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M/XDR-TB的快速分子检测和耐药特征分析 被引量:11
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作者 范齐文 郭建 +6 位作者 张慧涨 吴晓渊 胡香南 钱雪琴 邓桂林 康涵 吴文娟 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1133-1137,共5页
目的 使用分子线性探针杂交技术结合仪器法液体快速培养分析耐多药( multidrug resistant,MDR)及广泛耐药(extensively drug resistant,XDR)结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的耐药基因和表型特征.方法 运用GenoType... 目的 使用分子线性探针杂交技术结合仪器法液体快速培养分析耐多药( multidrug resistant,MDR)及广泛耐药(extensively drug resistant,XDR)结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的耐药基因和表型特征.方法 运用GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB菌株中各耐药基因的突变位点及类型,平行用BD MGIT960系统检测所选菌株对一线及二线抗结核药物的敏感性.结果 (1)94株MDR-TB经MGIT960检测,乙胺丁醇(ethambutol,EMB)、阿米卡星(amikacin,AMK)、氧氟沙星(ofloxacin,OFX)及莫西沙星(moxifloxacin,MFX)的耐药率分别为36.2%、17.0%、54.3%和55.3%.XDR-TB检出率为13.8%.(2)以MGIT960药敏结果作为参考标准,94株MDR-TB中,GenoType MTBDRplus检测MTB对异烟肼(isoniazid,INH)、利福平(rifampin,RFP)耐药的符合率分别为86.2%和95.7%;GenoType MTBDRsl检测MTB对EMB、AMK、OFX及MFX耐药的敏感性分别为47.1%、81.3%、94.1%、94.2%;特异性分别为75.0%、98.7%、90.7%、92.9%.(3)rpoB基因突变中以S531L最多;INH耐药主要由katG基因发生突变导致,以S315T1类型居多;gyrA突变位点主要集中在第94位密码子.所测菌株中有23例为复合耐药,7例为未知突变.结论 M/XDR-TB中,INH、RFP、AMK、OFX及MFX耐药株大多分别是由katG、rpoB、rrs及gyrA突变导致,乙胺丁醇与embB之间的耐药关联性相对较低.GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB敏感性和特异性较好,可以在未获得传统细菌表型药敏结果前指导临床用药治疗. 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 +线性探针杂交 药物敏感试验
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H7N9禽流感患者外周血常规和C反应蛋白的变化及其临床意义 被引量:7
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作者 李昕 沈震 +4 位作者 张蓓 卢美娟 胡香南 胡绿荫 张军 《检验医学》 CAS 2013年第9期745-748,共4页
目的探讨H7N9禽流感患者外周血常规和C反应蛋白(CRP)的变化,为临床诊断、治疗及病情监测提供依据。方法选取18例H7N9禽流感患者(H7N9组),以2009年的20例甲型H1N1流感患者(H1N1组)及20名健康体检者(正常对照组)作为对照。根据患者康复情... 目的探讨H7N9禽流感患者外周血常规和C反应蛋白(CRP)的变化,为临床诊断、治疗及病情监测提供依据。方法选取18例H7N9禽流感患者(H7N9组),以2009年的20例甲型H1N1流感患者(H1N1组)及20名健康体检者(正常对照组)作为对照。根据患者康复情况将H7N9组再分为轻症组12例、重症组6例。分析各组血常规,同时测定H7N9组外周血CRP水平。