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马抗天花病毒免疫球蛋白F(ab′)2的制备及免疫防护效果评价 被引量：1
1
作者 闫莉 李敏 +6 位作者 刘媛 杨晓岚 谷宏婧 范铁炯 张志平 闫芳 赵忠鹏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1334-1338,共5页
采用鸡胚成纤维原代细胞培养痘苗病毒天坛株抗原,甲醛灭活后,利用密度梯度离心法和层析法两步纯化抗原,加入等量ISA206佐剂充分乳化,免疫健康马匹,当中和抗体效价达1∶3200时,采血,分离血清,按照免疫球蛋白F(ab′)2生产工艺制备治疗性... 采用鸡胚成纤维原代细胞培养痘苗病毒天坛株抗原,甲醛灭活后,利用密度梯度离心法和层析法两步纯化抗原,加入等量ISA206佐剂充分乳化,免疫健康马匹,当中和抗体效价达1∶3200时,采血,分离血清,按照免疫球蛋白F(ab′)2生产工艺制备治疗性抗体成品,并对其进行中和抗体效价、防护效力、安全性检测。结果显示,鸡胚成纤维原代细胞培养痘苗病毒天坛株滴度均在1.0×10^7 PFU/mL以上;纯化的抗原纯度在90%以上;纯化的F(ab′)2成品,纯度在90%以上,中和抗体效价超过1∶3200,有很好的免疫防护效力,安全性符合现行《中国药典》要求。结果表明,建立了马抗天花病毒免疫球蛋白F(ab′)2制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求,为天花治疗提供了新的救命药。 展开更多
关键词 天花 免疫球蛋白F(ab′)2 马抗
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马抗埃博拉病毒免疫球蛋白F(ab′)2的制备及效果评价 被引量：1
2
作者 刘媛 李敏 +6 位作者 杨晓岚 范铁炯 李晓 张华捷 李靖 闫芳 赵忠鹏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期324-329,共6页
采用昆虫杆状病毒表达系统,分别制备埃博拉病毒(Ebola virus,EV)埃博拉-扎伊尔(Ebola-Zaire,Z-E)、埃博拉-苏丹(Ebola-Sudan,S-E)病毒样颗粒(virus like particles,VLP)抗原,利用区带离心法和层析法两步纯化抗原,2种抗原等量混合并加入... 采用昆虫杆状病毒表达系统,分别制备埃博拉病毒(Ebola virus,EV)埃博拉-扎伊尔(Ebola-Zaire,Z-E)、埃博拉-苏丹(Ebola-Sudan,S-E)病毒样颗粒(virus like particles,VLP)抗原,利用区带离心法和层析法两步纯化抗原,2种抗原等量混合并加入等量不完全佐剂充分乳化,免疫马匹;当利用自制的Z-E、S-EEV假病毒测定血清的中和抗体效价均达120/μL时,采血,分离血清,按照免疫球蛋白F(ab′)2生产工艺制备治疗性抗体成品,并对其进行中和抗体效力、安全性检测。结果显示,包装的2种假病毒滴度均在40 000荧光值/μL以上;纯化的2种VLP抗原浓度均在3 mg/L以上,纯度均在95%以上;纯化的F(ab′)2成品,纯度在90%以上,中和抗体效价均超过100/μL;安全性符合现行《中国药典》要求。结果表明,建立了马抗EV免疫球蛋白F(ab′)2制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求,为埃博拉病毒病(Ebola virus disease,EVD)治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 埃博拉病毒(EV) 免疫球蛋白F(ab′)2 马抗 病毒样颗粒 假病毒
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抗蓖麻毒素精制免疫球蛋白的制备及免疫防治效果评价
3
作者 杨晓岚 李敏 +10 位作者 谷宏婧 李欣昱 段跃强 范铁炯 李鑫 杨鹏辉 刘国凤 刘媛 闫芳 贺威 赵忠鹏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1564-1569,共6页
研制抗蓖麻毒素精制免疫球蛋白,即马抗蓖麻毒素免疫球蛋白F(ab′)_2制品,为蓖麻毒素中毒的防治提供特效药。利用传统方法,从蓖麻籽中提取、纯化脱毒蓖麻毒素,加入适量弗氏佐剂充分乳化,免疫马匹,测定免疫马匹血清中和抗体效价并采血,分... 研制抗蓖麻毒素精制免疫球蛋白,即马抗蓖麻毒素免疫球蛋白F(ab′)_2制品,为蓖麻毒素中毒的防治提供特效药。利用传统方法,从蓖麻籽中提取、纯化脱毒蓖麻毒素,加入适量弗氏佐剂充分乳化,免疫马匹,测定免疫马匹血清中和抗体效价并采血,分离血清,按照免疫球蛋白F(ab′)_2生产工艺制备治疗性抗体成品,并对成品进行中和抗体效力检测、安全性检测及免疫防治效果评价。结果显示,纯化的蓖麻毒素抗原,经HPLC法测定纯度大于90%,腹腔注射对小鼠的半数致死量(LD_(50))约为6.38μg/kg;免疫马匹血清中和抗体效价达1∶64000以上时,采血并制备F(ab′)_2成品,纯度在80%以上,中和抗体效价均超过6000 U/mL;安全性符合现行《中国药典》要求,对蓖麻毒素中毒动物模型有很好的免疫防治效果。本研究建立了蓖麻毒素精制免疫球蛋白制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求,为蓖麻毒素中毒的防治提供了新的救命药。 展开更多
关键词 蓖麻毒素 免疫球蛋白 动物模型
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金黄色葡萄球菌肠毒素B精制免疫球蛋白对小鼠中毒模型的免疫救治效果研究
4
作者 韩慧 李敏 +10 位作者 杨晓岚 段跃强 谷宏婧 范铁炯 李鑫 杨鹏辉 刘媛 闫芳 郑源强 石艳春 赵忠鹏 《生物技术通讯》 CAS 2019年第6期756-761,共6页
目的:研制金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)精制免疫球蛋白,即马抗SEB免疫球蛋白F(ab′)2制品,为SEB中毒的救治提供候选药。方法:利用传统的发酵和纯化工艺制备天然SEB纯品,并建立小鼠实验动物模型;利用分子克隆和蛋白质纯化技术,克隆、表达... 目的:研制金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)精制免疫球蛋白,即马抗SEB免疫球蛋白F(ab′)2制品,为SEB中毒的救治提供候选药。方法:利用传统的发酵和纯化工艺制备天然SEB纯品,并建立小鼠实验动物模型;利用分子克隆和蛋白质纯化技术,克隆、表达、纯化重组SEB,加入适量弗氏佐剂充分乳化,免疫马匹,测定免疫马匹血清中和抗体效价后采血,分离血清,按照成熟的生产工艺制备治疗性抗体成品;对成品进行安全性检测及免疫救治效果评价。结果:纯化的天然SEB经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为0.5μg/kg;纯化的重组SEB表达量超过2 mg/mL,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为50μg/kg;免疫马匹血清中和抗体效价达2000 U/mL以上时,采血并制备F(ab′)2成品,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度在80%以上,中和抗体效价超过2500 U/mL;安全性符合现行《中国药典》要求;对SEB中毒动物模型有很好的免疫救治效果。结论:建立了SEB精制免疫球蛋白制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求,为SEB中毒的救治提供了候选药。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素B 免疫球蛋白 动物模型
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