用生物素化重组质粒探针检测产蛋下降综合症病毒核酸 被引量：7

1

作者 张兹钧 胡木枝 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期173-179,共7页

用ＥＤＳ－７６标准毒株感染鸭胚后，提取病毒核酸，经ＰｓｔＩ酶切后，与质粒ｐＴ７／Ｔ３α－１９重组，并转化到大肠杆菌ＤＨ５α中，筛选出一个插入片段为３１８ｂｐ的重组质粒，并命名为ｐＴＥＺ．Ｐ３。用生物素标记该重组质粒后... 用ＥＤＳ－７６标准毒株感染鸭胚后，提取病毒核酸，经ＰｓｔＩ酶切后，与质粒ｐＴ７／Ｔ３α－１９重组，并转化到大肠杆菌ＤＨ５α中，筛选出一个插入片段为３１８ｂｐ的重组质粒，并命名为ｐＴＥＺ．Ｐ３。用生物素标记该重组质粒后，分别对正常鸭胚尿囊液、各地分离的ＥＤＳ毒株和禽类易感的几种病毒进行核酸杂交试验，结果该探针对实验中收到的几种ＥＤＳ分离毒均产生阳性反应，而不与正常鸭胚尿囊液和其它几种禽类病毒杂交；该探针还可从被感染鸡的软壳蛋和肛拭子中检测到病毒。在本研究中，对常规的核酸杂交试验中的样品处理、预杂交及洗涤等程序也作了改进。从采样开始，在两天之内就能得到结果。所以它是一种比病毒分离工作更为简便、快速和经济的方法。探针的标记用生物素代替同位素，也使本方法易于在基层单位推广应用。 展开更多

关键词 产蛋下降综合症 核酸杂交 核酸的生物素标记

下载PDF 职称材料

用聚合酶链反应检测产蛋下降综合症病毒核酸的研究 被引量：4

2

作者 张兹钧 胡木枝 金由辛 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期156-161,共6页

根据对ＥＤＳ一ＤＮＡ重组质粒ｐＴＥＺ.Ｐ３和ｐＴＥＺ．Ｐ２８的核酸序列分析结果，设计了两对引物，它们均能从ＥＤＳ一ＤＮＡ上扩增出一个特异片段，其长度分别为２３８ｂｐ和２０９ｂｐ。经比较，ＰＣＲ比血球凝集试验至少灵敏２... 根据对ＥＤＳ一ＤＮＡ重组质粒ｐＴＥＺ.Ｐ３和ｐＴＥＺ．Ｐ２８的核酸序列分析结果，设计了两对引物，它们均能从ＥＤＳ一ＤＮＡ上扩增出一个特异片段，其长度分别为２３８ｂｐ和２０９ｂｐ。经比较，ＰＣＲ比血球凝集试验至少灵敏２００倍，比核酸杂交试验灵敏千万倍；对１００份自然发病鸡的肛拭子、血液和软壳蛋等样品的检测结果表明：ＰＣＲ的阳性检出率远高于核酸杂交试验，并用病毒分离方法证实了ＰＣＲ对野外病料的检出结果是可信的，对常规的ＰＣＲ条件还作了改进，使试剂的用量减少了１０倍以上，并简化了一些烦琐操作。 展开更多