结果与正常对照组比较,H7N9组患病初期白细胞(WBC)总数无明显变化,淋巴细胞(Lym)计数明显降低(P<0.05),同时伴有血小板(PLT)和嗜酸性粒细胞(Eos)下降(P<0.05);重症组中性粒细胞(Neu)计数明显增高(P<0.05),轻症组和重症组之间各项指标均无差异(P>0.05)。与H1N1组比较,H7N9组入院时的血象特点相似,但Lym计数下降更为明显(P<0.05)。与治疗前比较,轻症组治疗后PLT、Lym及Eos计数明显上升(P<0.05)。H7N9组入院时CRP明显升高,重症较轻症组升高更为明显(P<0.05)。轻症组治疗后CRP明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血CRP水平对区分H7N9禽流感患者轻、重症及判断预后有一定的提示作用。H7N9禽流感患者外周血常规的变化与甲型H1N1流感存在相似之处,特点并不明显,应充分结合多方面信息以明确诊断和判断预后,以防出现严重的疫情后果。 展开更多
关键词 H7N9禽流感病毒 外周血象 C反应蛋白
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白念珠菌唑类耐药和生物膜相关基因的表达 被引量:6
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作者 胡绿荫 宰淑蓓 +6 位作者 金鑫 蔡金凤 曹宇硕 胡香南 杜昕 李天铭 李敏 《检验医学》 CAS 2014年第6期597-602,共6页
目的研究白念珠菌临床分离株唑类耐药和生物膜形成相关基因的表达。方法收集上海市公共卫生临床中心2006至2011年92例感染性疾病患者[病毒性肝炎、结核、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)]血液、无菌部位和黏膜分离鉴定的白念珠菌104株,选用A... 目的研究白念珠菌临床分离株唑类耐药和生物膜形成相关基因的表达。方法收集上海市公共卫生临床中心2006至2011年92例感染性疾病患者[病毒性肝炎、结核、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)]血液、无菌部位和黏膜分离鉴定的白念珠菌104株,选用ATB FUNGUS3检测抗菌药物(氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑)的最低抑菌浓度(MIC),采用半定量逆转录聚合酶链反应(PCR)分析唑类敏感、浓度依赖性敏感(S-DD)和耐药菌株之间药物外排泵基因CDR1、CDR2、MDR1和药物靶酶基因ERG11表达的差异,同时通过甲基四氮盐(XTT)代谢试验筛选强生物膜形成能力菌株(HBFs),研究其与弱生物膜形成能力菌株(LBFs)相关基因ALS3和HWP1表达的差异。结果 104株白念珠菌中共检测出16株至少对1种唑类药物耐药,6株至少对1种唑类药物S-DD。药物靶酶基因ERG11在耐药株、S-DD株和敏感菌之间比较,差异有统计学意义(P=0.007 8),且耐药株、S-DD株分别与敏感菌比较,差异有统计学意义(P<0.05),然而CDR1、CDR2和MDR1表达量在3种菌株间无明显差异。生物膜形成能力试验显示16株菌生物膜形成能力增强,其HWP1表达量与LBFs比较差异有统计学意义(P=0.007 9),ALS3表达量差异无统计学意义。结论 ERG11基因的过度表达为白念珠菌唑类耐药的重要机制。菌丝细胞壁蛋白HWP1基因的高表达与白念珠菌生物膜形成增强相关。 展开更多
关键词 外排泵 ERG11 生物膜 白念珠菌
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结核分枝杆菌rdESAT-6抗原在耻垢分枝杆菌中的制备及其血清学诊断研究 被引量:5
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作者 郭建 范齐文 +4 位作者 范小勇 马辉 钱雪琴 胡香南 吴文娟 《检验医学》 CAS 2014年第6期607-612,共6页
