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一种水华蓝藻气囊的分离纯化及气囊结构蛋白的鉴定 被引量：2
1
作者 许柏英 苗娅 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1802-1807,共6页
【目的】从水华蓝藻铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa PCC 7806)的细胞中分离纯化出高纯度且完整的气囊,并对气囊的结构组成蛋白进行鉴定。【方法】采用渗透冲击与溶菌酶处理相结合的方法,进行多次低速离心提纯气囊,纯化所得气囊用负... 【目的】从水华蓝藻铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa PCC 7806)的细胞中分离纯化出高纯度且完整的气囊,并对气囊的结构组成蛋白进行鉴定。【方法】采用渗透冲击与溶菌酶处理相结合的方法,进行多次低速离心提纯气囊,纯化所得气囊用负染色透射电镜观察气囊的纯度、完整度和形态。将纯化得到的气囊溶解后进行SDS-PAGE电泳,电泳后的蛋白条带运用LC-MS质谱法完成鉴定。【结果】从气囊的电镜照片可以看出提纯后的气囊纯度高,完整性好。气囊是两端呈锥状的圆柱体状,各气囊的直径大小一致,约120 nm,但长度不同,从约500 nm到1 500 nm不等。SDS-PAGE电泳和质谱法鉴定出气囊的两种主要结构组成蛋白Gvp A和Gvp C。【结论】这些研究对后续揭示气囊的精细结构和深入研究水华蓝藻浮力调节机制具有重要的意义。 展开更多
关键词 铜绿微囊藻 气囊 分离纯化 结构蛋白 电镜观察 质谱鉴定
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中华按蚊α-羧酸酯酶AsAe7的异源表达、纯化与结晶 被引量：3
2
作者 张甜甜 苗娅 +1 位作者 许柏英 陈斌 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期48-58,共11页
【目的】羧酸酯酶(carboxylesterase,COE)是昆虫体内一类重要的解毒酶,与昆虫的抗药性相关。本研究旨在对中华按蚊Anopheles sinensis羧酸酯酶Ae7(Asae7)进行初步晶体学研究,为解析As Ae7的空间结构及探讨其分子功能奠定基础。【方法】... 【目的】羧酸酯酶(carboxylesterase,COE)是昆虫体内一类重要的解毒酶,与昆虫的抗药性相关。本研究旨在对中华按蚊Anopheles sinensis羧酸酯酶Ae7(Asae7)进行初步晶体学研究,为解析As Ae7的空间结构及探讨其分子功能奠定基础。【方法】首先对Asae7进行生物信息学分析,然后进行分子克隆,并利用原核表达系统在体外对Asae7进行重组表达;结合Ni-NTA金属螯合层析和葡聚糖凝胶层析方法纯化融合表达蛋白;通过葡聚糖凝胶层析和化学交联结果分析As Ae7的聚合状态;采用坐滴气相扩散法对As Ae7进行结晶筛选。【结果】生物信息学分析表明,As Ae7是亲水性蛋白,分子量为61.053 k D,无跨膜区和信号肽;3D结构预测结果分析显示,As Ae7采取的是α/β-水解酶超家族折叠模式。多序列比对结果表明,在不同昆虫中Ae7蛋白具有高度保守性。分子克隆得到中华按蚊As Ae7的编码基因Asae7序列,大小为1 626 bp。成功构建重组质粒p ET28aAsae7;在大肠杆菌Escherichia coli中表达的融合蛋白As Ae7主要分布在上清中。通过镍柱亲和层析和凝胶过滤层析纯化出了高纯度且稳定的目的蛋白;通过凝胶过滤层析和化学交联获得纯化的As Ae7主要呈单体状态;同时通过晶体筛选获得了As Ae7的晶体。【结论】运用结晶学的方法初步获得了As Ae7的晶体,为后续解析As Ae7的晶体结构以及在原子分辨率水平上直观阐释As Ae7参与代谢抗性的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 中华按蚊 羧酸酯酶 代谢抗性 异源表达 AsAe7结晶
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中华按蚊谷胱甘肽-S-转移酶E6(AsGSTE6)的表达纯化与结晶 被引量：2
3
作者 苗娅 张甜甜 +1 位作者 许柏英 陈斌 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期59-67,共9页
【目的】对中华按蚊Anopheles sinensis谷胱甘肽-S-转移酶E6(As GSTE6)进行初步晶体学研究,为深入研究其空间结构奠定基础。【方法】利用生物信息学软件,首先对中华按蚊As GSTE6进行生物信息学预测和分析;然后进行分子克隆,构建重组子p ... 【目的】对中华按蚊Anopheles sinensis谷胱甘肽-S-转移酶E6(As GSTE6)进行初步晶体学研究,为深入研究其空间结构奠定基础。【方法】利用生物信息学软件,首先对中华按蚊As GSTE6进行生物信息学预测和分析;然后进行分子克隆,构建重组子p ET28a-As GSTe6;利用大肠杆菌Escherichia coli原核表达系统进行诱导表达;采用Ni-NTA金属螯合层析和葡聚糖凝胶层析的方法对重组蛋白进行纯化;通过葡聚糖凝胶层析和化学交联的结果分析蛋白的聚合状态;运用坐滴蒸气扩散法对重组蛋白进行结晶筛选。【结果】生物信息学分析结果表明,As GSTE6分子量为25.28 k D,无信号肽和跨膜区,是亲水性蛋白;三级结构预测结果显示,As GSTE6主要由一个小的βαβαββα折叠模式的N端结构域和一个大的全螺旋的C端结构域组成。多重序列比对结果表明,在不同昆虫中GSTE6具有高度保守性。分子克隆得到中华按蚊As GSTE6的编码基因As GSTe6序列,大小为672 bp。在大肠杆菌中As GSTE6主要在上清中有大量表达,为可溶性表达;通过镍柱亲和层析和凝胶过滤层析纯化出了高纯度且稳定的As GSTE6重组蛋白;凝胶过滤层析结合化学交联的结果证实体外纯化的融合蛋白As GSTE6主要呈二聚体状态;通过晶体筛选获得了As GSTE6的晶体。【结论】运用结晶学的方法获得了As GSTE6的晶体,这为后续解析As GSTE6的三维结构奠定了基础。 展开更多
