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斜卧青霉转录调控蛋白Hac1过表达菌株的构建
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作者 马小娟 韦小敏 +2 位作者 来航线 房艳华 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第8期205-212,共8页
【目的】以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,构建斜卧青霉转录调控蛋白Hac1激活形式基因(Hac1^i)随机插入过表达菌株和非激活形式基因(Hac1u)原位插入过表达菌株,并初步观察Hac1基因的2种不同编码蛋白在菌丝内部的运动情况,为进一步... 【目的】以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,构建斜卧青霉转录调控蛋白Hac1激活形式基因(Hac1^i)随机插入过表达菌株和非激活形式基因(Hac1u)原位插入过表达菌株,并初步观察Hac1基因的2种不同编码蛋白在菌丝内部的运动情况,为进一步研究转录调控蛋白Hac1的功能奠定基础。【方法】分别克隆ptrA筛选标记、gpdA启动子、Hac1^i编码区、eGFP编码区及终止子,利用融合PCR融合克隆片段,构建Hac1^i随机插入表达盒;再分别克隆Hac1上游臂及编码区、eGFP编码区及终止子、ptrA筛选标记、Hac1下游臂序列,融合克隆片段,构建Hac1u原位插入表达盒。将2种表达盒分别转化斜卧青霉原生质体,通过吡啶硫胺素筛选标记、PCR扩增等检测获得阳性转化子,荧光显微镜观察融合蛋白的表达及运动情况。【结果】成功构建了Hac1^i基因随机插入表达盒和Hac1u基因原位插入表达盒,利用原生质体转化将2种表达盒转入宿主斜卧青霉菌株,经PCR初步验证,得到了阳性转化子。阳性转化子在麸皮培养基上培养2-4d后,可在菌丝内部清晰观察到强烈的绿色荧光信号,表明融合蛋白在菌丝体内得到了正确表达。【结论】成功构建了Hac1^i基因随机插入和Hac1u基因原位插入菌株。 展开更多
关键词 斜卧青霉 荧光蛋白 转录调控蛋白Hac1
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IPCC AR6报告解读:陆地和淡水生态系统及其服务变化 被引量:2
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作者 冀国旭 +3 位作者 李积宏 干珠扎布 国铮 高清竹 《气候变化研究进展》 CSCD 北大核心 2022年第4期395-404,共10页
IPCC第六次评估报告(AR6)第二工作组(WGII)报告的第二章表明,气候变化对陆地和淡水生态系统影响的范围和程度较前期评估结果更为严峻。人为气候变化导致生态系统结构、功能和恢复力恶化,生物群落转移,疾病的传播范围和发病率增加,野火... IPCC第六次评估报告(AR6)第二工作组(WGII)报告的第二章表明,气候变化对陆地和淡水生态系统影响的范围和程度较前期评估结果更为严峻。人为气候变化导致生态系统结构、功能和恢复力恶化,生物群落转移,疾病的传播范围和发病率增加,野火燃烧面积增加和持续时间延长,局部地区物种灭绝,极端天气的频率和强度增加。未来气温升高2~4℃情景下,陆地和淡水生态系统中高灭绝风险物种占比为10%~13%,野火燃烧面积增加35%~40%,森林地区50%以上树木面临死亡风险,15%~35%的生态系统结构发生转变,碳损失持续增加,气温的升高将进一步加剧这些风险造成的严重且不可逆的影响。通过生态系统保护和恢复等人为适应和减缓措施,可以在一定程度的气候变化范围内保护生态系统的生物多样性并增强生态系统服务在气候变化下的恢复力。加剧的气候变化将阻碍适应措施的制定和实施,为保证措施的有效性需要考虑气候变化的长期影响并加快适应措施的部署。 展开更多
关键词 IPCC 陆地生态系统 淡水生态系统 生态系统服务 风险评估 适应
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基于时代性的电影剧本情节故事结构研究
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作者 《戏剧之家》 2018年第13期118-118,共1页
电影剧本既不是小说也不是喜剧,它具有独特观赏艺术结构,电影剧本结构是一种基于线性结构上适当跳跃。由于电影剧本基本结构实现性,作者将故事情节进行线性化及戏剧化叙述,能够以让电影在后期制作的过程中更好地将故事情节进行连贯演绎... 电影剧本既不是小说也不是喜剧,它具有独特观赏艺术结构,电影剧本结构是一种基于线性结构上适当跳跃。由于电影剧本基本结构实现性,作者将故事情节进行线性化及戏剧化叙述,能够以让电影在后期制作的过程中更好地将故事情节进行连贯演绎。而电影剧本的这种线性化,将想要叙述的故事情节的开端与发展以及结尾的结构进行故事发展不断推进。并且基于时代背景不同,电影剧本的情节故事结构也被不断地优化,从而为观众呈现出更具观赏意义的优质影片。 展开更多
关键词 时代性 电影剧本 故事结构
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