目的:探讨受体相互作用蛋白激酶1(receptor interacting protein kinase 1,RIPK1)对膀胱肿瘤干细胞增殖及成瘤能力的影响。方法:应用核素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术结合液相...目的:探讨受体相互作用蛋白激酶1(receptor interacting protein kinase 1,RIPK1)对膀胱肿瘤干细胞增殖及成瘤能力的影响。方法:应用核素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术结合液相色谱和串联质谱(liquid chromatography with tandem-mass spectrometry,LC-MS)分析小鼠膀胱癌MB49细胞与MB49膀胱癌干细胞(MB49 bladder cancer stem cells,MCSCs)间的差异表达蛋白。将靶向RIPK 1基因的特异性siRNA转染至MCSCs后,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测RIPK1 mRNA和蛋白的表达,CCK-8法检测RIPK1 siRNA对MCSCs增殖的影响,裸鼠成瘤实验观察RIPK1 siRNA对MCSCs体内成瘤能力的影响。结果:筛选出MB49细胞与MCSCs间差异表达蛋白共65个,其中29个蛋白在MCSCs中的表达水平上调,36个蛋白的表达水平下调。MCSCs中RIPK1蛋白表达水平是MB49细胞的4.99倍。RIPK1 siRNA转染组MCSCs中RIPK1 mRNA和蛋白表达水平均下降(P值均<0.05),并且RIPK1 siRNA转染组MCSCs的体外增殖和体内成瘤能力均受到抑制(P值均<0.05)。结论:膀胱肿瘤干细胞中RIPK1的表达与膀胱癌细胞的体外增殖和体内成瘤有关。展开更多
