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流行性乙型脑炎减毒活疫苗SA_(14)-14-2E基因的稳定性 被引量:12
1
作者 俞永新 +1 位作者 李德富 姚智慧 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期39-47,共9页
分别对SA14 - 14- 2 (PHK8代 )疫苗株及其原野毒株SA14 和另 2个疫苗传代株 [SA14 - 14- 2 (PHK17代 )和SA14 - 14- 2 (鼠脑 1代 ) ]的E区基因进行了序列测定。结果表明 ,乙脑病毒减毒活疫苗SA14 - 14- 2在PHK细胞上连传至 17代时 ,发... 分别对SA14 - 14- 2 (PHK8代 )疫苗株及其原野毒株SA14 和另 2个疫苗传代株 [SA14 - 14- 2 (PHK17代 )和SA14 - 14- 2 (鼠脑 1代 ) ]的E区基因进行了序列测定。结果表明 ,乙脑病毒减毒活疫苗SA14 - 14- 2在PHK细胞上连传至 17代时 ,发现 2个氨基酸突变 (E - 331、E - 398) ,但不是回复突变。虽然在毒力最容易返祖的乳鼠脑内传 1代后发生E - 10 7个氨基酸回复 ,但与野毒株毒力相比仍然相差很大 ,无毒力返祖现象。在疫苗的实际质控工作中 ,对上述与毒力相关的基因进行监测 ,可能有助于发现减毒活疫苗的毒力水平 ,为疫苗安全性提供更可靠的检测手段。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 传代 E基因序列 基因稳定性 减毒活疫苗
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我国自行研制的冻干水痘减毒活疫苗的临床效果评价 被引量:20
2
作者 周铁群 陈震 +19 位作者 王剑锋 英志芳 邱平 李娟 李长贵 方捍华 陈海平 李秀玲 谢芸 许丽锋 郭绍红 董春明 刘立新 罗耀兴 蔡汉港 张吉凯 徐宁 张铭驱 李建基 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期342-345,共4页
目的考核和评价我国自行分离毒株研制的冻干水痘减毒活疫苗的安全性和免疫原性。方法采用随机、双盲、对照的原则进行设计,在2~6岁健康人群中进行开放式临床观察。结果试验疫苗共接种易感儿童738人,接种后的总体中强发热反应率为5.96%(... 目的考核和评价我国自行分离毒株研制的冻干水痘减毒活疫苗的安全性和免疫原性。方法采用随机、双盲、对照的原则进行设计,在2~6岁健康人群中进行开放式临床观察。结果试验疫苗共接种易感儿童738人,接种后的总体中强发热反应率为5.96%(44738),皮疹水痘样皮疹发生率为0.68%(5738);易感者接种39810PFU、2000PFU以及500PFU病毒量的疫苗后,抗体GMT分别为36.4、34.3和18.6;抗体阳转率分别为100%、98.77%和85.42%。结论我国自行研制的水痘疫苗具有较好的安全性和免疫原性。 展开更多
关键词 冻干水痘减毒活疫苗 安全性 免疫原性 中国 自主知识产权
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱原理及其在微生物研究中的应用 被引量:12
3
作者 杨明 +2 位作者 陈天游 李景云 段凯 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期2969-2973,共5页
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在生物大分子的检测中正得到越来越多的使用。为了对质谱在微生物领域的应用提供参考,本文对质谱的原理进行了概述,并对其在微生物鉴定、分型、耐药性研究等方面的应用进行了总结。目前... 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在生物大分子的检测中正得到越来越多的使用。为了对质谱在微生物领域的应用提供参考,本文对质谱的原理进行了概述,并对其在微生物鉴定、分型、耐药性研究等方面的应用进行了总结。目前,该法已经在对革兰阴性菌、革兰阳性菌、酵母以及真菌鉴定方面得到应用;在分型方面,已经发现大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等越来越多细菌特征性的生物标签,为微生物质谱分型研究打下基础;在细菌耐药性方面,已经能够通过质谱方法区分耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐万古霉素粪肠球菌等耐药菌群。该法具有快速、准确、便捷和廉价等优点,为微生物学研究提供了新的手段。 展开更多
