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microRNA-30d对人恶性胸膜间皮瘤细胞MSTO-211H增殖和迁移以及侵袭的抑制作用 被引量：5
1
作者 苑修源 张芳芳 +9 位作者 黄雅丽 贾振宇 鞠莉 肖芸 夏海玲 高雅楠 余珉 于曼 张幸 朱丽瑾 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期99-104,共6页
目的探究microRNA-30d(miR-30d)对人恶性胸膜间皮瘤细胞MSTO-211H的增殖、迁移和侵袭的抑制作用。方法于2017年4月,以MSTO-211H细胞为模型,通过转染miR-30d模拟物(miR-30d mimics)建立miR-30d过表达的MSTO-211H细胞模型,利用qRT-PCR检... 目的探究microRNA-30d(miR-30d)对人恶性胸膜间皮瘤细胞MSTO-211H的增殖、迁移和侵袭的抑制作用。方法于2017年4月,以MSTO-211H细胞为模型,通过转染miR-30d模拟物(miR-30d mimics)建立miR-30d过表达的MSTO-211H细胞模型,利用qRT-PCR检测转染后细胞miR-30d的表达水平,通过CCK-8实验、流式细胞术、细胞划痕实验以及Transwell法分析miR-30d对MSTO-211H细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等表型的影响。结果转染miR-30d mimics后,MSTO-211H+miR-30d组细胞中miR-30d表达水平明显高于MSTO-211H+miR NC组细胞(P<0.01)。MSTO-211H+miR-30d组细胞活性(105.13%±2.35%)显著低于MSTO-211H+miR NC组(115.40%±1.35%),凋亡水平(3.97%±0.36%)显著高于MSTO-211H+miR NC组(1.47%±0.10%)(P<0.01)。MSTO-211H+miR-30d组细胞在12、24 h的相对迁移面积分别为9.35±3.16 μm2和58.19±1.82 μm2,显著低于MSTO-211H+miR NC组(54.42±5.26 μm2和88.32±1.96 μm2)(P<0.01)。与MSTO-211H+miR NC组比较,MSTO-211H+miR-30d组细胞的迁移和侵袭细胞数显著减少(P<0.01)。结论 miR-30d能通过抑制MSTO-211H细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭进而调控恶性胸膜间皮瘤的进展。 展开更多
关键词 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移 侵袭 恶性胸膜间皮瘤 miR-30d
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microRNA-106b对恶性胸膜间皮瘤细胞NCI-H2452迁移和侵袭的作用 被引量：1
2
作者 高雅楠 张敏 +3 位作者 张芳芳 贾振宇 苑修源 朱丽瑾 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期648-654,共7页
目的探究microRNA-106b对恶性胸膜间皮瘤细胞NCI-H2452迁移、侵袭的抑制作用。方法于2017年4月,检测分析恶性胸膜间皮瘤细胞(NCI-H2452、MSTO-211H、NCI-H2052)和正常间皮细胞MeT-5A细胞中miRNA-106b表达水平。以NCI-H2452细胞为模型,... 目的探究microRNA-106b对恶性胸膜间皮瘤细胞NCI-H2452迁移、侵袭的抑制作用。方法于2017年4月,检测分析恶性胸膜间皮瘤细胞(NCI-H2452、MSTO-211H、NCI-H2052)和正常间皮细胞MeT-5A细胞中miRNA-106b表达水平。以NCI-H2452细胞为模型,通过转染miRNA-106b模拟物(mimics)建立miRNA-106b过表达的NCI-H2452细胞模型,利用实时荧光定量PCR检测细胞中miRNA-106b表达水平,细胞划痕实验、transwell实验,分析miRNA-106b对NCI-H2452细胞迁移和侵袭能力的影响。