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不同蛋白标签对LMO2融合蛋白沉淀实验的影响 被引量：3
1
作者 袁伟 孙伟 +6 位作者 杨爽 闫继东 翟春利 杜君 王兆琦 安迪 朱天慧 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期887-891,共5页
融合蛋白沉淀技术是一种用来研究蛋白质相互作用的新的体外实验技术,通常利用蛋白亲和标签与探针蛋白融合表达来钓取未知相互作用蛋白或验证已知蛋白间的相互作用,其中以谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签最为常用。LMO2(由LIMonly缩写得名,... 融合蛋白沉淀技术是一种用来研究蛋白质相互作用的新的体外实验技术,通常利用蛋白亲和标签与探针蛋白融合表达来钓取未知相互作用蛋白或验证已知蛋白间的相互作用,其中以谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签最为常用。LMO2(由LIMonly缩写得名,也称Ttg-2或Rbtn2)是一种小分子量难溶蛋白。利用原核系统分别表达了含有GST和麦芽糖结合蛋白(MBP)两种标签的LMO2融合蛋白,发现GST-LMO2融合蛋白以包涵体的形式表达,而MBP-LMO2融合蛋白则能够以可溶形式表达,而且MBP-LMO2的表达量明显高于GST-LMO2融合蛋白。将可溶性的MBP-LMO2融合蛋白和复性后的GST-LMO2融合蛋白分别用于钓取K562细胞中LMO2的结合蛋白,结果显示二者都可以结合K562细胞中内源性的GATA1蛋白,而MBP-LMO2融合蛋白捕获的GATA1蛋白明显多于复性后的GST-LMO2融合蛋白。这一结果提示,在研究一些分子量小、疏水性强的蛋白质时改变标签蛋白可能是一种有益的尝试。 展开更多
关键词 蛋白质沉淀技术 谷胱甘肽巯基转移酶 麦芽糖结合蛋白 LMO2
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表达外源rhBMP2的CHO细胞株稳定性分析 被引量：2
2
作者 翟春利 闫继东 +4 位作者 杨爽 杜君 袁伟 王兆奇 朱天慧 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期862-866,共5页
骨形态发生蛋白2(BMP2)属于TGF-β超家族,是诱导成骨活性最强的BMPs之一,具有广泛的临床应用的前景。本实验室已成功构建高效表达rhBMP2的重组CHO细胞株,现选取其中一株表达量最高的细胞rCHO(hBMP2)-C8进行长期体外培养,并在培养过程中... 骨形态发生蛋白2(BMP2)属于TGF-β超家族,是诱导成骨活性最强的BMPs之一,具有广泛的临床应用的前景。本实验室已成功构建高效表达rhBMP2的重组CHO细胞株,现选取其中一株表达量最高的细胞rCHO(hBMP2)-C8进行长期体外培养,并在培养过程中比较了添加和去除压力筛选中使用的MTX对细胞生长,rhBMP2基因拷贝数及rhBMP2分泌蛋白表达的影响;检测了该细胞株在无血清培养基中可以连续表达rhBMP2的时间以及培养基中rhBMP2的温度敏感性等等。该研究为进一步采用动物细胞规模化培养技术生产rhBMP2奠定了基础。 展开更多
关键词 BMP2 CHO细胞株 稳定性 规模化培养
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红藤败酱汤加减方治疗慢性盆腔炎的效果评价 被引量：2
3
作者 翟春利 《当代医药论丛》 2019年第22期169-170,共2页
目的:探究用红藤败酱汤加减方治疗慢性盆腔炎的临床效果.方法:选择2018年9月至2019年5月在涟水县保滩镇卫生院接受治疗的慢性盆腔炎患者35例作为研究对象.以抽签的方式将其分为红藤败酱汤组与西医组.对西医组患者进行常规的西医治疗,对... 目的:探究用红藤败酱汤加减方治疗慢性盆腔炎的临床效果.方法:选择2018年9月至2019年5月在涟水县保滩镇卫生院接受治疗的慢性盆腔炎患者35例作为研究对象.以抽签的方式将其分为红藤败酱汤组与西医组.对西医组患者进行常规的西医治疗,对红藤败酱汤组患者采用红藤败酱汤加减方进行治疗.然后对比两组患者治疗的总有效率及治疗后其各项中医证候评分.结果:红藤败酱汤组患者治疗的总有效率〔94.44%(17/18)〕高于西医组患者,P<0.05.红藤败酱汤组患者的下腹胀痛评分〔(2.03±0.48)分〕、乳房胀痛评分〔(2.06±0.23)分〕、肛门坠胀评分〔(2.15±0.14)分〕、腰骶胀痛评分〔(1.89±0.11)分〕、带下量评分〔(1.74±0.12)分〕均低于西医组患者,P<0.05.结论:用红藤败酱汤加减方治疗慢性盆腔炎的效果较好,可显著改善患者的临床症状,促进其康复. 展开更多
关键词 红藤败酱汤加减方 慢性盆腔炎 中医证候评分
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原癌基因LMO2短剪切模式的结合蛋白鉴定及功能分析
4
作者 袁伟 杨爽 +4 位作者 孙伟 杜君 翟春利 王兆琦 朱天慧 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期325-328,共4页
目的研究原癌基因LMO2短剪切模式（LMO2-C）的结合蛋白在白血病细胞K562中的表达及功能分析。方法利用麦芽糖结合蛋白（MBP）沉淀技术和哺乳动物双杂交技术研究LMO2-C的结合蛋白在K562细胞中的表达；半定量RT-PCR检测过表达LMO2-C的K56... 目的研究原癌基因LMO2短剪切模式（LMO2-C）的结合蛋白在白血病细胞K562中的表达及功能分析。方法利用麦芽糖结合蛋白（MBP）沉淀技术和哺乳动物双杂交技术研究LMO2-C的结合蛋白在K562细胞中的表达；半定量RT-PCR检测过表达LMO2-C的K562细胞中红系发育的标志性基因GPA的表达水平。结果MBP原核表达系统成功表达并被纯化出可溶性MBP-LMO2-C结合蛋白，利用MBP沉淀技术验证了LMO2-C能与K562细胞中内源性的GATA-1、LDB1结合；哺乳动物双杂交试验进一步证明LMO2-C能与LDB1结合，而且其过表达能够抑制LMO2-L与LDB1的结合，抑制率达（81．13±0．68）％；半定量RT-PCR结果显示在过表达LMO2-C的K562细胞中，GPA基因相对表达水平下调（51．00±1．58）％。结论LMO2-C能结合K562细胞中内源性GATA-1、LDB1蛋白，并能下调红系发育的标志性基因GPA的表达。 展开更多
关键词 基因 LMO2-C GATA1 LIM结构域结合蛋白 麦芽糖结合蛋白沉淀 双杂交系统技术
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环氧树脂石粉砂浆在闸底灌浆中的应用
5
作者 翟春利 王越 贵晓飞 《山东水利》 2005年第5期39-39,共1页
1工程概况 茌平县白庄蓄水闸位于茌新河入徒骇河口处,该闸共3孔,孔跨3m,设计蓄水高度5.8m,控制流域面积208km2,设计排涝流量62m3/s.结构型式为桩基、承台、小底板结构.1993年竣工.
关键词 环氧树脂 应用 灌浆 闸底 砂浆 石粉 1993年 流域面积 排涝流量 结构型式 底板结构 茌平县 蓄水 设计 河口 新河 闸位 竣工
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