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多指标检测在糖尿病肾病监测中的临床价值 被引量：15
1
作者 段晋燕 苑晓舟 +2 位作者 李新军 刘晓婷 王成彬 《标记免疫分析与临床》 CAS 2016年第5期551-553,共3页
目的探讨血清胱抑素C(cystatin C,Cys-C)、血清尿酸(serum uric acid,UA)、血β2微球蛋白(beta 2-microglobulin,β2-MG)、血沉(erythrocyte sedimentation,ESR)、中性粒细胞比例(the percentage of neutrophil,NEUT%)和白细胞介素6(int... 目的探讨血清胱抑素C(cystatin C,Cys-C)、血清尿酸(serum uric acid,UA)、血β2微球蛋白(beta 2-microglobulin,β2-MG)、血沉(erythrocyte sedimentation,ESR)、中性粒细胞比例(the percentage of neutrophil,NEUT%)和白细胞介素6(interleuckin 6,IL-6)等多个指标与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)不同分期的关系。方法选择2014年6月至2015年6月于我院就诊的DN患者114例为研究对象,根据公式计算肾小球滤过率(e GFR)并进行分期,分析Cys-C、UA、β2-MG、ESR、NEUT%和IL-6在不同分期中的检测值和差异。结果不同分期DN患者血清Cys-C和β2-MG呈明显升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。随着病程的进展,UA、ESR、NEUT%、IL-6水平趋于升高,肾病分期中晚期的结果较早期有显著变化(P<0.05)。结论 Cys-C、UA、β2-MG、ESR、NEUT%和IL-6共同用于评价DN病程进展具有一定的临床价值。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 血清胱抑素C 血Β2微球蛋白 红细胞沉降率 炎症因子
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弱精子症男性不育患者免疫相关精子抗原的筛查 被引量：3
2
作者 梁爽 向代军 +3 位作者 苑晓舟 姜文灿 李新军 王成彬 《临床检验杂志（电子版）》 2015年第4期963-968,共6页
目的观察抗精子抗体阳性血清与弱精子症患者精子抗原的结合情况,初步探讨与男性不育弱精子症患者相关的精子抗原。方法酶联免疫试验方法筛选抗精子抗体阳性血清标本,混合抗球蛋白反应试验确认抗精子抗体阳性血清。SDS-PAGE电泳分离弱精... 目的观察抗精子抗体阳性血清与弱精子症患者精子抗原的结合情况,初步探讨与男性不育弱精子症患者相关的精子抗原。方法酶联免疫试验方法筛选抗精子抗体阳性血清标本,混合抗球蛋白反应试验确认抗精子抗体阳性血清。SDS-PAGE电泳分离弱精症患者和正常生育者精子蛋白,抗精子抗体阳性血清作为一抗,进行免疫印迹试验,化学发光反应显示相应精子抗原的不同反应条带,分析弱精症和正常生育者精子抗原与抗精子抗体阳性血清反应条带的差异。结果用ELISA法抗精子抗体检测试剂盒检测不明原因不孕女性血清432例,筛出抗精子抗体阳性血清44例,阳性率为10.19%。精子抗原免疫印迹试验显示,在11-17k D、35-48k D、48-63k D、63-75k D之间出现反应条带的阳性数在弱精症组和正常生育组间存在明显的统计学差异(P<0.05),而在17-25k D、25-35k D之间出现条带阳性数在两组间无明显统计学差异。结论弱精子症患者与正常正育组间11-17k D、35-48k D、48-63k D、63-75k D间精子抗原的差异可能是弱精子症发生的原因,进一步的研究有助于揭示弱精子症发生的机制。 展开更多
关键词 免疫性不育 弱精症 精子抗原 抗精子抗体 免疫印迹
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免疫共沉淀联合液相色谱串联质谱技术应用于精子膜蛋白筛选 被引量：2
3
作者 梁爽 向代军 +9 位作者 王红霞 马骏龙 薛丹丹 刘培培 刘萍 姜文灿 苑晓舟 李新军 葛素君 王成彬 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期298-302,共5页