关键词 中华按蚊 谷胱甘肽-S-转移酶 AsGSTE6 原核表达 纯化 结晶
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末落士子与零余人的比较
4
作者 苗娅 《鸡西大学学报（综合版）》 2011年第5期108-109,共2页
韦痴珠和零余人是不同时代作品中的人物形象,他们有着相似的性格,多愁善感,自卑而又狷狂。他们有相似的历史体验,他们有才华却无法施展,精神陷入了极度苦闷,因而遁入青楼去寻求暂时的精神解脱。虽有暂时的忘却,但始终逃脱不了他们应有... 韦痴珠和零余人是不同时代作品中的人物形象,他们有着相似的性格,多愁善感,自卑而又狷狂。他们有相似的历史体验,他们有才华却无法施展,精神陷入了极度苦闷,因而遁入青楼去寻求暂时的精神解脱。虽有暂时的忘却,但始终逃脱不了他们应有的宿命。新时期的零余人身上的挣脱封建传统的痕迹是对韦痴珠等末落文人的提升。 展开更多
关键词 没落士子 零余人 性格悲剧 时代悲剧
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永不悲伤
5
作者 苗娅 《作文世界（初中版）》 2006年第8期63-64,共2页
关键词 我自己 那就是我 童话世界 天会 感情投入 愿之
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品味生活撷取素材
6
作者 苗娅 《魅力中国》 2013年第19期174-174,共1页
常言道：“巧妇难为无米之炊”、但现实告诉我们：“能找米者方为巧妇”。作文中的“米”从何而来？答案当然是从生活中来，要提高学生写作能力，必须深入生活实际，从平凡中撷取写作素材乃是根本。也许有的同学会说，自己的经历有什么... 常言道：“巧妇难为无米之炊”、但现实告诉我们：“能找米者方为巧妇”。作文中的“米”从何而来？答案当然是从生活中来，要提高学生写作能力，必须深入生活实际，从平凡中撷取写作素材乃是根本。也许有的同学会说，自己的经历有什么好写的，一天到晚总是在“家”——“学校”这两点一线之间作往返运动，单调乏味得要命。其实，只要我们拥有一双慧眼，便会发现，我们自身的经历中有着丰富的写作素材。 展开更多
关键词 生活实际 写作素材 品味 写作能力 同学会 “家” 经历 作文
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有种毁灭叫身不由己 ——浅谈中学语文经典“死亡审美”之环境迫死
7
作者 孙慧玲 苗娅 《东西南北（教育）》 2018年第1期40-40,共1页
“死亡意味着一个思想个体,一个生命意义的毁灭”,〔1〕它是摆在人类面前最令人恐惧又永恒的话题,文学家暂时地搁置死亡的恐惧,坦然面对并创造性地虚构死亡,因为“死是最高的美学命题”,〔2〕他们把死亡的悲凉转化成深刻的悲悯心理、生... “死亡意味着一个思想个体,一个生命意义的毁灭”,〔1〕它是摆在人类面前最令人恐惧又永恒的话题,文学家暂时地搁置死亡的恐惧,坦然面对并创造性地虚构死亡,因为“死是最高的美学命题”,〔2〕他们把死亡的悲凉转化成深刻的悲悯心理、生命意识和对人生价值的思考。从此死亡在文学中,不再是科学的、生理的,而是作家把握世界、关怀生命的审美对象、死亡意象。这种艺术境中的死亡意象、死亡符号的价值有伦理价值、宗教价值、美学价值这三个系统结构。〔3〕 展开更多
关键词 中学 语文
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基于半参数回归模型的残差控制图 被引量：4
8
作者 李艳 卢游 +1 位作者 范翔 苗庆娅 《数理统计与管理》 CSSCI 北大核心 2016年第4期700-706,共7页
本文探讨产品工作状态(而非工作结果)的监控,即产品质量特性值随时间和其他影响因素变化的工作过程的监控。受到卷烟生产中叶丝干燥出口物料含水率的监控问题的启发,本文提出了基于半参数回归模型的残差控制图,即通过拟合半参数回归模... 本文探讨产品工作状态(而非工作结果)的监控,即产品质量特性值随时间和其他影响因素变化的工作过程的监控。受到卷烟生产中叶丝干燥出口物料含水率的监控问题的启发,本文提出了基于半参数回归模型的残差控制图,即通过拟合半参数回归模型获得残差,将经过标准化变换、去自相关性处理和正态变换后的残差作为描点统计量作于Shewhart控制图中,从而进行产品过程工作状态的质量监控。实例分析显示,本文方法对过程均值的异常反应灵敏,能有效地应用于实际生产中。 展开更多
关键词 纵向数据 半参数回归模型 残差监控 过程监控 Shewhart控制图
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多媒体教学的三点体会 被引量：2
9
作者 苗近娅 《河南教育（基教版）（上）》 2004年第3期35-35,共1页
关键词 多媒体教学 课堂教学 教学情境 教学目标 个别化学习 学习兴趣 建构主义
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