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多肽抗体免疫富集-质谱法检测肝癌患者血清多肽标志物 被引量：12
1
作者 原剑 孙云波 +11 位作者 周晓明 杨帆 杨保安 郑俊杰 甄蓓 貌盼勇 李楠 白洁 林利忠 徐淑芳 肖汉族 魏开华 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1129-1133,共5页
血清多肽是癌症诊断信息的重要来源。近年来针对其复杂多样、丰度低、易降解的特点,多种多肽组技术得到快速发展。建立并优化了检测多肽标志物的免疫质谱方法,用于检测血清中的肿瘤多肽标志物。方法的线性范围为1～40pmol;检出限为0.5pm... 血清多肽是癌症诊断信息的重要来源。近年来针对其复杂多样、丰度低、易降解的特点,多种多肽组技术得到快速发展。建立并优化了检测多肽标志物的免疫质谱方法,用于检测血清中的肿瘤多肽标志物。方法的线性范围为1～40pmol;检出限为0.5pmol;对5pmol合成肽5标准品平行检测3次的相对标准偏差(RSD)为9.5%。采用本方法检测出浓度为35.2nmol/L的血清多肽标志物。本方法适用于临床样本中低浓度标志物的检测研究,对于癌症的早期诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 多肽抗体 免疫富集 质谱 肿瘤 早期诊断
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维生素K_1亚纳米乳的制备及其性质研究 被引量：4
2
作者 肖汉族 姚瑶 +1 位作者 刘健豪 陶昱斐 《中南药学》 CAS 2007年第3期219-221,共3页
目的制备静脉注射用维生素K1亚纳米乳。方法以卵磷脂、泊洛沙姆(poloxamer)为复合乳化剂,加入适量的稳定剂及助表面活性剂,采用正交设计试验优化处方及工艺,并对其理化性质进行研究。结果制备的维生素K1亚纳米乳具有较良好的稳定性,平... 目的制备静脉注射用维生素K1亚纳米乳。方法以卵磷脂、泊洛沙姆(poloxamer)为复合乳化剂,加入适量的稳定剂及助表面活性剂,采用正交设计试验优化处方及工艺,并对其理化性质进行研究。结果制备的维生素K1亚纳米乳具有较良好的稳定性,平均粒径为(157.0±21.5)nm,Zeta电位为(-44.53±4.10)mV。40℃下考察3个月,物理及化学性质稳定。结论筛选出的处方工艺可行,制得的维生素K1亚纳米乳可达到静脉注射使用的要求。 展开更多
关键词 维生素K1 亚纳米乳 正交设计
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多肽抗体检测原发性肝癌血清标志物ELISA方法的建立及应用 被引量：4
3
作者 周晓明 傅海媛 +9 位作者 黄亚娟 侯利平 孙云波 原剑 杨保安 郑俊杰 甄蓓 肖汉族 貌盼勇 魏开华 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期179-184,共6页
血清多肽是癌症诊断信息的重要来源,建立、优化了检测多肽标志物的直接ELISA法,并应用于肝癌血清中的多肽标志物的检测。制备及纯化针对多肽标志物Pep5的单克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记,用其建立检测相应抗原的直接ELISA法。方法... 血清多肽是癌症诊断信息的重要来源,建立、优化了检测多肽标志物的直接ELISA法,并应用于肝癌血清中的多肽标志物的检测。制备及纯化针对多肽标志物Pep5的单克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记,用其建立检测相应抗原的直接ELISA法。方法线性范围为1.5-20 ng/mL,检测限为1.24 ng/mL;标准品批内及批间CV分别小于3.66%及4.89%,血清样本批内及批间CV分别小于11.69%及18.18%;线性范围内(9、12和15 ng/mL)的回收率分别为98.98%,99.61%和101.58%。应用该方法共检测160例正常血清、104例肝硬化及156例肝癌患者血清,正常组与肝硬化组及肝癌组间差异显著(P<0.001),Pep5诊断肝癌的敏感性和特异性分别为80.8%和96.2%。同时检测94例HCC血清中的AFP和Pep5,AFP检出率为63.8%,Pep5检出率为90.4%,AFP联合Pep5检测时,能将HCC的检出率提高至94.7%。 展开更多
关键词 多肽抗体 ELISA 肝癌 早期诊断
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免疫质谱法检测肝癌血清多肽标志物 被引量：4
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作者 傅海媛 原剑 +12 位作者 周晓明 孙云波 黄亚娟 侯利平 宋纯艳 杨保安 甄蓓 高蓉 貌盼勇 林利忠 徐淑芳 肖汉族 魏开华 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1803-1806,共4页
