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白藜芦醇通过调控NLRP3/caspase-1信号通路抑制H_(2)O_(2)诱导的心肌纤维化 被引量：3
1
作者 赵雅欣 范奕好 +4 位作者 程阳 蒙中元 吴建福 吴倩文 何燕 《重庆医学》 CAS 2021年第21期3612-3616,共5页
目的探讨白藜芦醇(RES)通过抑制体外过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌成纤维细胞(CFs)氧化应激而降低心肌纤维化及其与NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶-1(caspase-1)信号通路的关系。方法从SD乳鼠取心脏进行原代CFs培养,分为对照组,H_(... 目的探讨白藜芦醇(RES)通过抑制体外过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌成纤维细胞(CFs)氧化应激而降低心肌纤维化及其与NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶-1(caspase-1)信号通路的关系。方法从SD乳鼠取心脏进行原代CFs培养,分为对照组,H_(2)O_(2)(10μmol/L)组、H_(2)O_(2)(10μmol/L)+RES(5μmol/L)组。采用免疫荧光鉴定CFs,CCK-8法检测CFs存活率,聚合酶链反应检测CFs白细胞介素-1(IL-1)、caspase-1、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)基因表达,Western blot法检测CFs NLRP3、caspase-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达。结果波形蛋白呈阳性表达,证明提取细胞为CFs;与对照组比较,H_(2)O_(2)(10μmol/L)组CFs存活率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);H_(2)O_(2)(10μmol/L)组IL-1、caspase-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ基因表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);NLRP3、caspase-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与H_(2)O_(2)(10μmol/L)组比较,H_(2)O_(2)(10μmol/L)+RES(5μmol/L)组CFs存活率升高;IL-1、caspase-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ基因表达明显降低差异均有统计学意义(P<0.05);NLRP3、caspase-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论RES可能通过抑制炎症从而有效缓解氧化应激损伤引起的心肌纤维化。 展开更多
关键词 白藜芦醇 心肌纤维化 炎症 氧化应激 NLRP3/caspase-1
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姜黄素对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞活化的抑制作用及其机制 被引量：3
2
作者 吴倩文 何燕 +4 位作者 赵雅欣 葛晨亮 梁宇明 范奕好 程阳 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第5期853-857,共5页
目的:探讨姜黄素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)活化的影响及与TLR4、BAMBI和TGF-β的关系。方法:用差速贴壁法提取SD大鼠原代CFs,经免疫荧光鉴定细胞后取2~3代细胞进行实验。采用MTT法测出合适的姜黄素浓度,将细胞分... 目的:探讨姜黄素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)活化的影响及与TLR4、BAMBI和TGF-β的关系。方法:用差速贴壁法提取SD大鼠原代CFs,经免疫荧光鉴定细胞后取2~3代细胞进行实验。采用MTT法测出合适的姜黄素浓度,将细胞分为对照组、AngⅡ组及AngⅡ+姜黄素组,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blotting检测3组中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、Toll样受体4(TLR4)、骨形成蛋白和激活素的跨膜抑制剂(BAMBI)和转化生长因子-β(TGF-β)的mRNA和蛋白的表达水平。结果:免疫荧光鉴定Vimentin蛋白阳性,表明提取所得细胞为CFs;MTT结果显示5~25μmol/L浓度姜黄素对细胞活性没有影响,最终选用25μmol/L进行干预;qPCR和Western blotting结果显示,与对照组比较,AngⅡ组中CollagenⅠ、CollagenⅢ、TLR4和TGF-β的mRNA和蛋白表达升高,BAMBI的mRNA和蛋白表达降低;与AngⅡ组比较,AngⅡ+姜黄素组中CollagenⅠ、CollagenⅢ、TLR4及TGF-β的mRNA和蛋白表达降低,而BAMBI的mRNA和蛋白表达升高。结论:姜黄素可抑制AngⅡ诱导的CFs活化,同时可下调TLR4和TGF-β的表达及上调BAMBI的表达。 展开更多
关键词 姜黄素 心肌纤维化 TLR4 BAMBI