关键词 质谱 微生物 鉴定 分型 耐药性
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呼吸道合胞病毒F蛋白研究进展 被引量:9
4
作者 周铁群 《微生物学免疫学进展》 2004年第4期73-76,共4页
人类呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白(F蛋白)为病毒表面结构蛋白,可以刺激机体产生保护性抗体。因此对F蛋白的深入研究将有助于了解病毒感染的机理,从而为诊断试剂和亚单位疫苗的研制提供帮助。本文就F蛋白结构及结构与功能关系的研究进展... 人类呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白(F蛋白)为病毒表面结构蛋白,可以刺激机体产生保护性抗体。因此对F蛋白的深入研究将有助于了解病毒感染的机理,从而为诊断试剂和亚单位疫苗的研制提供帮助。本文就F蛋白结构及结构与功能关系的研究进展进行简要综述。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 F蛋白
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乙型脑炎病毒野毒株及其不同株减毒株E蛋白基因序列比较 被引量:9
5
作者 俞永新 +1 位作者 李德富 姚智慧 《中国病毒学》 CSCD 2002年第3期216-220,共5页
为了解乙脑减毒活疫苗株SA14 14 2的神经毒力减毒机制 ,用RT PCR方法分别扩增不同减毒程度毒株的E基因 ,克隆、测序 ,继而对各毒株序列进行比较。结果表明SA14 强毒株与SA14 12 1 7株间只有 3个氨基酸发生改变 (E 10 7,E 176 ,E 4 3... 为了解乙脑减毒活疫苗株SA14 14 2的神经毒力减毒机制 ,用RT PCR方法分别扩增不同减毒程度毒株的E基因 ,克隆、测序 ,继而对各毒株序列进行比较。结果表明SA14 强毒株与SA14 12 1 7株间只有 3个氨基酸发生改变 (E 10 7,E 176 ,E 4 39) ,SA14 12 1 7与SA14 9 7和SA14 5 3株间有另 3个氨基酸发生改变 (E 138,E 2 79,E 315 )。SA14 9 7株与SA14 5 3株只有一个核苷酸NT 4 0 5不同 ,但未引起氨基酸改变。SA14 14 2疫苗株除保留SA14 12 1 7和SA14 9 7所改变的 6个氨基酸外 ,另有 2个氨基酸发生了改变 (E 177,E 2 6 4 ) ,共计在E区共发生 8个氨基酸的替代。SA14 12 1 7株的低神经毒力很不稳定而其余各株的弱毒特征很稳定。因此 ,E 176 (Ile→Val) ,E 4 39(Lys→Arg)和E 10 7(Leu→Phe)可能与神经外和神经内毒力减弱有关。E 138(Gul→Lys) ,E 315 (Ala→Val)和E 2 79(Lys→Met) 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒野毒株 减毒株 E蛋白基因序列比较 神经毒力 EG基因 毒力稳定性
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EB病毒诊断学意义及其方法学进展 被引量:9
6
作者 陈天游 《微生物学免疫学进展》 2009年第3期50-53,共4页
EB病毒可以导致多种疾病,其与鼻咽癌的关系已得到确认。近年来发现EB病毒在人体内感染情况对于鼻咽癌的诊断、临床分期、预后判断和监测放疗后转移复发等均具有重要意义。各种EB病毒检测方法应运而生。本文就EB病毒诊断方法进展及其意... EB病毒可以导致多种疾病,其与鼻咽癌的关系已得到确认。近年来发现EB病毒在人体内感染情况对于鼻咽癌的诊断、临床分期、预后判断和监测放疗后转移复发等均具有重要意义。各种EB病毒检测方法应运而生。本文就EB病毒诊断方法进展及其意义作一综述。 展开更多
关键词 EB病毒 诊断方法 抗体 核酸
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乙型脑炎病毒减毒中间株SA_(14)-12-1-7基因组全序列的测定 被引量:5
