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溴结构域包含蛋白2对大鼠活化肝星状细胞PPAR-γ活性和TGF-β介导的信号转导的影响 被引量：1
1
作者 王锋琴 赵雪丽 +3 位作者 耿静平 吴江锋 王琥 柳长柏 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期302-307,共6页
目的探讨大鼠活化肝星状细胞(HSC)中溴结构域包含蛋白2(BRD2)功能对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)活性和转化生长因子β(TGF-β)介导的相关信号转导的影响。方法构建pcDNA3.1(+)-BRD2真核表达质粒并在HSC-T6中高表达BRD2;运用B... 目的探讨大鼠活化肝星状细胞(HSC)中溴结构域包含蛋白2(BRD2)功能对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)活性和转化生长因子β(TGF-β)介导的相关信号转导的影响。方法构建pcDNA3.1(+)-BRD2真核表达质粒并在HSC-T6中高表达BRD2;运用BRD2基因特异性siRNA,敲低HSC-T6中BRD2表达。Western blot法检测BRD2高表达及特异性敲低表达对PPAR-γ、Smad2/3、Smad7蛋白表达以及Smad3磷酸化的影响,荧光素酶报告基因技术分析敲低BRD2表达对PPAR-γ或TGF-β调控的荧光素酶报告基因表达的影响,Western blot法检测BRD2高表达和低表达对Ⅰ型胶原蛋白表达的影响。结果成功构建pcDNA3.1(+)-BRD2重组真核表达质粒,在HSC-T6中高表达BRD2;筛选出BRD2特异性siRNA(BRD2 siRNA-1、BRD2 siRNA-2、BRD2 siRNA-Mix)有效敲低BRD2表达。在HSC-T6细胞中敲低BRD2表达,可促进PPAR-γ活性(P<0.05),对PPAR-γ蛋白表达无明显影响(P> 0.05);可下调Smad3蛋白表达并抑制其磷酸化,同时上调Smad7蛋白表达(P<0.05,P <0.01);显著抑制了HSC中Ⅰ型胶原蛋白的表达(P <0.05,P <0.01)。结论BRD2可能通过抑制活化HSC中PPAR-γ活性、促进TGF-β下游Smad3的磷酸化、抑制Smad7表达而促进TGF-β介导的信号转导,发挥促纤维化作用。 展开更多
关键词 溴结构域包含蛋白2 PPAR-Γ 转化生长因子Β 大鼠 肝星状细胞 肝纤维化
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