建立免疫亲和富集分离与质谱分析相结合的免疫质谱法用于血清多肽标志物pep5的检测。多克隆抗体与蛋白A琼脂糖颗粒偶联用于捕获pep5,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测标志物。本方法的线性范围为1～48 nmol/L,检出限0.2 nmol/L;回... 建立免疫亲和富集分离与质谱分析相结合的免疫质谱法用于血清多肽标志物pep5的检测。多克隆抗体与蛋白A琼脂糖颗粒偶联用于捕获pep5,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测标志物。本方法的线性范围为1～48 nmol/L,检出限0.2 nmol/L;回收率为93.0%～103.1%,相对标准偏差(RSD)为6.4%～11.8%;反复冻融3次pep5,检测结果稳定;检测临床肝癌/正常血清样本灵敏度为78.0%、特异度为90%。该方法方便、快速、准确,适用于临床样本中低浓度标志物的检测研究,对于癌症的早期诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 多肽抗体 免疫亲和富集 质谱
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联合UV及SDS-PAGE监测并优化碳二亚胺偶联法制备多肽免疫原 被引量：3
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作者 侯利平 傅海媛 +10 位作者 陶亚岚 黄亚娟 孙云波 宋纯艳 夏云飞 杨保安 韩治国 肖汉族 郑俊杰 甄蓓 魏开华 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期783-788,共6页
建立了一种多肽免疫抗原偶联的双监测法,获得一种操作简便、成功率高、适用范围广的碳二亚胺偶联法,并应用于多种肿瘤相关多肽标志物的免疫抗原制备。以合成多肽SP0104为标准品,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,碳二亚胺(EDC)为偶联剂,对... 建立了一种多肽免疫抗原偶联的双监测法,获得一种操作简便、成功率高、适用范围广的碳二亚胺偶联法,并应用于多种肿瘤相关多肽标志物的免疫抗原制备。以合成多肽SP0104为标准品,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,碳二亚胺(EDC)为偶联剂,对加样顺序、投料比、偶联时间等关键条件进行考察,采用UV和SDS-PAGE对反应产物进行联合监测,以偶联比和偶联率联合评价反应条件。加样顺序为多肽和载体蛋白先混合再加到碳二亚胺中,三者质量比为1∶1∶1,偶联时间为12 h,偶联比在4∶1～12∶1之间,偶联率在9%～20%之间,所得SP0104多抗效价达到1∶80 000,MALDI-TOF质谱分析证实该抗体准确捕获目标抗原。用优化的偶联方法制备多肽SPC09、SPC15、SPG01、SPG03、SPG04的免疫抗原,所得免疫血清效价均在1∶1万以上,最高可达1∶51.2万。所建碳二亚胺多肽偶联联合监测法简便实用,可提高多肽抗体制备的成功率。 展开更多
关键词 多肽偶联 碳二亚胺偶联法 监测 抗体
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新型肝损伤血清标志物Pep5定量检测方法的建立及临床应用 被引量：1
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作者 傅海媛 侯利平 +9 位作者 周晓明 黄亚娟 宋纯艳 孙云波 汪洋 杨保安 肖汉族 甄蓓 魏开华 王海滨 《检验医学与临床》 CAS 2013年第20期2641-2643,共3页
目的建立定量检测血清多肽Pep5的酶联免疫吸附方法(ELISA),用于判定肝损伤进程的研究。方法以待测血清样本稀释液包被酶联板,5%脱脂奶粉封闭,辣根过氧化物酶标记的抗Pep5单克隆抗体作为标记抗体,建立定量检测人血清多肽Pep5的ELISA,并... 目的建立定量检测血清多肽Pep5的酶联免疫吸附方法(ELISA),用于判定肝损伤进程的研究。方法以待测血清样本稀释液包被酶联板,5%脱脂奶粉封闭,辣根过氧化物酶标记的抗Pep5单克隆抗体作为标记抗体,建立定量检测人血清多肽Pep5的ELISA,并用于临床检测690例肝损伤及健康血清样本。结果灵敏度为1.25ng/mL;线性范围(0～24ng/mL)内相关系数为0.998 7;与乙酰胆碱酯酶、层黏连蛋白、透明质酸、三型前胶原交叉反应率小于1.00%;添加回收率在99.09%～107.08%;批内、批间变异系数(CV)分别为5.62%～7.32%、6.21%～6.45%。与其他肝损伤指标乙酰胆碱酯酶试剂盒进行对比试验,表明两种检测方法有一定的相关性(r=0.68)。临床检测结果表明血清多肽Pep5水平随着肝损伤程度加重而升高,与正常血清差异有统计学意义(P<0.01)。结论多肽Pep5可用于肝损伤进程定量血清学检测,检测方法简便、可靠,为后续深入研究多肽Pep5的功能及相关诊断试剂盒的研制和开发提供了科学依据。 展开更多
关键词 多肽Pep5 酶联免疫吸附法 肝损伤 血清学诊断
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一家农业企业的呼吁
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作者 肖汉族(口述) 陈建芬(整理) 《中国企业家》 2008年第3期76-76,共1页
湖南大雪，对我而言，最大的影响在于交通出行。可是相对大雪对于公司的影响而言，对我个人的影响可以忽略不计。
关键词 农业企业 呼吁 公司 雪灾
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