关键词 鸡 产蛋下降综合征 病毒 诊断 聚合酶链反应

下载PDF 职称材料

减蛋综合征病毒核酸序列分析及基因扩增研究 被引量：2

3

作者 胡木枝 张兹钧 金由辛 《中国兽医科技》 CSCD 1996年第1期20-21,共2页

从被ＥＤＳ－７６病毒感染的鸭胚尿囊液中提取病毒核酸，经ＰｓｔⅠ酶切后重组到ｐＴ７／Ｔ３α－１９的ＰｓｔⅠ位点，再转化到Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α中。在ＬＢ平板上筛选了一个ＥＤＳ－７６特异的ｐＴＥＺ·Ｐ２８重组质粒。用双... 从被ＥＤＳ－７６病毒感染的鸭胚尿囊液中提取病毒核酸，经ＰｓｔⅠ酶切后重组到ｐＴ７／Ｔ３α－１９的ＰｓｔⅠ位点，再转化到Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α中。在ＬＢ平板上筛选了一个ＥＤＳ－７６特异的ｐＴＥＺ·Ｐ２８重组质粒。用双脱氧末端终止法测定了该重组质粒中插入片段的一段核酸序列。在此基础上设计了一对引物，用这对引物成功地从ＥＤＳ－７６ＤＮＡ上扩增出了一个２０９ｂｐ的核酸片段。 展开更多

关键词 减蛋综合征 DNA 基因扩增 鸡病

下载PDF 职称材料

β-肾上腺素能兴奋剂的ELISA检测方法及其应用 被引量：2

4

作者 郑帆 胡木枝 陈琨 《中国进出境动植检》 1998年第4期30-31,共2页

８０年代以来，国内外有人研究用β—肾上腺素能兴奋剂（简称β—兴奋剂）提高畜禽的胴体瘦肉率。这类兴奋剂，在化学上属苯乙醇胺。目前人工合成的β—兴奋剂主要有Ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ（克喘素，也称克伦特罗）、Ｃｉｍａｔｃｒｏ... ８０年代以来，国内外有人研究用β—肾上腺素能兴奋剂（简称β—兴奋剂）提高畜禽的胴体瘦肉率。这类兴奋剂，在化学上属苯乙醇胺。目前人工合成的β—兴奋剂主要有Ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ（克喘素，也称克伦特罗）、Ｃｉｍａｔｃｒｏｌ（息喘宁）、Ｓａｌｅｎｂｕｔｅｒ... 展开更多

关键词 动物检疫 Β-兴奋剂 ELISA 检测 家畜检疫

下载PDF 职称材料

香港禽流感事件 被引量：2

5

作者 黄建珍 胡木枝 《广东畜牧兽医科技》 1998年第3期7-9,共3页

关键词 家禽 流感 香港

下载PDF 职称材料

鸡减蛋综合症病毒DNA片段的克隆及生物素化探针的制备

6

作者 张兹钧 胡木枝 +1 位作者 刘金胜 梁云 《中国畜禽传染病》 CSCD 1993年第4期46-48,共3页

用EDS-76病毒感染鸭胚,从尿囊液中提取EDS-76病毒DNA。用EcoR I和Sall双酶切后与质粒pT7/T3a-19重组,并转化到大肠杆菌DH_5α中。提取重组质粒,经双酶切后进行电泳分析表明,至少已得到了五种片段的克隆。将其中插入片段约为0.4Kb的重组... 用EDS-76病毒感染鸭胚,从尿囊液中提取EDS-76病毒DNA。用EcoR I和Sall双酶切后与质粒pT7/T3a-19重组,并转化到大肠杆菌DH_5α中。提取重组质粒,经双酶切后进行电泳分析表明,至少已得到了五种片段的克隆。将其中插入片段约为0.4Kb的重组质粒经光敏生物素标记后作为探针检测EDS-76感染的鸭胚尿囊液提取物,证实了该探针对EDS-76 DNA具有特异性,而且至少可检出1pg的EDS-76 DNA。 展开更多

关键词 鸡病 产蛋下降症 综合症

下载PDF 职称材料

发生伪狂犬病猪场的猪瘟与伪狂犬病免疫试验 被引量：1

7

作者 费流芳 伍时达 +6 位作者 吴虹 罗财利 胡木枝 陈琨 黄万雄 张鸿卓 郑文豪 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1996年第7期9-10,共2页

