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生物囊泡分离鉴定方法及其在兽医学中的应用 被引量：2
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作者 贾万欣 邹聪 +4 位作者 段琦颖 屈春惠 肖楚宁 李斌 王世民 《现代畜牧兽医》 2023年第8期90-96,共7页
生物囊泡是细胞产生的一种膜性小泡,内含丰富的DNA、蛋白质、脂质等生物活性物质,是细胞间重要的信息传递媒介。近年来,生物囊泡在兽医学领域的研究主要集中于外泌体或微囊泡,为抗寄生虫药物研究和某些动物疾病诊断提供了新思路。然而,... 生物囊泡是细胞产生的一种膜性小泡,内含丰富的DNA、蛋白质、脂质等生物活性物质,是细胞间重要的信息传递媒介。近年来,生物囊泡在兽医学领域的研究主要集中于外泌体或微囊泡,为抗寄生虫药物研究和某些动物疾病诊断提供了新思路。然而,生物囊泡的分离、纯化及鉴定技术仍是该领域的技术瓶颈,制约了生物囊泡进一步的应用及研究。文章归纳整理国内外相关文献,综述了生物囊泡的类型、分离纯化方法、鉴定技术及其在兽医学中的应用等,以期为生物囊泡应用于兽医临床诊疗提供参考。 展开更多
关键词 生物囊泡 分离纯化 外泌体 微囊泡
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马疱疹病毒1型gD囊膜蛋白磷酸化位点的鉴定及其对亚细胞定位的影响
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作者 段琦颖 贾万欣 +3 位作者 肖楚宁 屈春惠 李斌 王世民 《动物医学进展》 北大核心 2023年第6期70-76,共7页
为了研究蛋白质磷酸化修饰对马疱疹病毒1型(EHV-1)gD囊膜蛋白高尔基体驻留的影响,通过蛋白质修饰质谱技术鉴定gD囊膜蛋白磷酸化位点,利用Overlap PCR技术构建磷酸化位点突变型真核表达质粒pCAGGS-gD-S391A-myc及pCAGGS-gD-S391D-myc,并... 为了研究蛋白质磷酸化修饰对马疱疹病毒1型(EHV-1)gD囊膜蛋白高尔基体驻留的影响,通过蛋白质修饰质谱技术鉴定gD囊膜蛋白磷酸化位点,利用Overlap PCR技术构建磷酸化位点突变型真核表达质粒pCAGGS-gD-S391A-myc及pCAGGS-gD-S391D-myc,并转染至Hela细胞,经Western blot检测野生型及突变型gD囊膜蛋白表达情况,利用间接免疫荧光技术鉴定gD囊膜蛋白及其突变体的亚细胞定位。质谱结果显示,EHV-1 gD囊膜蛋白的S391位点发生磷酸化修饰;测序结果表明,成功构建模拟磷酸化突变型质粒pCAGGS-gD-S391D-myc及模拟去磷酸化突变型质粒pCAGGS-gD-S391A-myc;间接免疫荧光结果显示,模拟磷酸化突变体gD-S391D-myc与野生型gD-myc定位情况类似,都驻留于高尔基体;而模拟去磷酸化突变体gD-S391A-myc可转运至细胞膜。S391位点的磷酸化修饰对gD囊膜蛋白驻留于高尔基体起到重要作用,阻断该位点磷酸化修饰可促进gD囊膜蛋白转运至细胞膜,为进一步研究gD高尔基体驻留机制提供参考。 展开更多
关键词 马疱疹病毒1型 gD囊膜蛋白 磷酸化 亚细胞定位
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