分析公共数据库中恶性间皮瘤基因表达数据和miRNA-106b的下游靶基因数据,筛选间皮瘤细胞中影响细胞迁移和侵袭能力的miRNA-106b下游靶基因,并验证该基因在miRNA-106b过表达的NCI-H2452细胞中的表达情况。结果三株MPM细胞相较于MeT-5A细胞miRNA-106b的表达量均降低(P<0.001)。转染miRNA-106b mimics后实验组细胞miRNA-106b表达水平明显升高(P<0.001)。实验组划痕迁移水平在24、31和48 h分别为28.45%±4.37%、38.12%±4.82%和50.06%±8.92%,与对照组迁移水平(37.48%±2.65%、49.21%±3.45%和68.14%±3.81%)比较降低(P<0.01)。与对照组比较,实验组细胞的迁移和侵袭数目减少(P<0.001)。通过公共数据库筛选分析TCF21基因出可能作为下游靶基因影响MPM细胞迁移侵袭能力,NCI-H2452细胞在转染miRNA-106b mimics后TCF21基因表达水平升高(P=0.009)。结论miRNA-106b能抑制NCI-H2452细胞的迁移和侵袭能力,使TCF21基因表达升高。 展开更多
关键词 恶性胸膜间皮瘤 细胞迁移 侵袭 miRNA-106b 转录因子21
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SETD2在恶性胸膜间皮瘤中的表达与临床意义研究 被引量：3
3
作者 于曼 余珉 +2 位作者 朱丽瑾 苑修源 张幸 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期91-98,共8页
目的分析恶性胸膜间皮瘤(MPM)基因突变概况和高频突变基因的表达水平,筛选出影响MPM患者预后的关键分子和临床病理因素。方法于2020年3月,分别从癌症基因组图谱(TCGA)数据库和人类肿瘤相关基因表达汇编(GEO)数据库下载86例MPM组织的基... 目的分析恶性胸膜间皮瘤(MPM)基因突变概况和高频突变基因的表达水平,筛选出影响MPM患者预后的关键分子和临床病理因素。方法于2020年3月,分别从癌症基因组图谱(TCGA)数据库和人类肿瘤相关基因表达汇编(GEO)数据库下载86例MPM组织的基因二代测序数据和89例MPM组织样本的基因芯片表达数据,收集相关体细胞突变信息及对应的临床病理资料。汇总TCGA数据库中组织样本基因突变概况并分析高频突变基因表达水平与MPM患者临床病理学特征、石棉接触史和预后的关系,筛选出与MPM预后显著相关的基因进行基因集富集分析(GSEA)。利用GEO数据库的芯片表达数据对筛选出的关键基因和临床病理特征进行生存分析和GSEA验证。结果 TCGA数据集中单核苷酸变异(SNV)频率最高的10个基因是BAP1、NF2、TP53、TTN、SETD2、LATS2、CCDC168、FAT4、PTCH1和ZNF469。野生型NF2、TP53、SETD2和CCDC168基因的高表达率高于突变型,差异均具有统计学意义(P<0.05)。TCGA数据集Cox多因素分析结果显示,上皮型(HR=0.425,95%CI:0.235~0.767,P<0.01)和SETD2低表达(HR=0.516,95%CI:0.307~0.868,P=0.011)MPM患者的死亡风险较低。GEO数据集生存分析验证发现,上皮型MPM患者生存时间更长,肉瘤型MPM患者生存时间最短(P<0.01)。TCGA和GEO数据集富集结果显示STED2可能与G2M细胞周期检查点、E2F靶标基因、MYC靶标基因、蛋白分泌、有丝分裂纺锤体、MTORC1通路、TGF-β通路、雄激素反应和紫外线反应等通路相关。结论 MPM伴随着以BAP1、NF2、TP53、TTN、SETD2和LATS2等基因为代表的较高频率的基因突变。SETD2表达水平和组织类型中的上皮型可能是影响MPM预后的因素。 展开更多
关键词 间皮瘤 胸膜 SETD2 TCGA数据库 GEO数据库 预后
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CD8和CTLA-4表达程度对间皮瘤组织病理学特征和生存的影响分析 被引量：2
4
作者 余珉 于曼 +5 位作者 应士波 苑修源 蒋兆强 楼建林 朱丽瑾 张幸 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期85-90,共6页