目的为了揭示免疫性不育的机制，研究通过免疫共沉淀联合液相色谱串联二级质谱技术筛选与抗精子抗体（ASA）结合的精子膜蛋白。方法病例对照研究。选取2015年9至12月在中国人民解放军总医院生殖中心门诊就诊的不明原因不孕症血清标本52... 目的为了揭示免疫性不育的机制，研究通过免疫共沉淀联合液相色谱串联二级质谱技术筛选与抗精子抗体（ASA）结合的精子膜蛋白。方法病例对照研究。选取2015年9至12月在中国人民解放军总医院生殖中心门诊就诊的不明原因不孕症血清标本521份，采用ELISA试剂盒进行ASA阳性血清的筛选，再应用混合抗球蛋白试验对ASA阳性血清进行确认，得到ASA阳性血清标本56份作为疾病组，同时选择在该院临床检验科正常查体的血清ASA阴性的已正常生育过的健康人血清标本31份作为对照组。选取2016年1至4月在中国人民解放军总医院行正常查体男性志愿者精液标本48份，混合后提取精子膜蛋白。进行免疫共沉淀反应，精子膜蛋白分别与ASA阳性血清、ASA阴性血清孵育后，同时加入蛋白A/G（protein A/G）孵育，采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰氨凝胶电泳对免疫沉淀复合物进行分离，切胶酶解后，进行液相色谱串联二级质谱分析，得到相应的蛋白编码。通过UniProt数据库检索查找这些蛋白的名称、生物学功能、细胞定位等信息。结果筛选出ASA阳性不育患者血清56份（女39例、男17例），ASA阴性正常生育者31例（女17例、男14例）。共鉴定出40种相关蛋白，可分为3组蛋白，分别是：仅与正常组血清相结合的蛋白（11种）；既与正常组血清结合，也与ASA阳性不育组血清结合的蛋白（14种）；仅与ASA阳性不育组血清结合的蛋白（15种）。这15种蛋白分别是精子阳离子通道蛋白1，精子阳离子通道蛋白3，精子阳离子通道蛋白4，精子相关抗原9，载脂蛋白A－I, 轴丝动力蛋白重链14 , 多波段多肽－2，精卵融合蛋白4, 硫氧还蛋白结构域蛋白2 , 含有蛋白H的IQ域，含有蛋白F1的IQ域，精子发生相关蛋白5, 精子发生相关蛋白5样蛋白1，精子顶体膜相关蛋白1 ，E3泛素蛋白连接酶RNF114。结论� 展开更多
关键词 抗体 精子 膜蛋白质类 免疫沉淀法 色谱法 液相 串联质谱法
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影响内标双重PCR靶模板检测灵敏度的因素分析 被引量：2
4
作者 姜文灿 岳素文 +4 位作者 江洪 梁爽 苑晓舟 葛素君 王成彬 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第4期244-246,共3页
目的在内标双重PCR系统中寻找影响靶模板检测灵敏度的主要因素,并比较不同检测体系的灵敏度。方法针对HBV基因设计普通引物对和中部同序引物对,比较引物二聚体（PD）含量;控制内标基因的Ct值约为30,调整内标引物浓度为10、8、5、2、1μm... 目的在内标双重PCR系统中寻找影响靶模板检测灵敏度的主要因素,并比较不同检测体系的灵敏度。方法针对HBV基因设计普通引物对和中部同序引物对,比较引物二聚体（PD）含量;控制内标基因的Ct值约为30,调整内标引物浓度为10、8、5、2、1μmol/L,比较不同体系的检测灵敏度;控制内标引物的用量不变,分别测定内标基因Ct值在15、20、25、30时的靶模板检测灵敏度。结果中部同序引物PD的Ct值在35以上,普通引物对PD的Ct值在30~33之间;10、8、5、2、1μmol/L浓度的内标引物需要内标模板的浓度分别为5×10^4、5×10^4、5×10^4、5×10^5、5×10^7IU/m L;不同内标引物用量检测灵敏度均为5×10^3IU/m L,仅使用中部同序引物的单重PCR检测灵敏度为5×10^2IU/m L;内标Ct值在15、20、25、30时靶模板检测的灵敏度分别为5×10^5、5×10^4、5×10^3、5×10^3IU/m L。结论在双重PCR检测体系中,对靶模板检测灵敏度影响最大的因素为内标的模板量,仅使用中部同序引物对的单重PCR具有最高的灵敏度。 展开更多
关键词 双重PCR 引物二聚体 内标系统
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黏多糖病患者尿液α1-抗胰蛋白酶含量的研究 被引量：1
5
作者 苑晓舟 孟岩 +4 位作者 梁爽 姜文灿 葛素君 段晋燕 王成彬 《生命科学仪器》 2016年第5期47-50,29,共5页