7
作者 曾明 俞永新 +3 位作者 董关木 姚智慧 李德富 《中国病毒学》 CSCD 2002年第3期206-210,共5页
本研究通过对乙型脑炎活疫苗减毒过程中间株SA14 12 1 7株进行全序列测定和分析 ,进一步了解乙脑活疫苗减毒及其稳定性的分子机制。根据已发表的SA14 14 2株及SA14 株的序列 ,设计 6对重叠引物 ,涵括整个乙脑病毒的基因组 ,通过RT ... 本研究通过对乙型脑炎活疫苗减毒过程中间株SA14 12 1 7株进行全序列测定和分析 ,进一步了解乙脑活疫苗减毒及其稳定性的分子机制。根据已发表的SA14 14 2株及SA14 株的序列 ,设计 6对重叠引物 ,涵括整个乙脑病毒的基因组 ,通过RT PCR扩增出SA14 12 1 7株的各cDNA片段 ,分别克隆到pGEM T载体 ,转化至TG1受体菌中 ,挑取阳性克隆进行鉴定后测序。结果表明SA14 12 1 7株基因组全序列长 10 976个核苷酸 ,从 96到 10 394为一个长开放读码框 ,编码 3432个氨基酸。与野毒株SA14 和疫苗株SA14 14 2的核苷酸序列和氨基酸序列相比 ,同源性均在 99%以上 ,突变位点分散于各个区域 ,E区有 5个位点与疫苗株一致而与野毒株不同 ,3个位点与野毒株一致而与疫苗株不同 ,推测与其容易产生回复突变、恢复毒力有关。此外 ,NS3、NS5和 3′NTR的几个位点可能与病毒毒力稳定性相关。综上所述 ,乙脑病毒减毒中间株的基因组全序列基本类似于已发表的序列 ,若干突变位点影响病毒的弱毒性及毒力的稳定性。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 减毒中间株SA14-12-1-7 基因组全序列
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甲型H1N1流感病毒核酸国家参考品的研制 被引量:7
8
作者 李长贵 +4 位作者 王大燕 方捍华 李凤翔 白东亭 王军志 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第12期1193-1195,共3页
目的研制甲型H1N1流感病毒核酸国家参考品。方法收集甲型H1N1流感病毒及其他病毒培养物,用实时荧光PCR方法逐一进行验证。参考品通过协同标定,确定最低检出限范围,7家单位进行适用性检测。反复冻融观察其稳定性。结果所用的3株病毒经实... 目的研制甲型H1N1流感病毒核酸国家参考品。方法收集甲型H1N1流感病毒及其他病毒培养物,用实时荧光PCR方法逐一进行验证。参考品通过协同标定,确定最低检出限范围,7家单位进行适用性检测。反复冻融观察其稳定性。结果所用的3株病毒经实时荧光PCR验证,特异性良好,经基因芯片进一步验证,均为甲型H1N1流感病毒,且无其他病毒核酸污染,经7家单位检测,符合国家参考品标准要求;反复冻融3次后,稳定性良好。结论建立了第1套甲型H1N1流感病毒核酸国家参考品及相应的质量标准,并已被国家有关部门批准正式使用。 展开更多
关键词 甲型H1N1流感病毒 核酸 国家参考品
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胶原蛋白自组装光谱检测方法研究进展
9
作者 赵子希 陈亮 《中国医疗器械信息》 2024年第1期42-45,共4页
胶原蛋白结构是其功能特性的基础,而胶原蛋白自组装过程是结构形成的关键环节。通过紫外-可见光、浊度法、荧光分度法、红外光谱、圆二色光谱术和核磁共振波谱法等方法可对胶原蛋白自组装过程进行监测和评价,并可用于建立胶原蛋白类医... 胶原蛋白结构是其功能特性的基础,而胶原蛋白自组装过程是结构形成的关键环节。通过紫外-可见光、浊度法、荧光分度法、红外光谱、圆二色光谱术和核磁共振波谱法等方法可对胶原蛋白自组装过程进行监测和评价,并可用于建立胶原蛋白类医疗产品质量控制和评价有效方法。 展开更多
关键词 胶原蛋白 自组装 检测
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进口轮状病毒疫苗RotaTeq的热稳定性 被引量:3
10
作者 杜加亮 刘艳 +6 位作者 焦洋 于晴川 刘悦越 赵荣荣 高加梅 国泰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第8期849-854,共6页