目的探讨不同CD8和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)表达特征间皮瘤患者的生存期及其死亡危险因素,为病情进展及其临床结局评价提供新线索。方法于2016年11月,采用回顾性临床病例研究设计,选择经临床组织病理学确诊的47例间皮瘤及其... 目的探讨不同CD8和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)表达特征间皮瘤患者的生存期及其死亡危险因素,为病情进展及其临床结局评价提供新线索。方法于2016年11月,采用回顾性临床病例研究设计,选择经临床组织病理学确诊的47例间皮瘤及其组织标本为研究对象,采集临床病理资料、石棉接触史和生存信息;以苏木素伊红染色法和免疫组化染色法对组织标本进行淋巴细胞浸润程度、5-甲基胞嘧啶(5-mC)、CTLA-4、CD8和细胞核增殖抗原(Ki-67)指标的检测,分析不同CD8和CTLA-4蛋白表达特征患者生存期和死亡危险因素,并分析Ki-67表达对不同CD8和CTLA-4蛋白和基因表达特征间皮瘤患者生存期的影响。结果 47例患者中,63.8%(30/47)的病例以少或中等程度淋巴细胞浸润为主,CTLA-4、CD8、5-mC和Ki-67免疫组化分值分别为92.97(54.95,120.65)、72.41(36.62,89.82)、11.09(3.40,52.89)和5.88(2.41,11.48)。CD8高表达CTLA-4高表达患者的5-mC表达水平高于CD8高表达CTLA-4低表达组(P<0.01)。27例随访信息完整间皮瘤患者的总体中位生存期为0.83±0.29年,CD8高表达CTLA-4高表达和CD8高表达CTLA-4低表达组患者的中位生存期分别为0.58±0.51年和0.83±0.30年(P=0.521)。在CD8高表达CTLA-4低表达组患者中,Ki-67免疫组化分值≥5.88是间皮瘤患者独立死亡危险因素(HR=8.40,P=0.01)。在不同CD8和CTLA-4蛋白表达特征下,在CD8高表达CTLA-4低表达组患者中,Ki-67高和低表达者的中位生存期分别为0.57±0.11年和2.31±0.46年,两组间差异有统计学意义(P<0.01)。在不同CD8和CTLA-4 mRNA表达特征下,在CD8高表达CTLA-4低表达组患者中,Ki-67 mRNA高和低表达者的中位生存期分别为1.20±0.36年和3.38±0.43年,两组间差异有统计学意义(P=0.018)。结论当CD8高表达伴随CTLA-4低表达时,间皮瘤病例可能伴随DNA去甲基化现象。随着Ki-67表达增强,其生存期缩短,死亡风险升高。 展开更多
关键词 间皮瘤 细胞毒T淋巴细胞相关抗原4 5-甲基胞嘧啶 KI-67抗原
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温石棉诱导MeT-5A细胞恶性转化的研究 被引量：1
5
作者 张芳芳 苑修源 +8 位作者 高雅楠 张敏 余珉 于曼 肖芸 鞠莉 黄雅丽 张幸 朱丽瑾 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期105-109,共5页
目的研究温石棉对人胸膜间皮细胞MeT-5A细胞毒性与诱导细胞恶性转化的能力。方法于2016年6月,采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测温石棉对MeT-5A细胞的细胞毒性;以5 μg/cm2温石棉间断染毒MeT-5A细胞,24 h/次,每周一次,共28次,待细胞呈现锚着不... 目的研究温石棉对人胸膜间皮细胞MeT-5A细胞毒性与诱导细胞恶性转化的能力。方法于2016年6月,采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测温石棉对MeT-5A细胞的细胞毒性;以5 μg/cm2温石棉间断染毒MeT-5A细胞,24 h/次,每周一次,共28次,待细胞呈现锚着不依赖性生长后,用软琼脂集落形成试验判断细胞恶性转化,并计算软琼脂集落形成率,紫外比色法测定糖代谢过程中的关键限速酶活性,包括丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)和己糖激酶(HK)。结果温石棉对MeT-5A细胞具有细胞毒性,细胞相对存活率呈浓度依赖性下降。与未染毒时相比,10、20、40、80 μg/cm^(2)温石棉染毒后MeT-5A细胞相对存活率显著下降(P<0.05)。染毒28次后,温石棉转化组细胞生长速度加快、排列紊乱,失去接触抑制,出现叠层生长,并可在软琼脂上生长,细胞集落形成率为18.33‰±2.49‰,与对照组(0)比较,差异有统计学意义(P<0.01);温石棉转化组细胞PK[(19.51±1.52)U/L]、PFK[(0.12±0.02)U/10^(4)个细胞]和HK[(0.26±0.01)U/10^(4)个细胞]酶活性水平高于对照组细胞[(25.00±1.04)U/L、(0.15±0.01)U/10^(4)个细胞和(0.33±0.01)U/10^(4)个细胞](P<0.01)。结论温石棉可诱导MeT-5A细胞发生恶性转化,并升高细胞糖酵解相关激酶PK、PFK、HK酶活性水平。 展开更多