目的研究黏多糖病（MPS）患者尿液中α1-抗胰蛋白酶（α1-AT）含量,探讨尿液α1-AT含量与MPS的关系。方法选取2015年3月~2016年6月在解放军总医院儿童医学中心确诊的MPSⅠ型患者18例（MPSⅠ组）,MPSⅡ型患者11例（MPSⅡ组）和本院查体人... 目的研究黏多糖病（MPS）患者尿液中α1-抗胰蛋白酶（α1-AT）含量,探讨尿液α1-AT含量与MPS的关系。方法选取2015年3月~2016年6月在解放军总医院儿童医学中心确诊的MPSⅠ型患者18例（MPSⅠ组）,MPSⅡ型患者11例（MPSⅡ组）和本院查体人员30例（健康对照组）,收集晨尿,运用ELISA和Western Blot方法检测尿液中α1-AT含量。结果用ELISA方法检测MPSⅠ组尿液α1-AT/Cr比值为（57.65±10.43）mg/mmol,MPSⅡ组为（55.89±7.43）mg/mmol,健康对照组为（33.32±3.59）mg/mmol,MPSⅠ组、Ⅱ组均显著高于健康对照组（P〈0.05）,用Western Blot方法进行验证,结果与ELISA方法相一致。结论α1-AT含量在MPS患者尿液中升高,可作为MPS辅助诊断指标。 展开更多
关键词 黏多糖病 Α1-抗胰蛋白酶 尿液
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磁珠分离结合质谱分析黏多糖病Ⅰ型患者尿液多肽谱
6
作者 苑晓舟 孟岩 +4 位作者 梁爽 姜文灿 葛素君 段晋燕 王成彬 《生命科学仪器》 2017年第1期36-39,35,共5页
目的研究黏多糖病Ⅰ型(MPSⅠ)患者尿液小分子多肽谱,寻找对MPSⅠ型诊断的新方法。方法利用弱阳离子磁珠纯化(magnetic beads based weak cation exchange chromatography,MB-WCX)系统结合基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(matrix-assi... 目的研究黏多糖病Ⅰ型(MPSⅠ)患者尿液小分子多肽谱,寻找对MPSⅠ型诊断的新方法。方法利用弱阳离子磁珠纯化(magnetic beads based weak cation exchange chromatography,MB-WCX)系统结合基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption-ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)的方法,检测8例于解放军总医院儿童医学中心确诊的MPSⅠ型患者(疾病组)和10例本院查体人员(健康对照组)的尿液标本,获得尿液小分子多肽谱,应用Clin Prot TM软件进行数据分析,找出差异多肽峰,并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),对比曲线下面积(AUC)、敏感度和特异性。结果质荷比1000-10000之间,两组尿液标本共筛选出7个具有统计学差异(P<0.05)多肽差异峰。其中在疾病组中表达上调的有4个峰,表达下调的3个峰。AUC面积大于0.9的多肽质荷比为:1069.6(0.982)和3217.3(0.946),两者的特异性均为87.4%,敏感性均达到100%。结论 MB-WCX联合MALDITOF-MS检测技术可获得MPSⅠ型患者和健康人的尿液差异多肽谱,为MPSⅠ型辅助诊断提供了一种无创的新方法。 展开更多
关键词 黏多糖病Ⅰ型 弱阳离子磁珠 基质辅助激光解析电离-飞行时机质谱 多肽 尿液
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血常规和血脂指标诊断戈谢病的价值
7
作者 苑晓舟 孟岩 +1 位作者 段晋燕 王成彬 《疑难病杂志》 CAS 2016年第6期614-616,620,共4页
目的研究外周血中血常规项目和脂类项目中相关指标在戈谢病诊断中的价值。方法选择2014年1月—2015年7月中国人民解放军总医院儿童医学中心住院的戈谢病患者30例(观察组)和健康体检者30例(健康对照组),检测外周血血常规项目中的血小板(P... 目的研究外周血中血常规项目和脂类项目中相关指标在戈谢病诊断中的价值。