目的分析进口轮状病毒(rotavirus,RV)疫苗RotaTeq(RV5)的热稳定性。方法采用荧光定量PCR法分别测定22~25和37℃条件下放置不同时间的RV5疫苗滴度,以参考疫苗株滴度为标准,计算RV5疫苗5个型别毒株(G1、G2、G3、G4、P1)滴度和总滴度。同... 目的分析进口轮状病毒(rotavirus,RV)疫苗RotaTeq(RV5)的热稳定性。方法采用荧光定量PCR法分别测定22~25和37℃条件下放置不同时间的RV5疫苗滴度,以参考疫苗株滴度为标准,计算RV5疫苗5个型别毒株(G1、G2、G3、G4、P1)滴度和总滴度。同时扩增RV5疫苗G3型毒株的VP7序列,并与GenBank中登录的原型病毒株r G3的VP7序列进行比较。结果22~25℃条件下,G1、G2、G3、G4、P1型毒株滴度和总滴度每天下降速度分别为3.51%、2.26%、3.19%、5.22%、3.18%和3.61%,各型别毒株间差异无统计学意义(P>0.05);37℃条件下,G3型毒株滴度的下降速度(31.20%/h)明显高于其他型别毒株(G1、G2、G4、P1下降速度分别为每小时0.75%、0.31%、1.08%和2.07%),差异有统计学意义(P<0.05)。G3型毒株滴度于37℃的半衰期仅为0.07 d,其原型株rG3的半衰期可达2.10 d。RV5疫苗G3型疫苗株与其原型株的差异包括散在的氨基酸差异(F32L、T69A、L83F、I118T、D151G、P275L)及位于5′UTR(T25C)和3′UTR(G1041A、A1045G、G1046A、G1047A、C1048T、A1053T)较聚集的核苷酸差异。结论RV5疫苗中各型别毒株在22~25℃时热稳定性良好,但在37℃时G3型疫苗株是影响RV5疫苗热稳定性的关键,位于VP7 UTR的核苷酸突变可能是导致其热稳定性降低的主要原因。 展开更多
关键词 轮状病毒 热稳定性 RotaTeq 非翻译区
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人巨细胞病毒IgM抗体国家参考品的研制 被引量:3
11
作者 英志芳 +2 位作者 李长贵 白东亭 王军志 《微生物学免疫学进展》 2012年第3期30-33,共4页
目的为了对人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)IgM抗体检测试剂进行统一评价,研制HCMVIgM抗体国家参考品,用于控制试剂盒的质量。方法收集正常人与感染者的标本,采用多实验室联合标定的方法确认参考品的试验结果,并经一系列的破... 目的为了对人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)IgM抗体检测试剂进行统一评价,研制HCMVIgM抗体国家参考品,用于控制试剂盒的质量。方法收集正常人与感染者的标本,采用多实验室联合标定的方法确认参考品的试验结果,并经一系列的破坏条件进行稳定性和均匀性考核。结果考核的敏感性和准确性符合国家参考品的要求。结论该参考品能用于临床检测试剂的质量控制。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 国家参考品 质量控制 IGM
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16S rRNA基因荧光定量PCR与芯片杂交法快速诊断儿童化脓性脑膜炎 被引量:3
12
作者 杨祖钦 +2 位作者 吴亦栋 俞锡林 尚世强 《浙江检验医学》 2006年第3期3-6,共4页
目的探索快速诊断儿童化脓性脑膜炎的新技术。方法通过设计细菌16SrRNA基因高度保守区的引物和探针,对疑似化脑的21份脑脊液(CSF)进行荧光定量PCR及基因芯片杂交检测,同时与脑脊液细菌培养结果比较。结果(1)荧光定量PCR发现21份脑脊液... 目的探索快速诊断儿童化脓性脑膜炎的新技术。方法通过设计细菌16SrRNA基因高度保守区的引物和探针,对疑似化脑的21份脑脊液(CSF)进行荧光定量PCR及基因芯片杂交检测,同时与脑脊液细菌培养结果比较。结果(1)荧光定量PCR发现21份脑脊液标本有8份阳性,阳性率为38.095%(8/21),明显高于脑脊液培养的阳性率19.047%(4/21),差异具有显著意义(P【0.01)。(2)基因芯片杂交结果8份阳性,其中大肠埃希菌探针阳性5份,肠道杆菌科探针阳性2份,金黄色葡萄球菌探针阳性1份;脑脊液培养4份阳性,分别为肺炎克雷伯菌培养阳性1份,阴沟肠杆菌阳性1份,大肠埃希菌阳性2份;基因芯片杂交阳性率为38.095%(8/21),芯片杂交阳性结果与荧光定量PCR大体一致。结论荧光定量PCR结合基因芯片杂交技术检测儿童化脑具有快速、敏感、特异的特点,对儿童化脓性脑膜炎的早期诊断有一定的应用价值。 展开更多
