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尼罗罗非鱼精巢支持细胞分离培养体系建立及优化 被引量：3
1
作者 康恺 吴江 +4 位作者 苑麟勇 刘丽欢 陈永灵 效梅 安立龙 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2020年第1期119-126,共8页
本研究分离培养尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)精巢支持细胞(Sertoli cells,SCs),建立并优化尼罗罗非鱼精巢支持细胞分离培养体系。无菌条件下,取发育至第Ⅲ期的尼罗罗非鱼精巢,PBS清洗后,剪碎精巢组织,0.25%胰蛋白酶消化,用含10%... 本研究分离培养尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)精巢支持细胞(Sertoli cells,SCs),建立并优化尼罗罗非鱼精巢支持细胞分离培养体系。无菌条件下,取发育至第Ⅲ期的尼罗罗非鱼精巢,PBS清洗后,剪碎精巢组织,0.25%胰蛋白酶消化,用含10%犊牛血清(Newborn bovine serum,NBS)的L-15培养液终止消化,过滤、离心,获得细胞。差速贴壁法获得SCs后,在26℃、无CO2饱和湿度恒温培养箱中培养。分别采用含10%NBS的L-15、M199、F12培养液,含5%、10%、15%NBS的L-15培养液,含1%罗非鱼血清的L-15+10%NBS培养液培养尼罗罗非鱼SCs。各组每2 d取细胞计数,绘制SCs生长曲线;甲基绿染色,倒置显微镜下观察SCs的形态。尼罗罗非鱼SCs培养1~2 d,细胞贴壁;培养3~5 d,细胞完全贴壁并迅速增殖。单个SCs呈不规则多边形,其核位于胞质中央,呈卵圆形,胞质中可见吞噬颗粒和空泡,空泡聚集于支持细胞胞质的两极或散布于核的四周。SCs在L-15培养液中贴壁生长,在F12、M199培养基中较难贴壁。与F12、M199培养液相比,L-15培养液更有助于尼罗罗非鱼SCs生长增殖(P<0.01)。与添加5%和15%NBS相比,在L-15培养基中添加10%NBS更有助于尼罗罗非鱼SCs生长增殖(P<0.05)。与未添加尼罗罗非鱼血清相比,在10%NBS+L-15培养中添加1%尼罗罗非鱼血清,能显著促进SCs生长增殖(P<0.05)。研究表明,采用胰酶消化差速贴壁法获得尼罗罗非鱼精巢支持细胞,10%NBS+1%罗非鱼血清+L-15培养液培养,能显著促进尼罗罗非鱼精巢支持细胞生长增殖。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 支持细胞 分离培养 体系优化
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不同培养液添加物对尼罗罗非鱼精原干细胞生长增殖的影响 被引量：2
2
作者 吴江 康恺 +4 位作者 苑麟勇 王瑞阳 李光辉 效梅 安立龙 《广东海洋大学学报》 CAS 2019年第1期34-41,共8页
【目的】探讨不同血清和细胞因子等培养液添加物对尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)生长增殖的影响。【方法】无菌取发育第Ⅲ期的尼罗罗非鱼精巢组织,用酶消化法结合差速贴壁法获得尼罗罗非... 【目的】探讨不同血清和细胞因子等培养液添加物对尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)生长增殖的影响。【方法】无菌取发育第Ⅲ期的尼罗罗非鱼精巢组织,用酶消化法结合差速贴壁法获得尼罗罗非鱼SSCs,在有支持细胞饲养层条件下,L-15培养液中分别添加体积分数2%、5%、10%新生牛血清(New bovine serum,NBS),体积分数1%、2%、3%罗非鱼血清以及5、10、15 ng/mL白血病抑制因子(Leukemia inhibitor factor,LIF),比较不同添加物对尼罗罗非鱼SSCs生长增殖的影响。