方法选择2014年1月—2015年7月中国人民解放军总医院儿童医学中心住院的戈谢病患者30例(观察组)和健康体检者30例(健康对照组),检测外周血血常规项目中的血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)、红细胞平均体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)和血脂项目中的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白Al(ApoAl)、载脂蛋白B(ApoB)等指标,并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),对比曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度。结果与健康对照组比较,观察组患者外周血中PLT、Hb、MCV、MCH、TC、HDL-C、LDL-C和ApoAl等8项指标均显著降低,而TG水平显著升高。AUC由大到小分别为ApoAl(0.960)、PLT(0.942)、HDL.-C(0.918)、TG(0.900)、Hb(0.866)、MCH(0.861)、TC(0.827)、LDL-C(0.718)、MCV(0.690)、ApoB(0.516)。PLT、HDL-C和ApoAl的特异度均达到1.00,敏感度分别为0.895、0.905和0.950。结论 ApoAl可作为戈谢病治疗诊断效果的检测指标。 展开更多
关键词 戈谢病 血常规 血脂 诊断价值
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Blyscan法测定黏多糖贮积症患者尿液中黏多糖含量的临床意义
8
作者 段晋燕 苑晓舟 +1 位作者 孟岩 王成彬 《疑难病杂志》 CAS 2016年第5期472-475,共4页
目的研究Blyscan检测法对黏多糖贮积症(MPS)患者尿液中黏多糖(GAG)含量测定的效能及临床意义。方法对Blyscan检测法进行日内精密度、日间精密度、时间稳定性、加样回收率的检测,并对2013年10月—2015年6月解放军总医院儿童医学中心已确... 目的研究Blyscan检测法对黏多糖贮积症(MPS)患者尿液中黏多糖(GAG)含量测定的效能及临床意义。方法对Blyscan检测法进行日内精密度、日间精密度、时间稳定性、加样回收率的检测,并对2013年10月—2015年6月解放军总医院儿童医学中心已确诊的25例MPS患者(MPS组)尿液和20例正常健康人(健康对照组)的尿液中的GAGs进行定量检测。结果 Blyscan检测法测量低值和高值标准溶液的日内精密度CV值分别为0.96%和1.32%,日间精密CV值分别为2.33%和1.85%。Blyscan法的10、20 mg/L的回收率为(97.04±3.61)%、(100.32±5.62)%,DMB-Tris回收率为(95.01±1.62)%、(103.9±2.81)%,两者差异无统计学意义(P>0.05)。但与DMBTris比色法相比,Blyscan检测法结果稳定性较好(P<0.05)。用Blyscan法检测MPS组尿GAG/Cr比值为(65.36±21.96)mg/mmol,健康对照组为(12.32±1.75)mg/mmol,前者较后者有显著升高(P<0.05)。结论 Blyscan检测法是一种准确度高、稳定性好、操作简便的GAGs检测方法,适用于临床对GAGs含量的定量检测。 展开更多
关键词 黏多糖贮积症 糖胺聚糖 Blyscan检测法 DMB-Tris比色法
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粘多糖贮积症基于GAG累积的检测方法
9
作者 苑晓舟 段晋燕 +1 位作者 孟岩 王成彬 《临床检验杂志（电子版）》 2015年第4期1008-1013,共6页
粘多糖贮积症(mucopolysaccharidosis,MPS)是由于溶酶体内水解酶失活或者活性降低,从而造成粘多糖(glycosaminoglycans,GAGs)在各组织器官累积的一种遗传代谢性疾病。由于GAG累积是MPS主要的病理原因,基于GAG贮积的生物标志物可作为一... 粘多糖贮积症(mucopolysaccharidosis,MPS)是由于溶酶体内水解酶失活或者活性降低,从而造成粘多糖(glycosaminoglycans,GAGs)在各组织器官累积的一种遗传代谢性疾病。由于GAG累积是MPS主要的病理原因,基于GAG贮积的生物标志物可作为一种潜在的简单便捷的生物标志物,用来诊断并且监测疾病进展和治疗效果。本文总结了通过检测GAG含量,对MPS病人进行疾病诊断、病情评估和疗效评价的各种方法,包括染料结合法、抗体免疫法、质谱法,为临床选择提供参考。 展开更多
关键词 粘多糖贮积症 糖胺聚糖 糖类标志物 方法学
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