关键词 荧光定量PCR 芯片 化脓性脑膜炎
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血浆中丙型肝炎病毒核酸在不同保存条件下的稳定性 被引量:3
13
作者 刘悦越 高加梅 +3 位作者 杜加亮 刘艳 国泰 《检验医学与临床》 CAS 2015年第3期289-291,294,共4页
目的:探讨不同保存条件和时间对丙型肝炎病毒(HCV)RNA稳定性的影响。方法将22份血浆样本置于-20℃保存4周,4℃保存12 d ,室温(20~25℃)保存7 d ,反复冻融5次,采用荧光定量聚合酶链反应测定HCV RNA水平,考察 HCV RNA稳定性... 目的:探讨不同保存条件和时间对丙型肝炎病毒(HCV)RNA稳定性的影响。方法将22份血浆样本置于-20℃保存4周,4℃保存12 d ,室温(20~25℃)保存7 d ,反复冻融5次,采用荧光定量聚合酶链反应测定HCV RNA水平,考察 HCV RNA稳定性。结果样本在-20℃保存4周 HCV RNA平均下降幅度小于或等于0.14 lg ,±95% CI≤0.20 lg ;4℃保存12 d HCV RNA平均下降幅度小于或等于0.39 lg ,4℃保存12 d时95%CI下限为-0.50 lg ,<12 d时±95% CI≤0.24 lg ;室温保存7 d HCV RNA平均下降幅度小于或等于0.40 lg ,室温保存7 d处理组95% CI下限为-0.53 lg ,<7 d时±95% CI≤0.29 lg ;反复冻融5次 HCV RNA平均下降幅度小于或等于0.10 lg ,±95% C I≤0.15 lg。结论血浆样本在-20℃保存4周、4℃保存9 d、室温保存5 d和反复冻融5次时,对HCV RNA水平影响不明显,但4℃保存12 d或室温保存7 d后,RNA水平显著降低,所以应避免在这种条件和时间下保存和运输血浆。 展开更多
关键词 丙型肝炎 核酸 稳定性
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口服轮状病毒活疫苗病毒滴度评价国家参考品的制备 被引量:2
14
作者 刘艳 高加梅 +8 位作者 周旭 鱼柯 石岩 刘悦越 杜加亮 张韵祺 赵岩 国泰 《国际生物制品学杂志》 CAS 2016年第5期214-217,共4页
目的 制备口服轮状病毒(rotavirus,RV)活疫苗病毒滴度评价的国家参考品.方法 选取检定合格的口服RV活疫苗原液,加入保护剂,1.0 ml/安瓿分装,冷冻干燥,制备病毒滴度参考品.用微量细胞病变法检测参考品的病毒滴度,用Karber法计算半数细... 目的 制备口服轮状病毒(rotavirus,RV)活疫苗病毒滴度评价的国家参考品.方法 选取检定合格的口服RV活疫苗原液,加入保护剂,1.0 ml/安瓿分装,冷冻干燥,制备病毒滴度参考品.用微量细胞病变法检测参考品的病毒滴度,用Karber法计算半数细胞培养感染量(50% cell culture infective dose,CCID50).由3家实验室对参考品的病毒滴度进行协同标定,采用单因素方差分析和最小显著差数法对3家实验室的标定结果进行统计学分析.另外,将参考品于-20℃放置1年、4℃放置1年、37℃放置14d、-60℃放置2年,测定病毒滴度,分析参考品的热稳定性和长期稳定性.结果 经单因素方差分析比较,3家实验室检测结果的差异无统计学意义(F=0.379,P=0.686).采用最小显著差数法对3家实验室检测结果的均值进行两两比较,差异亦无统计学意义(s(x)值均为0.078 2,P值均>0.05).参考品的平均病毒滴度为6.5 lgCCID50/ml,于不同温度放置一段时间后病毒滴度下降均未超过1.0 lgCCID50/ml.长期稳定性试验结果的变异系数为4.9%.结论 制备了可用于口服RV活疫苗病毒滴度检测的国家参考品. 展开更多
关键词 轮状病毒疫苗 病毒滴度 参考标准
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TG-ROC分析方法在检测试剂质量评价中的应用 被引量:2
15
作者 杜加亮 陈佑 +6 位作者 高加梅 刘悦越 刘艳 于晴川 唐年胜 国泰 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第17期2361-2363,共3页
