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WNT2B基因高表达成纤维细胞诱导克罗恩病肠道损伤的机制研究
1
作者 成燕玲 肖姝喆 +9 位作者 刘丹琼 耿岚岚 古建标 唐芮 兰林 朱云 陈佩瑜 何志华 龚四堂 程旸 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期606-613,共8页
目的探讨WNT2B基因高表达成纤维细胞通过激活巨噬细胞促进克罗恩病肠道组织损伤的机制。方法生物信息分析、病理组织研究及细胞实验研究。生物信息分析方面,收集课题组前期炎症性肠病(IBD)患儿结肠组织细胞生物信息研究数据,再次进行单... 目的探讨WNT2B基因高表达成纤维细胞通过激活巨噬细胞促进克罗恩病肠道组织损伤的机制。方法生物信息分析、病理组织研究及细胞实验研究。生物信息分析方面,收集课题组前期炎症性肠病(IBD)患儿结肠组织细胞生物信息研究数据,再次进行单细胞测序分析。病理组织研究方面,以2022年7至9月于广州市妇女儿童医疗中心消化科住院行结肠镜检查确诊为克罗恩病的10例患儿为研究对象,每例患儿均分别取结肠炎症明显或溃疡部位组织及邻旁炎症轻微或正常部位组织,根据结肠镜下外观显示炎症明显或溃疡部位组织为炎症组,炎症轻且无溃疡部位组织为非炎症组。结肠组织行HE染色观察其病理情况,组织免疫荧光检测巨噬细胞浸润和CXCL12的表达情况。细胞实验研究方面,转染了WNT2B质粒或空载质粒的成纤维细胞分别与有或无经盐霉素处理的巨噬细胞共培养,蛋白质印迹法检测Wnt经典通路蛋白表达情况;使用SKL2001处理的巨噬细胞作为实验组,磷酸盐缓冲液处理的巨噬细胞为对照组,采用实时荧光定量PCR(qPCR)反应、酶联免疫吸附试验检测巨噬细胞CXCL12的表达及分泌情况。组间比较采用t检验或秩和检验。结果单细胞测序分析提示巨噬细胞是IBD结肠组织的主要细胞,高表达WNT2B基因的成纤维细胞和巨噬细胞存在相互作用关系。病理组织研究中,10例患儿[年龄(9.3±3.8)岁,男7例、女3例]的结肠组织HE染色显示,炎症组结肠组织病理评分高于非炎症组[4(3,4)比2(1,2)分,Z=3.05,P=0.002],组织免疫荧光提示每高倍镜视野中炎症组巨噬细胞浸润数明显高于非炎症组[(72.8±10.4)比(8.4±3.5)个,t=25.10,P<0.001],炎症组每高倍镜视野中表达CXCL12的细胞明显多于非炎症组[(14.0±3.5)比(4.7±1.9)个,t=14.68,P<0.001]。细胞实验中,蛋白质印迹法提示与转染了WNT2B质粒的成纤维细胞共培养的巨噬细胞磷酸化的糖原 展开更多
关键词 巨噬细胞 成纤维细胞 基因
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WNT2b高表达的成纤维细胞破坏肠道黏膜屏障
2
作者 肖姝喆 成燕玲 +8 位作者 朱云 唐芮 古建标 兰林 何志华 刘丹琼 耿岚岚 程旸 龚四堂 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期206-212,共7页
目的 探讨WNT2b高表达成纤维细胞破坏肠黏膜,促进炎症性肠病(IBD)进展的机制。方法 通过体外细胞共培养及条件培养,构建成纤维细胞对Caco-2细胞的作用模型。实验组为加入20%成纤维细胞条件培养基或与WNT2b高表达成纤维细胞共培养,对照... 目的 探讨WNT2b高表达成纤维细胞破坏肠黏膜,促进炎症性肠病(IBD)进展的机制。方法 通过体外细胞共培养及条件培养,构建成纤维细胞对Caco-2细胞的作用模型。实验组为加入20%成纤维细胞条件培养基或与WNT2b高表达成纤维细胞共培养,对照组为不含条件培养基或与野生型成纤维细胞共培养,通过跨膜电阻和荧光黄渗透率测定,评估Caco-2细胞屏障通透性的变化。与WNT2b高表达或对照肠道成纤维细胞共培养后,使用免疫荧光法检测Caco-2细胞β-catenin入核情况,使用Western blot法检测ZO-1、E-Cadherin等紧密连接蛋白表达情况。采用DSS(葡聚糖硫酸钠)对C57小鼠进行类IBD肠炎造模,实验组使用Salinomycin(5 mg/kg,腹腔注射),对照组为对应溶剂生理盐水,分别对小鼠进行处理,评价该抑制剂对肠炎的治疗作用。结果 与对照组相比,过表达WNT2b基因可致成纤维细胞分泌WNT2b蛋白显著增加,并促进Caco-2细胞β-catenin入核(P<0.01),紧密连接蛋白表达下降;Caco-2细胞中敲低FZD4表达可逆转这一作用。Salinomycin可明显减轻对DSS小鼠肠道炎症并使肠黏膜紧密连接蛋白表达增多。结论 WNT2b高表达成纤维细胞破坏肠黏膜屏障功能,是治疗IBD的潜在靶点。 展开更多
关键词 炎症性肠病 成纤维细胞 WNT2b WNT/Β-CATENIN信号通路
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益母草色素最佳提取工艺优选研究
3
作者 梁青青 许火龙 +2 位作者 黄月圆 肖姝喆 黄锁义 《微量元素与健康研究》 CAS 2016年第5期44-45,共2页
目的:用超声波辅助法对益母草色素进行提取以及研究,为益母草的开发利用提供理论依据。方法:使用单因素和正交实验得到益母草色素的最佳提取工艺。结果:优选益母草色素的最佳提取工艺是液固比为20∶1,提取时间为40 min,超声波功率为120 ... 目的:用超声波辅助法对益母草色素进行提取以及研究,为益母草的开发利用提供理论依据。方法:使用单因素和正交实验得到益母草色素的最佳提取工艺。结果:优选益母草色素的最佳提取工艺是液固比为20∶1,提取时间为40 min,超声波功率为120 W。结论:益母草原材料价格低廉,提取方法简单,提取效果好,功效众多,使用广泛。 展开更多
关键词 益母草 色素 超声波辅助法 提取工艺
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婴儿肛周坏死性筋膜炎1例
4
作者 肖姝喆 刘思容 +2 位作者 郝志宏 荣新洲 张又祥 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期385-386,共2页
对广州市第一人民医院儿科收治的1例肛周坏死性筋膜炎患儿的临床资料进行回顾性分析。患儿,女,5个月余,以发热、腹泻起病,仅发病10 d患儿肛周皮肤由红肿进展为肛周皮肤及软组织溃烂,脂肪液化,可见直肠暴露,予手术切开、彻底清创引流并... 对广州市第一人民医院儿科收治的1例肛周坏死性筋膜炎患儿的临床资料进行回顾性分析。患儿,女,5个月余,以发热、腹泻起病,仅发病10 d患儿肛周皮肤由红肿进展为肛周皮肤及软组织溃烂,脂肪液化,可见直肠暴露,予手术切开、彻底清创引流并选用敏感抗生素等治疗后患儿痊愈出院。肛周坏死性筋膜炎是一种极为罕见的、由多种细菌感染引起的坏死性软组织感染。因为其早期表现难以鉴别、症状严重、病死率高,所以应在临床工作中予以重视。 展开更多
关键词 肛周坏死性筋膜炎 婴儿 诊断 治疗 预后
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