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薯蓣皂苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的作用及机制研究 被引量：3
3
作者 程阳 葛晨亮 +1 位作者 范奕好 何燕 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第4期526-532,共7页
目的:探究薯蓣皂苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的抑制作用及可能的机制。方法:24只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、薯蓣皂苷低剂量(薯蓣皂苷溶液30 mg/kg·d^(-1))、高剂量组(薯蓣皂苷溶液60 mg/kg·d^(-1)),... 目的:探究薯蓣皂苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的抑制作用及可能的机制。方法:24只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、薯蓣皂苷低剂量(薯蓣皂苷溶液30 mg/kg·d^(-1))、高剂量组(薯蓣皂苷溶液60 mg/kg·d^(-1)),除对照组外,其余各组采用皮下注射异丙肾上腺素(ISO,5 mg/kg·d^(-1)),对照组予以等剂量生理盐水,连续给药10 d,苏木精—伊红染色(HE)及masson染色检测心肌炎症反应和纤维化水平,免疫印迹法(Western blotting)检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1前体(pro-caspase-1)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 p20(caspase-1 p20)蛋白表达水平,免疫组化法检测心肌组织胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(CollagenⅢ)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)表达水平。结果:与对照组比较,模型组心肌纤维化明显较重,心肌炎症细胞浸润增加,心肌间质CollagenⅠ、CollagenⅢ表达增加,IL-1β、IL-18分泌增加,NLRP3和caspase-1 p20表达升高(P<0.05);与模型组比较,薯蓣皂苷低、高剂量组心肌纤维化有所改善,心肌炎症细胞浸润减少,心肌间质CollagenⅠ、CollagenⅢ表达下降,IL-1β、IL-18分泌减少,NLRP3和caspase-1 p20表达降低(P<0.05)。各组间pro-caspase-1表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:薯蓣皂苷可通过抑制NLRP3炎症小体表达而改善异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化。 展开更多
关键词 心肌纤维化 NLRP3 薯蓣皂苷 异丙肾上腺素
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基于NLRP3研究β-胡萝卜素对大鼠心肌纤维化的作用机制 被引量：2
4
作者 范奕好 葛晨亮 +1 位作者 程阳 何燕 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第5期741-746,共6页
目的:探索β-胡萝卜素能否通过沉默核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)影响大鼠心肌纤维化(MF)的相关机制。方法:雄性SD大鼠18只,随机分成对照组、模型组及β-胡萝卜素组,对照组皮下注射生理盐水(5 mg/kg)及灌胃1 mL二甲基亚砜(DMSO)... 目的:探索β-胡萝卜素能否通过沉默核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)影响大鼠心肌纤维化(MF)的相关机制。方法:雄性SD大鼠18只,随机分成对照组、模型组及β-胡萝卜素组,对照组皮下注射生理盐水(5 mg/kg)及灌胃1 mL二甲基亚砜(DMSO);模型组仅皮下注射异丙肾上腺素(ISO)(5 mg/kg)及灌胃1 mL DMSO,β-胡萝卜素组皮下注射ISO(5 mg/kg)及灌胃β-胡萝卜素(30 mg/kg,1 mL DMSO溶解),连续注射及灌胃10 d。称取大鼠体重及心脏重量,对SD大鼠的心脏组织进行Masson染色,行免疫组化检测Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)的蛋白表达量,采用免疫印迹实验(Western blotting)检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1前体(procaspase-1)、半胱氨酸蛋白酶-p20(caspase-1-p20)的蛋白表达量。结果:与对照组比较,模型组MF更严重,心肌损伤加重,心肌间质Collagen I、CollagenⅢ、IL-1β、IL-18表达增加,NLRP3和caspase-1 p20表达升高(P<0.05);与模型组比较,β-胡萝卜素组MF程度缓解,心肌损伤较少,NLRP3和caspase-1-p20的表达量降低,心肌间质CollagenⅠ、CollagenⅢ、IL-18、IL-1β表达量降低(P<0.05)。结论:β-胡萝卜素能够降低ISO引起的MF程度,其作用机制可能与降低了NLRP3的表达有关。 展开更多
关键词 心肌纤维化 异丙肾上腺素 Β-胡萝卜素 NLRP3
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