目的构建结核分枝杆菌(MTB)融合基因2×esat-6原核表达载体,利用耻垢分枝杆菌诱导表达、纯化早期分泌抗原ESAT-6重组二聚体(rdESAT-6),Western blot分析其抗原性,并评估其在结核病患者中的血清学诊断价值。方法以DNA疫苗HG856A2为... 目的构建结核分枝杆菌(MTB)融合基因2×esat-6原核表达载体,利用耻垢分枝杆菌诱导表达、纯化早期分泌抗原ESAT-6重组二聚体(rdESAT-6),Western blot分析其抗原性,并评估其在结核病患者中的血清学诊断价值。方法以DNA疫苗HG856A2为模板扩增2×esat-6基因,构建pMF41-2×esat-6原核表达载体,电转化耻垢分枝杆菌,诱导表达rdESAT-6蛋白,Western blot分析其抗原性。收集126例确诊的结核病患者和42名健康体检者的血清,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和结核斑点金免疫渗滤试验(TB-DOT)检测血清结核抗体,评估rdESAT-6在结核血清学诊断中的价值。结果成功构建了pMF41-2×esat-6重组质粒,以包涵体形式表达了rdESAT-6蛋白,纯化的蛋白纯度在95%以上,可与小鼠抗ESAT-6血清发生特异性反应。126例结核病患者血清检测结果表明,rdESAT-6蛋白在MTB阳性组和阴性组患者血清学诊断的敏感性分别为79.75%(63/79)、61.70%(29/47),好于TB-DOT的62.03%(49/79)、44.68%(21/47)(P<0.05)。2种方法对42名健康体检者血清诊断特异性均为95.24%(40/42)。结论 MTB的融合蛋白rdESAT-6用于结核病血清学检测具有较好的敏感性和特异性,可作为结核病血清学诊断的优选抗原。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 ESAT-6 rdESAT-6 融合蛋白 免疫学诊断
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广泛耐药结核快速检测方法的比较研究 被引量:4
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作者 张慧涨 邓桂林 +2 位作者 方强 叶琴 胡香南 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第6期819-822,共4页
目的应用改良显微镜观察药物敏感性检测法(MODS)对临床结核分离株进行检测,完善和规范对广泛耐药结核(XDR-TB)快速检测的方法,评价其临床应用价值。方法对已做过罗氏比例法药敏的临床分离株进行MODS、BECTEC MGIT 960法药敏试验,将3种... 目的应用改良显微镜观察药物敏感性检测法(MODS)对临床结核分离株进行检测,完善和规范对广泛耐药结核(XDR-TB)快速检测的方法,评价其临床应用价值。方法对已做过罗氏比例法药敏的临床分离株进行MODS、BECTEC MGIT 960法药敏试验,将3种药敏结果对比分析,评估MODS检测XDR-TB的应用性价值。结果 29株MTB临床分离株,应用MODS技术检测出20株多耐药结核(multi drug-resistant tuberculosis,MDR-TB),其中XDRTB有12株。MODS检测利福平、异烟肼、链霉素和乙胺丁醇的药敏结果与罗氏比例法的符合率分别为93.1%、100.0%、79.3%、75.9%,与BECTEC MGIT 960法的符合率分别为100.0%、100.0%、100.0%、58.6%。17株MTB临床分离株,MODS检测左氧氟沙星的药敏结果与罗氏比例法的符合率为94.1%。结论 MODS检测利福平、异烟肼的药敏结果与罗氏比例法、BECTEC MGIT 960法的符合率高,检测左氧氟沙星的药敏结果与比例法的符合率较高,具有快速、价廉、操作简便的优点,可作为临床检出MDR-TB、XDR-TB的快速检测方法之一。 展开更多
关键词 广泛耐药结核 药敏检测 显微镜观察药物敏感性检测法
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感染性疾病患者白假丝酵母菌分子特征分析和生物膜表型研究 被引量:3
6
作者 胡绿荫 邱建萍 +4 位作者 张蓓 胡香南 宰淑蓓 郑江花 李敏 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期210-214,共5页
