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猪圆环病毒3型夹心ELISA诊断方法的建立 被引量：6
1
作者 于俊楠 陈媛 +3 位作者 彭尧舜 金宜顺 罗莉妍 陈梅芳 《福建畜牧兽医》 2019年第2期17-20,共4页
本研究基于实验室制备的PCV3 Cap蛋白单克隆抗体,建立检测PCV3的夹心ELISA方法。通过筛选最佳包被浓度、包被时间、一抗和二抗浓度来建立夹心ELISA方法并确定临界值。探讨该方法的特异性和重复性,并进行临床应用。结果表明,单抗包被10μ... 本研究基于实验室制备的PCV3 Cap蛋白单克隆抗体,建立检测PCV3的夹心ELISA方法。通过筛选最佳包被浓度、包被时间、一抗和二抗浓度来建立夹心ELISA方法并确定临界值。探讨该方法的特异性和重复性,并进行临床应用。结果表明,单抗包被10μg/mL(1:200)、一抗1:4 000稀释、二抗1:5 000稀释后的作用浓度为最佳工作浓度;特异性试验表明,该诊断方法特异性良好,与PCV2等多种病毒蛋白不存在交叉反应;重复测试结果表明,测定内和测定间的变异小于5%。研究结果表明,建立的夹心ELISA试验可用于临床检测PCV3。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 夹心ELISA 单克隆抗体
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河南省和湖北省部分地区鸡球虫分离株对磺胺氯吡嗪钠耐药性调查 被引量：2
2
作者 耿天天 罗莉妍 +5 位作者 王雅乐 申邦 方瑞 胡敏 赵俊龙 周艳琴 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期125-129,共5页
为了解河南省和湖北省鸡球虫对磺胺氯吡嗪钠的耐药现状,选取河南省18个地区和湖北省17个地区的地方分离株进行鸡体笼养试验,以抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)来评价各虫株耐药性。研究结果显示,在所研究的93株鸡球虫分离株中,河... 为了解河南省和湖北省鸡球虫对磺胺氯吡嗪钠的耐药现状,选取河南省18个地区和湖北省17个地区的地方分离株进行鸡体笼养试验,以抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)来评价各虫株耐药性。研究结果显示,在所研究的93株鸡球虫分离株中,河南省共计虫株52株,湖北省共计虫株41株。在河南省52株分离虫株中,有25株对磺胺氯吡嗪钠完全耐药(ACI<160),16株中度耐药(160≤ACI≤180),11株敏感(ACI>180);在湖北省共计41株鸡球虫分离虫株中,有9株完全耐药,9株中度耐药,23株敏感。研究结果为河南省和湖北省鸡球虫的耐药性提供了数据支撑。 展开更多
关键词 鸡球虫 耐药性 磺胺氯吡嗪钠 鸡体笼养试验
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应用四引物扩增阻滞突变体系PCR技术检测柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶N377D突变
3
作者 耿天天 王雅乐 +5 位作者 罗莉妍 申邦 方瑞 胡敏 赵俊龙 周艳琴 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期93-97,共5页
面对严重鸡球虫病的磺胺耐药性,传统检测磺胺耐药的方法已无法满足临床应用,因此建立一种新的磺胺耐药柔嫩艾美耳球虫检测方法具有重要意义。本研究建立了一种使用四引物扩增阻滞突变体系PCR技术(amplification refractory mutation sys... 面对严重鸡球虫病的磺胺耐药性,传统检测磺胺耐药的方法已无法满足临床应用,因此建立一种新的磺胺耐药柔嫩艾美耳球虫检测方法具有重要意义。本研究建立了一种使用四引物扩增阻滞突变体系PCR技术(amplification refractory mutation system-PCR,ARMS-PCR)用于准确区分柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶(dihydropteroate synthase,DHPS)基因中的点突变(A1129G)。对ARMS-PCR反应进行优化,最佳内外引物工作浓度比是5∶1,Mg^(2+)的最优工作浓度为10 mmol/L,dNTP的最优工作浓度为0.15 mmol/L,最佳Taq酶体积为0.1μL,最佳退火温度为62℃。本研究发现在合适的PCR体系下,能够检测出含有磺胺耐药柔嫩艾美耳球虫的最低检测限为40 fg,表明该方法灵敏度良好;通过在1对内引物(F-inner377s/R-inner377r)上倒数第3位碱基上分别引进错配,使该方法的特异性提高。因此,ARMS-PCR方法是一种简单快速的用以区分临床分离株单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的基因分型方法。 展开更多
关键词 鸡球虫病 耐药性 四引物扩增阻滞突变体系PCR技术 单核苷酸多态性
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环介导等温扩增技术检测柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶N377D突变 被引量：1
4
作者 耿天天 王雅乐 +5 位作者 罗莉妍 申邦 方瑞 胡敏 赵俊龙 周艳琴 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1607-1611,共5页
面对日益严重的磺胺类药物的耐药性,传统的耐药性检测方法已不能满足临床需求,因此开发一种磺胺耐药柔嫩艾美耳球虫检测方法十分必要。本试验建立一种使用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)来准确区分柔嫩... 面对日益严重的磺胺类药物的耐药性,传统的耐药性检测方法已不能满足临床需求,因此开发一种磺胺耐药柔嫩艾美耳球虫检测方法十分必要。本试验建立一种使用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)来准确区分柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶(dihydropteroate synthase,DHPS)基因中的点突变(A1129G)的方法。对LAMP反应进行优化,发现在68℃,60 min时,反应的灵敏度和特异性均达到最佳。此时,该方法的最低检测限40 fg,并对5种病原体显示出特异性。在检测的所有46个现场样品中,有43个为阳性结果。 展开更多
关键词 鸡球虫病 耐药性 环介导等温核酸扩增技术 单核苷酸多态性
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多彩的米酒
5
作者 林雨儿 罗莉妍 《发明与创新（高中生）》 2015年第1期26-27,共2页
众所周知，米酒都是用糯米酿制的，其他种类的米能否酿成米酒呢？带着这个问题，我们搜寻到制作米酒的方法，并尝试用不同的米酿制出不同的米酒。拟定关于米酒的四个问题做成调查表，分给一百名同学调查。根据结果及小组讨论，我们决定... 众所周知，米酒都是用糯米酿制的，其他种类的米能否酿成米酒呢？带着这个问题，我们搜寻到制作米酒的方法，并尝试用不同的米酿制出不同的米酒。拟定关于米酒的四个问题做成调查表，分给一百名同学调查。根据结果及小组讨论，我们决定将实验变量设为糯米、黄米、黑米、白米和红米，并在超市和菜市场采集到实验所需材料，制定了米酒感官评定方法。 展开更多
关键词 米酒 小组讨论 调查表 菜市场 实验 超市
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