目的比较人类T淋巴细胞白血病病毒(HTLV)ELISA检测试剂和Western Blot(简称WB)确认试剂的关系,分析HTLV检测试剂的质量水平。方法通过WB确认试剂对156份ELISA初筛阳性的人血清标本进行HTLV抗体的检测,使用TG-ROC分析方法来选出ELISA最... 目的比较人类T淋巴细胞白血病病毒(HTLV)ELISA检测试剂和Western Blot(简称WB)确认试剂的关系,分析HTLV检测试剂的质量水平。方法通过WB确认试剂对156份ELISA初筛阳性的人血清标本进行HTLV抗体的检测,使用TG-ROC分析方法来选出ELISA最佳CO值(阈值),以2×2列联表分析这两种检测结果的一致性,并用McNemar检验评估检测结果的一致性,综合评价HTLV检测试剂质量水平。结果 156份ELISA初筛阳性的人血清标本经过WB进行确证后仅有40份为阳性,其余116份为阴性。TG-ROC分析结果得出该ELISA检测试剂的敏感性和特异性分别为97.5%和45.7%,McNemar检验也表明ELISA与WB检测结果差异有统计学意义(P<0.05)。通过调整阈值,能使ELISA敏感性和特异性同时达到88.8%(参数法)。比较参数法和非参数法,得到曲线下面积为0.923 5(参数法),两者的结论基本一致。结论虽然该ELISA试剂结果与WB结果有差别,但是通过调整阈值,可以提高其敏感性和特异性,继而增加诊断结果的可靠性。 展开更多
关键词 检测试剂 质量评价 TG-ROC
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口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗的稳定性 被引量:2
16
作者 刘悦越 赵岩 +6 位作者 杜加亮 张韵祺 刘艳 于晴川 高加梅 国泰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第11期1195-1200,1205,共7页
目的考察口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗在不同温度和pH环境下的稳定性。方法将6批疫苗分别于2~8℃放置6个月、22~25℃放置7 d、37℃放置7 d、-20℃放置27、30、33个月,或反复冻融5次;将疫苗pH调至3.0~10.0。采用细胞培养半数感染量(... 目的考察口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗在不同温度和pH环境下的稳定性。方法将6批疫苗分别于2~8℃放置6个月、22~25℃放置7 d、37℃放置7 d、-20℃放置27、30、33个月,或反复冻融5次;将疫苗pH调至3.0~10.0。采用细胞培养半数感染量(cell culture infective dose 50%,CCID50)法检测病毒总滴度及分型滴度。结果口服二价脊髓灰质炎减毒活疫苗在2~8℃保存6个月,22~25℃保存5 d,37℃保存2 d,反复冻融5次,-20℃保存27个月,pH 3.0~10.0环境下,疫苗效力均符合质量标准。结论疫苗的保存温度及时间对其稳定性均有影响。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎 二价疫苗 稳定性
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非洲绿猴肾细胞中猪圆环病毒1型的检测 被引量:1
17
作者 刘艳 于晴川 +7 位作者 杜加亮 刘悦越 李东 高加梅 张韵祺 赵荣荣 国秦 《国际生物制品学杂志》 CAS 2017年第2期62-66,共5页
目的建立轮状病毒疫苗污染事件中的外源因子猪圆环病毒1型(porcine circovirus type1,PCV1)感染非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)的检测方法。方法培养感染PCV1的Vero细胞6d后,通过定性PCR、定量PCR、电子显微镜(电镜)检查和原位杂交检... 目的建立轮状病毒疫苗污染事件中的外源因子猪圆环病毒1型(porcine circovirus type1,PCV1)感染非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)的检测方法。方法培养感染PCV1的Vero细胞6d后,通过定性PCR、定量PCR、电子显微镜(电镜)检查和原位杂交检测PCV1的复制与增殖。结果从感染PCV1的Vero细胞培养物提取的DNA,其PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳可见特异性条带;定量PCR检测显示,感染6d后病毒总拷贝数是感染前的794.3倍;定性和定量PCR的最低检出浓度均为10^2.0拷贝/ml;电镜观察到PCV1特征性形态病毒颗粒;原位杂交检测到出现深色阳性信号的PCV1阳性细胞。结论PCV1感染Vero细胞后的复制增殖可以通过上述方法进行检测。 展开更多