目的探讨感染性疾病患者白假丝酵母菌分子分型和系统进化,并进行菌株生物膜表型分析。方法选择2006至2011年上海市公共卫生临床中心92例感染性疾病患者(病毒性肝炎、结核、HIV感染者)血液、穿刺液和黏膜等部位分离鉴定的104株白假丝... 目的探讨感染性疾病患者白假丝酵母菌分子分型和系统进化,并进行菌株生物膜表型分析。方法选择2006至2011年上海市公共卫生临床中心92例感染性疾病患者(病毒性肝炎、结核、HIV感染者)血液、穿刺液和黏膜等部位分离鉴定的104株白假丝酵母菌菌株,采用国际通用的多位点序列分型(MLST)进行克隆株的鉴定分型和进化研究。选用甲基四氮盐代谢实验(XTF)筛选强生物膜形成能力菌株。实验结果选用Kruskal—Wallistest非参数检验统计分析。结果104株白假丝酵母菌菌株共检测出63个二倍体基因型(DST),其中41(65.1%)个DST型在MIST数据库中未曾报道,同时发现8个新等位基因型。在这104株菌中,94.2%的菌株聚集在全球MLST数据库18个已知的进化枝中的14个分枝上,进化枝1中包含最多数量的菌株,占26.9%。41个新的DST型菌株中86%的菌株聚集在18个已知的进化枝中的11个进化枝上。生物膜形成能力试验共筛选出16株高生物膜形成能力菌株,菌株的生物膜形成能力在不同的生理解剖部位差异有统计学意义(H=18.23,P=0.0326),导管分离的菌株生物膜形成能力明显高于血液分离的菌株(Z=-72.20,P〈0.001)。白假丝酵母菌的分子分型与菌株的生物膜形成能力有相关性(H=10.01,P=0.0185)。结论遗传和表型分析结果显示感染性疾病患者白假丝酵母菌呈分散性分布,无明显的克隆传播流行的特点。菌株的分离部位、基因型与高生物膜表型相关。 展开更多
关键词 感染 念珠菌 白色 序列分析 基因型
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检测结核分枝杆菌的BSL-2实验室污染状况的实验评价 被引量:2
7
作者 金中淦 胡香南 +5 位作者 葛平 徐蓉 陈蓉 刘学杰 吴文娟 王庆忠 《检验医学》 CAS 北大核心 2011年第12期869-873,共5页
目的通过检测生物安全二级(BSL-2)实验室结核分枝杆菌(MTB)的污染情况,对BSL-2实验室安全性进行评估。方法用FA-2型撞击式空气微生物采样器采集MTB检验前、中、后的空气样本收集于血平板和生理盐水采样介质;用物表采样规格板和棉拭子采... 目的通过检测生物安全二级(BSL-2)实验室结核分枝杆菌(MTB)的污染情况,对BSL-2实验室安全性进行评估。方法用FA-2型撞击式空气微生物采样器采集MTB检验前、中、后的空气样本收集于血平板和生理盐水采样介质;用物表采样规格板和棉拭子采集物体表面样本。血平板采集的空气样本孵育后,挑取菌落行革兰染色镜检和16S rRNA菌种鉴定。物表样本和以生理盐水为介质的空气样本经N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC)/NaOH前处理,采用MTB特异性荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测MTB;同时接种改良罗氏中性培养基和MTB液体培养基培养MTB。结果改良罗氏中性培养基未见分枝杆菌生长,液体培养基检出的2例分枝杆菌经测序证实分别属于MTB复合群和脓肿分枝杆菌;有2%(15/779)的样本MTB核酸阳性,且均来自进行药敏试验的2个BSL-2实验室;有26.7%(8/30)的来自生物安全柜的血平板采样的样本平皿菌落量达2+或以上,测序分析显示主要为葡萄球菌属、芽孢杆菌属、不动杆菌属。结论受检医院BSL-2实验室MTB污染状况总体可控,但进行MTB药敏试验的实验室应重点加强生物安全防护。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 生物安全二级实验室 生物安全
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2例输入性卵形疟散点图异常对疟原虫的筛查作用 被引量:2
8
作者 张蓓 邱建萍 +2 位作者 戚伟强 胡香南 胡绿荫 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第6期118-120,123,共4页
目的:该文报道上海市公共卫生临床中心2014年9月份收治的两例境外输入性卵形疟患者的实验室诊断,并简单探讨自动血细胞分析仪散点图异常信息对疟疾筛查的意义。方法2例患者抗凝外周血标本采用 SYSMEX XT-4000i血细胞分析仪进行血细胞... 目的:该文报道上海市公共卫生临床中心2014年9月份收治的两例境外输入性卵形疟患者的实验室诊断,并简单探讨自动血细胞分析仪散点图异常信息对疟疾筛查的意义。方法2例患者抗凝外周血标本采用 SYSMEX XT-4000i血细胞分析仪进行血细胞分析,同时制备厚薄血片显微镜镜检查找疟原虫虫体。结果2例患者的外周血中找到卵形疟疟原虫虫体,血细胞分析的散点图出现异常,中性粒细胞与嗜酸性粒细胞散点图之间的间距缩小或消失。结论血细胞分析仪特征性的散点图异常在筛查卵形疟原虫上有一定的提示价值,与显微镜镜检相结合更可促进疟原虫形态学的诊断。 展开更多