关键词 细胞转化 糖酵解 温石棉 细胞毒性 肿瘤
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温石棉诱导支气管上皮细胞恶性转化中的基因表达谱变化特征分析
6
作者 李君贤 黄何菲 +5 位作者 雷雨珊 周书宇 苑修源 高雅楠 朱丽瑾 张芳芳 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2022年第3期265-271,279,共8页
目的探讨温石棉对人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞基因表达的影响。方法将BEAS-2B细胞随机分为2组,温石棉恶性转化组细胞予质量浓度为20μg/cm~2温石棉标准品构建温石棉诱导恶性转化BEAS-2B细胞模型,对照组细胞予等体积磷酸缓冲盐溶液。... 目的探讨温石棉对人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞基因表达的影响。方法将BEAS-2B细胞随机分为2组,温石棉恶性转化组细胞予质量浓度为20μg/cm~2温石棉标准品构建温石棉诱导恶性转化BEAS-2B细胞模型,对照组细胞予等体积磷酸缓冲盐溶液。提取2组细胞中的总RNA,逆转录合成c DNA。以Cy5-d CTP和Cy3-d CTP荧光素分别标记2组细胞制作探针,进行芯片扫描。采用Lux Scan 3.0图像分析软件分析被标记的DNA荧光信号,筛选差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析和基因本体(GO)富集分析。结果与对照组比较,温石棉恶性转化组细胞差异表达的基因有642个;其中,上调193个,下调449个。KEGG信号通路分析和GO富集分析结果显示,温石棉诱导恶性转化BEAS-2B细胞中差异表达的基因主要参与P53信号通路、组蛋白H3-K9甲基化和亚甲基四氢叶酸还原酶缺乏通路、磷酸肌醇结合蛋白3激活蛋白激酶B信号通路、核苷磷酸代谢过程和组织相容性复合物Ⅱ类抗原提呈表达抑制等信号通路。结论温石棉可诱导BEAS-2B细胞发生基因表达谱的改变;P53信号通路和组蛋白H3-K9甲基化等相关通路参与细胞恶性转化过程。 展开更多
关键词 温石棉 恶性转化 细胞转化 差异表达基因 基因表达 信号通路
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2016—2017年长春地区户外环卫工人身心健康影响的统计分析
7
作者 苑修源 许妍姬 《中国卫生产业》 2018年第19期180-181,共2页
目的探讨2016—2017年长春地区户外环卫工人身心健康状况,为干预提供科学依据。方法采用自行设计的调查问卷的方法于2016年1月—2017年10月对吉林省长春市两个区的户外环卫工人进行调查研究,分析户外环卫工人身心健康状况。结果经过调... 目的探讨2016—2017年长春地区户外环卫工人身心健康状况,为干预提供科学依据。方法采用自行设计的调查问卷的方法于2016年1月—2017年10月对吉林省长春市两个区的户外环卫工人进行调查研究,分析户外环卫工人身心健康状况。结果经过调查研究后发现,环卫工人出现胸闷憋气及声嘶等情况和环卫工人在户外工作的年限有关,但是每周工作天数和上述症状无关;吸烟可以加剧咽痛、体重大幅度下降、糖尿病的患病率,调查的环卫工人并无显著的心理问题。结论户外工作的环卫工人存在一定的健康问题,其中空气质量状况对其健康状况具有一定影响,均是长期累积的结果,同时生活方式也可以对环卫工人的健康有明显的影响,吸烟尤其加剧健康的恶化。 展开更多
关键词 环卫工人 身体状况 生活方式 空气质量
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