关键词 圆环病毒属 VERO细胞 聚合酶链反应 显微镜检查 电子 原位杂交
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流感病毒诊断方法及试剂研究进展 被引量:1
18
作者 李长贵 《生物产业技术》 2010年第2期28-33,共6页
流感病毒流行广泛、种类繁多、变异迅速,是人类最主要的健康威胁之一。在流感预防控制的不同环节,对流感病毒诊断试剂的灵敏度、特异性、简便性和使用成本有不同的要求。患者标本类型和采样质量对流感病毒诊断的准确性有较大影响。本文... 流感病毒流行广泛、种类繁多、变异迅速,是人类最主要的健康威胁之一。在流感预防控制的不同环节,对流感病毒诊断试剂的灵敏度、特异性、简便性和使用成本有不同的要求。患者标本类型和采样质量对流感病毒诊断的准确性有较大影响。本文就当前国内外流感病毒诊断技术的研究现状和发展趋势进行了综述。 展开更多
关键词 流行性感冒病毒 诊断技术
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甲型流感病毒抗原检测试剂盒质控参考品的研制 被引量:1
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作者 刘悦越 +4 位作者 陈天游 刘艳 邵铭 赵慧 王军志 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第8期1039-1041,1047,共4页
目的研制甲型流感病毒抗原检测试剂盒质控参考品。方法收集甲型流感病毒阳性样本、乙型流感病毒阳性样本和非流感病毒样本,采用流感病毒抗原检测试剂盒方法对样本进行验证。通过协同标定参考品,确定最低检出限范围,3家单位进行适用性检... 目的研制甲型流感病毒抗原检测试剂盒质控参考品。方法收集甲型流感病毒阳性样本、乙型流感病毒阳性样本和非流感病毒样本,采用流感病毒抗原检测试剂盒方法对样本进行验证。通过协同标定参考品,确定最低检出限范围,3家单位进行适用性检测。反复冻融观察其稳定性。结果所用的16株病毒经3家单位联合检测,特异性良好,均为甲型流感病毒,检测结果符合率为100%;反复冻融5次后,稳定性良好。结论建立了第1套甲型流感病毒抗原检测试剂盒质控参考品及相应的质量标准。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 抗原 质控参考品
原文传递
甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒的质量评价 被引量:1
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作者 赵慧 +1 位作者 李丽莉 李长贵 《微生物学免疫学进展》 2013年第3期29-32,共4页
目的对5种国产甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒进行质量评估。方法应用甲型H1N1流感病毒核酸国家参考品,按照各自试剂盒说明书的方法进行检测。结果 5种试剂盒在特异性、最低检出限及精密度方面均符合国家标准,不同厂家及同一厂家不同... 目的对5种国产甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒进行质量评估。方法应用甲型H1N1流感病毒核酸国家参考品,按照各自试剂盒说明书的方法进行检测。结果 5种试剂盒在特异性、最低检出限及精密度方面均符合国家标准,不同厂家及同一厂家不同批次试剂盒之间在最低检出限及精密度方面都存在差异。结论 5种国产甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒性能可靠,为此类试剂的生产研究以及临床评价提供依据。 展开更多
关键词 甲型H1N1流感病毒 国家参考品 实时PCR
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