关键词 卵形疟 输入性 散点图
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结核分枝杆菌动物建模试验中ABSL-3实验室内生物安全评估 被引量:1
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作者 朱召芹 范齐文 +6 位作者 胡香南 刘芳 郭建 宰淑蓓 杨华 宋志刚 吴文娟 《检验医学》 CAS 2012年第1期34-38,共5页
目的通过在动物生物安全三级(ABSL-3)实验室内对结核分枝杆菌(MTB)动物建模过程采样监测,为实验室生物安全评估提供依据。方法在经中国合格评定国家认可委员会(CNAS)认可并由卫生部批准的,可从事MTB等高致病性病原微生物实验动物研究工... 目的通过在动物生物安全三级(ABSL-3)实验室内对结核分枝杆菌(MTB)动物建模过程采样监测,为实验室生物安全评估提供依据。方法在经中国合格评定国家认可委员会(CNAS)认可并由卫生部批准的,可从事MTB等高致病性病原微生物实验动物研究工作的ABSL-3实验室内实施MTB动物建模,在实验过程中进行空气和物体表面采样。用快速分子诊断和常规病原学方法对样本进行特异性检测分析。结果生物安全三级(BSL-3)实验室使用后的清场工作可以大大减少实验室环境的细菌量,BSL-3实验室在日常使用中也会存在少量的环境微生物,由于负压强度和使用频率的差异,核心区的环境洁净度明显高于准备间。70%乙醇喷洒消毒及擦拭可以使准备间物体表面的细菌量检出率从59.26%下降到9.38%;核心区物体表面的环境细菌检出率从6.59%下降到1.52%,核心区MTB检出率从10.99%下降到0。在ABSL-3实验室和生物安全柜双重负压环境下,可避免空气中MTB气溶胶污染。结论 ABSL-3实验室的负压环境和正确的防护及消毒措施对实验室操作人员的生物安全有重要的防护作用。 展开更多
关键词 生物安全评价 动物生物安全三级实验室 结核分枝杆菌 动物建模
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一种新型结核分枝杆菌快速药敏系统的临床应用评价
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作者 胡香南 吴晓渊 +3 位作者 吕小华 郭建 邓桂林 吴文娟 《现代检验医学杂志》 CAS 2012年第1期35-39,共5页
目的应用一种自主研发的新型结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)快速药敏系统(MB-FS-1型)检测MTB对利福平(RIF)和异烟肼(INH)的耐药性,并对该系统的临床应用效果进行评价。方法采用新型药敏系统对115株MTB临床分... 目的应用一种自主研发的新型结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)快速药敏系统(MB-FS-1型)检测MTB对利福平(RIF)和异烟肼(INH)的耐药性,并对该系统的临床应用效果进行评价。方法采用新型药敏系统对115株MTB临床分离株进行药敏试验,异烟肼以及利福平分别设置三个浓度梯度,与BECTECMGIT960法对比分析药敏结果,评估该系统检测多药耐药结核(Multidrug—resistanttuberculosis,MDR—TB)的应用性价值。结果以BECTECMGIT960法为参考标准,MB-FS-1型快速药敏系统检测INH的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为93.43%,94.88%,97.26%和88.10%,检测RIF分别为96.50%,94.83%,94.83%和96.50%。异烟肼浓度为0.2ug/ml或0.1ug/ml,利福平浓度为1.0ug/ml时两种药敏方法等效性最高,符合率分别为93.97%和95.69%。Kappa值分别为0.867和0.913,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论该新型MTB快速药敏系统检测MTB对异烟肼和利福平的耐药性与BACTECMGIT960符合率高,具有快速、价廉、操作简便的优点,可作为临床检测MDR-TB的快速检测方法之一。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 药敏试验
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