【结果】在支持细胞饲养层上,SSCs分裂指数明显高于无饲养层的SSCs,支持细胞饲养层明显促进精原干细胞分裂增殖(P <0.01);与2%、10%NBS组相比,添加体积分数5%NBS可显著促进精原干细胞增殖(P <0.01);添加体积分数1%、2%、3%尼罗罗非鱼血清对SSCs无显著的促增殖作用(P> 0.05);添加5、10 ng/mL LIF可促进SSCs增殖,添加10 ng/mL LIF效果更佳,添加15 ng/mL LIF则抑制SSCs增殖。【结论】使用尼罗罗非鱼精巢支持细胞作饲养层,用添加体积分数5%NBS及10 ng/mL LIF的L-15培养液培养,有助于促进尼罗罗非鱼精原干细胞生长增殖。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 精原干细胞 添加物 生长 增殖
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一种通用型水基消泡剂的毒理学安全性研究 被引量：2
3
作者 苑麟勇 安立龙 陈春亮 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2010年第1期143-148,共6页
为了探讨一种通用型水基消泡剂DREWPLUS 5350 EP的毒理学安全性,以昆明系小鼠为研究对象,依据毒理学中国试验标准,通过小鼠急性毒性试验、蓄积毒性试验、骨髓微核试验、亚急性毒性试验方法,研究了其对小鼠的毒性,并对其进行了评价.结果... 为了探讨一种通用型水基消泡剂DREWPLUS 5350 EP的毒理学安全性,以昆明系小鼠为研究对象,依据毒理学中国试验标准,通过小鼠急性毒性试验、蓄积毒性试验、骨髓微核试验、亚急性毒性试验方法,研究了其对小鼠的毒性,并对其进行了评价.结果表明:急性毒性试验小鼠经口LD50>24414mg·kg-(1bw),属实际无毒级;蓄积毒性试验、小鼠微核试验为阴性;在高剂量大于等于5375mg·kg-(1bw)的试验条件下,亚急性毒性试验小鼠血清谷丙转氨酶与对照组相比差异极显著,肝脏系数差异极显著;其它检测指标均未观察到有毒理学意义的异常变化;小鼠经口摄入DREWPLUS 5350 EP消泡剂小于等于2688mg·kg-(1bw)是安全的.在使用过程中对环境不会造成二次污染. 展开更多
关键词 消泡剂 毒理学 安全性
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臭气、高温对集约化养鸡的影响及营养调控方法 被引量：1
4
作者 许英梅 吴凌锋 +4 位作者 张土保 苑麟勇 胡洋 徐汉进 安立龙 《粮食与饲料工业》 CAS 北大核心 2009年第7期41-42,44,共3页
阐述了臭气对集约化养鸡造成的危害及高温对集约化养鸡产生的不良的影响;提出了通过日粮中蛋白质、氨基酸水平、能量水平的调整,某些饲料添加剂的添加等营养调控方式控制养殖场内臭气产生和缓解鸡高温应激的方法。
关键词 臭气 高温 营养调控 鸡 养鸡场
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运用特殊包被缓释颗粒酸化剂改善猪消化道生理机能 被引量：2
5
作者 农华杰 何世权 +3 位作者 苑麟勇 余庆 刘锋 王科文 《养猪》 2014年第1期89-91,共3页
在当前集约化养猪生产中，猪只的快速生长、高负荷生产运转、高浓度高喂料量的饲喂模式使其肠道长期处于巨大的应激状态，这容易引起猪群各个生产阶段消化道疾病的发生，如生产母猪便秘、仔猪腹泻综合征、生长肥育猪腹泻等疾病，直接影... 在当前集约化养猪生产中，猪只的快速生长、高负荷生产运转、高浓度高喂料量的饲喂模式使其肠道长期处于巨大的应激状态，这容易引起猪群各个生产阶段消化道疾病的发生，如生产母猪便秘、仔猪腹泻综合征、生长肥育猪腹泻等疾病，直接影响母猪的繁殖性能及肉猪生长性能。因此提高猪肠道生理健康及维护其功能稳定是提高当前养猪业养殖效率和经济收益的重要因素。