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大肠杆菌α-D-半乳糖苷酶的提纯及特性 被引量:1
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作者 亓珊 +2 位作者 运文慧 郭长旺 徐铃 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期83-88,共6页
大肠杆菌中与抗原K(?)s ab基因相连锁的棉子糖操纵子(raf)编码的α-D-半乳糖苷酶经硫酸铵沉淀,Sepharose 4B和DEAE纤维素等提纯步骤获纯化品,其在PAGE上呈单一电泳区带,分子量80000。粗酶品经Sepharose 4B后呈现为两个酶活性峰。该酶特... 大肠杆菌中与抗原K(?)s ab基因相连锁的棉子糖操纵子(raf)编码的α-D-半乳糖苷酶经硫酸铵沉淀,Sepharose 4B和DEAE纤维素等提纯步骤获纯化品,其在PAGE上呈单一电泳区带,分子量80000。粗酶品经Sepharose 4B后呈现为两个酶活性峰。该酶特性与染色体编码的同功酶有明显差异。最适温度为35—37℃,最适pH 7.5。以PNPG、蜜二糖、棉子糖为底物,其米氏常数分别为0.11,2.1和136mmol/L。Mn^2+离子影响酶稳定性,然而可以被巯基试剂消除。双扩散免疫实验初步表明,产H_2S基因连锁的raf操纵子编码的α-D-半乳糖苷酶与该酶可能具有相同抗原性。 展开更多
关键词 大肠杆菌 半乳糖苷酶 提纯 特性
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一种α-半乳糖苷酶的凝胶电泳活性染色方法 被引量:1
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作者 元珊 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期253-254,共2页
介绍一种快速、简便鉴定α-半乳糖苷酶凝胶电泳带的坚固蓝B活性染色方法。采用此方法,可直接将粗酶制品上样进行凝胶电泳。电泳完成后,只需将凝胶放在反应液中浸泡5min,然后再在pH为7.8,温度为4℃的条件下染色1min... 介绍一种快速、简便鉴定α-半乳糖苷酶凝胶电泳带的坚固蓝B活性染色方法。采用此方法,可直接将粗酶制品上样进行凝胶电泳。电泳完成后,只需将凝胶放在反应液中浸泡5min,然后再在pH为7.8,温度为4℃的条件下染色1min,即可将凝胶中的酶分子定位带显示出来。这种坚固蓝B的活性染色方法与考马斯亮蓝染色相比,节省了大量时间。 展开更多
关键词 活性染色 Α-半乳糖苷酶 聚丙烯酰胺 凝胶电泳
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大肠杆菌棉子糖操纵子α-半乳糖苷酶表达的调节控制 被引量:3
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作者 亓珊 +1 位作者 运文慧 徐铃 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期180-186,共7页
大肠杆菌棉子糖操纵子(raf)位于质粒,其第一结构基因rafA编码的α-半乳糖苷酶为诱导酶。raf操纵子比乳糖操纵子(lac)或蜜二糖操纵子(mel)对诱导物有更严格的结构特异性。该酶被蜜二糖或棉子糖诱导,也被D-半乳糖微弱诱导,但不受乳糖、PNP... 大肠杆菌棉子糖操纵子(raf)位于质粒,其第一结构基因rafA编码的α-半乳糖苷酶为诱导酶。raf操纵子比乳糖操纵子(lac)或蜜二糖操纵子(mel)对诱导物有更严格的结构特异性。该酶被蜜二糖或棉子糖诱导,也被D-半乳糖微弱诱导,但不受乳糖、PNPG等结构相近糖所诱导。α-半乳糖苷酶的酶诱导形成能力在对数生长末期出现高峰。raf操纵子基因结构组成及调节与乳糖操纵子相似。以阻遏物为中介的负调控在raf操纵子调节中起主要作用,同时以环腺苷-代谢降解物基因激活蛋白(cAMP-CAP)为中介的正调控也参与调节。当0.4%葡萄糖加入到其它碳源培养基时,该酶表达水平下降至原活力的1/2—1/3。无论诱导或组成型酶的葡萄糖抑制均未见瞬时抑制。腺苷环化酶(cya)缺失或环腺苷受体蛋白(crp)和cya双缺陷菌株的酶表达则分别下降到原活力的9%和2.5%。cya突变株或葡萄糖对raf操纵子表达的抑制可被cAMP解除,但cya和crp双缺陷菌株仍有葡萄糖抑制,而且这种抑制不为cAMP抵消,表明通过降低cAMP而影响cAMP-CAP复合体形成还不能解释代谢降解物抑制的全部机制。尚无证据说明吲哚类小分子化合物和低浓度尿素对raf操纵子表达的明显作用。 展开更多
关键词 棉子糖操纵子 半乳糖苷酶 基因调节
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美国畜用生长激素的研究现状及应用前景——赴美考察报告
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作者 《饲料研究》 CAS 1987年第8期22-24,共3页
自从1909年Aschner首次报道动物垂体有促进生长及脂肪迁移作用以来,生长激素研究已有近80年历史。二次世界大战期间,人们已能获得纯化的生长激素,证明给奶牛注射后可使产奶量明显增加,因而一度设想以此为手段克服部分食品短缺问题。
关键词 牛生长激素 奶牛 产奶量 产乳量 整理剂 增重剂 猪生长激素 应用前景 美利坚合众国 北美洲 美国
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