近几年来,我国的广东、四川等省都有猪场发生伪狂犬病(PR),且逐年增加,引起7日龄以下的仔猪大批死亡,造成较大的损失。根据台湾大学兽医系赖秀穗报道:PR可干扰猪瘟(SF)抗体产生。我们在发生过PR的猪场中检测SF抗体时发现猪群中整体SF抗... 近几年来,我国的广东、四川等省都有猪场发生伪狂犬病(PR),且逐年增加,引起7日龄以下的仔猪大批死亡,造成较大的损失。根据台湾大学兽医系赖秀穗报道:PR可干扰猪瘟(SF)抗体产生。我们在发生过PR的猪场中检测SF抗体时发现猪群中整体SF抗体水平大幅度下降,绝大多数猪只达不到合格水平。我们拟通过发生PR前、后及注射PR疫苗前、后的SF抗体水平对比,分析PR与SF是否有免疫干扰现象。用相同的SF免疫程序,通过不接种PR疫苗及不同时间接种PR疫苗的仔猪SF抗体水平对比,找出合适的仔猪PR免疫时间。 展开更多

关键词 猪病 伪狂犬病 猪瘟 免疫

下载PDF 职称材料

β—肾上腺素能兴奋剂的ELISA检测方法及其应用

8

作者 郑帆 胡木枝 《动植物检疫》 1999年第4期17-18,共2页

关键词 Β-兴奋剂 ELISA检测法 定量检测 药物残留 猪

下载PDF 职称材料

产蛋下降综合症病毒(EDS’76)核酸序列分析及基因扩增研究

9

作者 胡木枝 张兹钧 金由辛 《中国进出境动植检》 1995年第4期26-28,共3页

从被EDS＇76病毒感染的鸭胚尿囊液中提取病毒核酸,经Pstl酶切后重组到PT_7/T_3a—19的PstI位点,再转化到Ecoli DH 5a中。在LB平板上筛选了一个EDS特异的PTEZ·P28重组质粒。用双脱氧末端终止法测定了该重组质粒中插入片段的一段核... 从被EDS＇76病毒感染的鸭胚尿囊液中提取病毒核酸,经Pstl酶切后重组到PT_7/T_3a—19的PstI位点,再转化到Ecoli DH 5a中。在LB平板上筛选了一个EDS特异的PTEZ·P28重组质粒。用双脱氧末端终止法测定了该重组质粒中插入片段的一段核酸序列,在此基础上设计了一对引物,用这对引物成功地从EDS＇76—DNA上扩增出了一个209 bP的核酸片段。 展开更多

关键词 产蛋下降综合症 基因扩增 鸡病 病毒

下载PDF 职称材料

猎鸟血清中禽病毒抗体的检测

10

作者 Gough,RE 胡木枝 《国外兽医学（畜禽传染病）》 1991年第2期F003-F003,16,共2页

关键词 鸟 血清 禽病毒 抗体 检测

下载PDF 职称材料

鳗鲡爱德华菌病的诊断和病原学研究 被引量：11

11

作者 薄清如 黄新民 +6 位作者 郑帆 马珊珊 胡木枝 兰乃洪 黄建珍 廖春华 张远国 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期258-260,共3页

采用病理学技术、细菌培养技术、生化试验和药敏试验对珠海市某养殖场鳗鲡暴发病的病理特点和病原菌的特征进行了研究。在分离到的６株细菌中，４株为迟钝爱德华菌，另２株为继发感染的运动性气单胞菌。综合分析判断，该场鳗鲡暴发病为... 采用病理学技术、细菌培养技术、生化试验和药敏试验对珠海市某养殖场鳗鲡暴发病的病理特点和病原菌的特征进行了研究。在分离到的６株细菌中，４株为迟钝爱德华菌，另２株为继发感染的运动性气单胞菌。综合分析判断，该场鳗鲡暴发病为鳗鲡爱德华菌病。 展开更多

关键词 鳗鲡 爱德华菌 病理学 病原菌 诊断

下载PDF 职称材料