管疾病的发生和发展,可以作为疾病早期诊断的标志物,也是疾病... 环状RNA是具有环状结构的非编码RNA,其性质稳定、不易被核酸外切酶降解,进化上保守,在生物体内广泛存在,是近年来基础医学研究的热点之一。研究发现,环状RNA参与调控多种心血管疾病的发生和发展,可以作为疾病早期诊断的标志物,也是疾病治疗的潜在靶点。笔者对环状RNA的生物合成、功能及其在心血管疾病中的作用及研究进展做一综述。 展开更多
关键词 环状RNA 心血管疾病 生物标志物
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MicroRNA:心肌缺血-再灌注损伤的调控者 被引量：2
17
作者 单冬凯 宋晓伟 +1 位作者 安丽娜 荆清 《国际心血管病杂志》 2013年第5期269-271,275,共4页
近年来,大量实验表明microRNA(miRNA)参与并调控了心肌缺血-再灌注损伤的过程,为临床治疗心肌缺血性疾病提供了新的靶点和策略。该文简要介绍miRNA参与和调控心肌缺血-再灌注损伤的机制研究进展。
关键词 MICRORNA 缺血-再灌注损伤 急性心肌梗死
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P2Y12受体拮抗剂对裸鼠移植瘤生长的影响 被引量：2
18
作者 石屹城 宋晓伟 +2 位作者 赵仙先 秦永文 荆清 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期809-812,共4页
目的研究P2Y12受体拮抗剂对肿瘤生长的影响。方法建立HT29结肠癌和MDA231乳腺癌两种裸鼠移植瘤模型,将其随机分为对照组、氯吡格雷组和替格瑞洛组。HT29移植瘤裸鼠对照组及氯吡格雷组各20只,替格瑞洛组19只;MDA231移植瘤裸鼠对照组、氯... 目的研究P2Y12受体拮抗剂对肿瘤生长的影响。方法建立HT29结肠癌和MDA231乳腺癌两种裸鼠移植瘤模型,将其随机分为对照组、氯吡格雷组和替格瑞洛组。HT29移植瘤裸鼠对照组及氯吡格雷组各20只,替格瑞洛组19只;MDA231移植瘤裸鼠对照组、氯吡格雷组及替格瑞洛组各4只。分别使用磷酸缓冲液、氯吡格雷混悬液和替格瑞洛混悬液进行灌胃。裸鼠灌胃10 d后处死,测定肿瘤质量和体表面积,观察P2Y12受体拮抗剂对肿瘤生长的影响。结果 HT29移植瘤裸鼠中,对照组肿瘤质量(1.20±0.12)g,体表面积(233.60±20.77)mm2;氯吡格雷组肿瘤质量(0.99±0.08)g,体表面积(192.30±13.28)mm2;替格瑞洛组肿瘤质量(1.04±0.11)g,体表面积(211.10±19.21)mm2;3组间肿瘤质量及体表面积之间差异无统计学意义(P>0.05)。MDA231移植瘤裸鼠中,对照组肿瘤质量(0.65±0.17)g,体表面积(149.80±27.08)mm2;氯吡格雷组肿瘤质量(1.04±0.24)g,体表面积(183.80±30.18)mm2;替格瑞洛组肿瘤质量(1.08±0.35)g,体表面积(201.30±45.62)mm2;3组间肿瘤质量及体表面积之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 P2Y12受体拮抗剂对裸鼠移植瘤生长无明显促进或抑制作用。 展开更多
关键词 P2Y12受体拮抗剂 血小板 移植瘤模型
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精神疲劳和行为功能测定研究 被引量：2
19
作者 陈宝骥 迟秋阳 +4 位作者 张洪 洪波 管军 荆清 王红蓓 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 1992年第3期173-177,共5页
本文研究和设计用微机测量人的5类8种精神行为功能,判断疲劳。具体指标有自我感觉、记忆力、视觉运动反应时、闪烁融合频率临界值和阅读能力测验。为部队制订合理的作息制度和适当劳动负荷提供科学的参考依据。在高炮部队、雷达兵部队... 本文研究和设计用微机测量人的5类8种精神行为功能,判断疲劳。具体指标有自我感觉、记忆力、视觉运动反应时、闪烁融合频率临界值和阅读能力测验。为部队制订合理的作息制度和适当劳动负荷提供科学的参考依据。在高炮部队、雷达兵部队、警卫通讯连和军医大学学员共101人的测试中,证明本测试系统设计科学、性能稳定、效果可靠、评分的客观性强,可以定性、定量地研究疲劳。 展开更多
关键词 精神疲劳 行为功能 微机测定系统
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逆转录病毒介导的对原代培养成年大鼠成肌细胞基因转染的研究 被引量：2
20
作者 周菲 秦永文 +2 位作者 荆清 马丽萍 陈少萍 《临床军医杂志》 CAS 2004年第1期1-4,共4页
目的　探索成年大鼠成肌细胞的原代培养方法以及逆转录病毒对其的基因转染。方法　取成年SD大鼠的胸大肌 ,利用组织块法进行培养 ,并对培养细胞进行形态学研究和免疫细胞化学鉴定。以逆转录病毒为载体 ,将绿色荧光蛋白基因导入成年大鼠... 目的　探索成年大鼠成肌细胞的原代培养方法以及逆转录病毒对其的基因转染。方法　取成年SD大鼠的胸大肌 ,利用组织块法进行培养 ,并对培养细胞进行形态学研究和免疫细胞化学鉴定。以逆转录病毒为载体 ,将绿色荧光蛋白基因导入成年大鼠成肌细胞 ,利用倒置荧光显微镜及流式细胞仪对转染细胞进行观察。结果　采用组织块培养法 ,2周后成肌细胞的密度可达 10 7/ml,免疫细胞化学分析显示 90 %以上的细胞呈骨骼肌特异的myogenin抗体染色阳性。荧光显微镜和流式细胞仪检测发现eGFP基因可在成年大鼠成肌细胞中有效地表达 ,其转染效率约为 12 82 %。结论　利用组织块法成功培养成年大鼠原代成肌细胞 ,该方法实用性强 ,所得成肌细胞纯度高 ;逆转录病毒可介导成肌细胞的基因转导 ,为深入研究心肌梗死瘢痕中转基因成肌细胞自体移植奠定了基础。 展开更多
关键词 逆转录病毒介导 原代培养 成年大鼠 成肌细胞 基因转染 心肌梗死
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