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3种猫疱疹病毒Ⅰ型检测方法的比较 被引量：8
1
作者 萧晟 熊冉 +3 位作者 苑文涛 王广操 徐敏 陈文华 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2019年第3期394-400,共7页
比较传统PCR、荧光定量PCR以及胶体金速测卡对于猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)检测的敏感性及准确性。设计引物,优化反应条件并扩增目的片段,定向插入p MD-19T克隆载体,最后用建立的2种PCR检测方法及猫疱疹病毒1型快速检测卡对21份临床疑似猫... 比较传统PCR、荧光定量PCR以及胶体金速测卡对于猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)检测的敏感性及准确性。设计引物,优化反应条件并扩增目的片段,定向插入p MD-19T克隆载体,最后用建立的2种PCR检测方法及猫疱疹病毒1型快速检测卡对21份临床疑似猫疱疹病毒感染的分泌物进行检测。荧光定量PCR和传统PCR检测的最低拷贝数分别为20拷贝和207拷贝;荧光定量PCR、传统PCR以及胶体金快速检测卡的检出率分别为71%、57%和29%。传统PCR及荧光定量PCR检测方法均具有良好的特异性,其中荧光定量PCR特异性显著,相比猫疱疹病毒1型快速检测卡敏感性好,准确率更高。 展开更多
关键词 猫疱疹病毒1型 传统PCR 荧光定量PCR 特异性 敏感性
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1株猪丹毒杆菌的分离与鉴定 被引量：6
2
作者 邹垚 朱晓明 +3 位作者 苑文涛 张亚宁 夏雨婷 李玉峰 《畜牧与兽医》 北大核心 2015年第2期11-14,共4页
为确定导致安徽和县某猪场猪只发病的病原,从该猪场送检病料(心、肺、脾、肝)中分离并纯化细菌,根据其形态特征、PCR鉴定及生化试验结果,确诊为猪丹毒杆菌。spa A基因序列分析结果显示该菌与猪丹毒杆菌G4T10(Gen Bank登录号:KF150604.1)... 为确定导致安徽和县某猪场猪只发病的病原,从该猪场送检病料(心、肺、脾、肝)中分离并纯化细菌,根据其形态特征、PCR鉴定及生化试验结果,确诊为猪丹毒杆菌。spa A基因序列分析结果显示该菌与猪丹毒杆菌G4T10(Gen Bank登录号:KF150604.1)有99%的同源性。全自动生化反应报告该菌为丹毒丝菌的概率高达95%。小鼠攻毒试验表明,试验组小鼠在腹股沟皮下注射该菌后,4 d内全部死亡;死亡小鼠剖检可见全身败血性出血,各脏器均有病变,从死亡小鼠的血液、心、肝、脾、肺等组织中分离到与该感染菌株形态特征完全一致的细菌。药敏试验结果表明,该菌对β-内酰胺类和大环内酯类抗生素敏感,对链霉素、卡那霉素、四环素、多西环素、林可霉素和磺胺异恶唑耐受。 展开更多
关键词 急性猪丹毒 猪丹毒杆菌 分离 鉴定
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高中音乐鉴赏课的教学策略 被引量：3
3
作者 苑文涛 《统计与管理》 2014年第3期187-188,共2页
高中音乐课教学有着其他学科无法替代的作用,特别是音乐鉴赏课更对培养学生的综合素质有着极大的作用。教师应运用多种新颖有效的教学方法,让音乐课堂成为涤荡学生精神世界的重要手段。
关键词 音乐鉴赏课 教学策略
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猪丹毒杆菌噬菌体裂解酶的原核表达及活性检测 被引量：2
4
作者 苑文涛 张亚宁 +1 位作者 夏雨婷 李玉峰 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第10期37-40,共4页
根据猪丹毒杆菌噬菌体基因测序结果,设计针对裂解酶(Ely)的特异性扩增引物,PCR扩增获得Ely产物,PCR产物经酶切后克隆入表达载体p ET-28a(+),获得重组质粒p ET-28a(+)-Ely,并转化至大肠杆菌BL21(Rosetta)中。以1mmol/L IPTG在28℃诱导8 h... 根据猪丹毒杆菌噬菌体基因测序结果,设计针对裂解酶(Ely)的特异性扩增引物,PCR扩增获得Ely产物,PCR产物经酶切后克隆入表达载体p ET-28a(+),获得重组质粒p ET-28a(+)-Ely,并转化至大肠杆菌BL21(Rosetta)中。以1mmol/L IPTG在28℃诱导8 h,SDSPAGE结果表明,蛋白在上清中高效表达;通过Ni2+-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,其纯度在90%以上;以100、10和1μg/m L的终浓度作用于猪丹毒杆菌培养物,每隔1 h进行一次菌落计数,直至7 h,结果表明该裂解酶在体外可以有效裂解猪丹毒杆菌,并呈一定的时间和剂量依赖性。该研究将为治疗耐药性猪丹毒杆菌感染提供新的思路。 展开更多
关键词 猪丹毒杆菌 噬菌体 裂解酶 表达 活性
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猪细小病毒3型VP2蛋白主要抗原表位区的原核表达及间接ELISA方法的建立 被引量：1
5
作者 王广操 崔鹏超 +3 位作者 何玉 张梦岩 苑文涛 王先炜 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期770-773,共4页
为建立检测猪细小病毒3型(PPV3)的间接ELISA方法,本研究选取PPV3 VP2多表位亲水区序列设计引物,扩增并原核表达该基因片段,以表达的重组蛋白作为包被抗原建立了PPV3间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该检测方法仅对PPV3血清检测为阳性,... 为建立检测猪细小病毒3型(PPV3)的间接ELISA方法,本研究选取PPV3 VP2多表位亲水区序列设计引物,扩增并原核表达该基因片段,以表达的重组蛋白作为包被抗原建立了PPV3间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该检测方法仅对PPV3血清检测为阳性,与PPV1、PPV2、猪瘟病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒和猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒等的标准阳性血清均无交叉反应,具有较强的特异性;批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,具有良好的重复性。本研究为临床上PPV3的检测提供了血清学检测手段。 展开更多
关键词 猪细小病毒3型 VP2蛋白 原核表达 间接ELISA 临床应用
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