目前国内外众多研究报道证实，在猪饲粮中添加功能性调理剂是当前养猪生产调控猪肠道生理机能的主要手段。 Lange等（2010）报道添加酸化剂、乳制品、血浆蛋白、脂肪、乳化剂、大豆、蛋白浓缩品、植物提取物等均能改善肠道生理机能和防御屏障，具体包括可改善猪只免疫力（如干扰素、ω-3脂肪酸、酵母葡聚糖等）、减少肠道病原菌生长（如酸化剂、氧化锌、植物精油、益生菌、抗生素等）、刺激肠道有益微生物的生长（如益生菌）、促进肠道生理功能活跃（如酸化剂、谷氨酰胺、苏氨酸、胱氨酸、核苷酸）等方面。而在很多国家养猪实践中表明添加酸化剂是最为常用的优化方式， Murray Hyden等（2010）报道，有机酸在欧洲养猪生产是最为普及应用的改善猪消化道机能的产品（市场占有率为41%），也是将来养猪业抗生素的替代品。为此，本文就酸化剂改善猪肠道机能的生理意义、影响酸化剂效果的因素、特殊包被缓释颗粒酸化剂-欧酸肥的应用机理及特点等方面进行阐述。 展开更多
关键词 消化道疾病 养猪生产 生理机能 酸化剂 颗粒 缓释 包被 Ω-3脂肪酸
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羊栖菜多糖对小鼠胎儿成纤维细胞生长、增殖及代谢的影响
6
作者 安立龙 张土保 +3 位作者 吴凌锋 苑麟勇 胡洋 徐汉进 《饲料工业》 北大核心 2010年第24期39-44,共6页
用含5、10、204、0、80 mg/l羊栖菜多糖(SFPS)的培养液培养小鼠胎儿成纤维细胞(MEF),研究SFPS对MEF生长增殖、营养物质吸收利用和细胞因子分泌的影响。结果表明:5、10、20 mg/lSFPS对MEF形态和生长增殖均无显著影响(P>0.05),40、80 m... 用含5、10、204、0、80 mg/l羊栖菜多糖(SFPS)的培养液培养小鼠胎儿成纤维细胞(MEF),研究SFPS对MEF生长增殖、营养物质吸收利用和细胞因子分泌的影响。结果表明:5、10、20 mg/lSFPS对MEF形态和生长增殖均无显著影响(P>0.05),40、80 mg/l SFPS对MEF表现出明显的抑制作用(P<0.05),使MEF突触分叉,细胞内颗粒增多;SFPS可显著促进MEF对葡萄糖的摄取利用(P<0.05),但对钙和氨基酸的利用无显著影响(P>0.05);低浓度SFPS有促进MEF碱性成纤维细胞因子(bFGF)、干细胞生长因子(SCF)、白血病抑制因子(LIF)分泌的趋势,但高浓度SFPS对bFGF、SCF和LIF的分泌无显著影响。 展开更多
关键词 羊栖菜多糖 小鼠胎儿成纤维细胞 增殖 细胞因子
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生长猪“瑞兰安”田间试验的启示
7
作者 王科文 马荣超 +7 位作者 张文 刘忠行 尚来助 郭海兵 赵福相 苑麟勇 刘亚彬 余庆 《养猪》 2014年第5期89-92,共4页
猪繁殖与呼吸综合征（PRRS，俗称蓝耳病）是影响我国乃至全世界养猪业的重大猪病之一，免疫防控是控制蓝耳病的重要途径，但一直以来是毁誉参半。究其原因，多半与蓝耳病本身的免疫特点及目前蓝耳病疫苗的局限有关。为了进一步了解我国... 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS，俗称蓝耳病）是影响我国乃至全世界养猪业的重大猪病之一，免疫防控是控制蓝耳病的重要途径，但一直以来是毁誉参半。究其原因，多半与蓝耳病本身的免疫特点及目前蓝耳病疫苗的局限有关。为了进一步了解我国蓝耳病疫苗“瑞兰安”对我国猪群田间使用的安全性和在目前蓝耳病感染现状下的有效性，我们在全国范围内安排了一系列“瑞兰安”免疫后安全性、有效性评估试验。本文将简单介绍12个生长猪群免疫“瑞兰安”后的总体结果，也将分享本次试验给我们带来的一些关于蓝耳病及成功免疫蓝耳病疫苗的一些启示，希望能为养猪同仁提供借鉴。 展开更多
关键词 田间试验 生长猪 猪繁殖与呼吸综合征 免疫特点 蓝耳病 PRRS 田间使用 评估试验
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