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响应面法优化酶辅助提取鬼针草总黄酮工艺 被引量：6
1
作者 杨秀东 白子凡 +3 位作者 陈鑫 韩佳 缪秉陶 周鸿立 《北方园艺》 CAS 北大核心 2020年第11期104-111,共8页
以鬼针草为试材,采用响应面法考察了酶种类、酶用量、酶解时间、乙醇浓度、酶解温度及酶解pH等因素对鬼针草总黄酮类物质提取率的影响,并研究了鬼针草醇提物的体外抗氧化能力。结果表明:在考察的5种酶中,果胶酶为水解酶的提取效果最好,... 以鬼针草为试材,采用响应面法考察了酶种类、酶用量、酶解时间、乙醇浓度、酶解温度及酶解pH等因素对鬼针草总黄酮类物质提取率的影响,并研究了鬼针草醇提物的体外抗氧化能力。结果表明:在考察的5种酶中,果胶酶为水解酶的提取效果最好,果胶酶辅助提取鬼针草总黄酮的最佳提取条件为酶解时间2 h、乙醇浓度63%、酶解pH 4,预测值为2.07%。在该条件下测得鬼针草总黄酮的提取率为1.95%。鬼针草醇提物对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子清除率的IC50值分别为0.172 9、0.253 7、0.564 3 mg·mL-1。因此,果胶酶为水解酶辅助提取鬼针草总黄酮的工艺稳定可行,为鬼针草总黄酮作为天然抗氧化剂的开发与利用提供参考依据。 展开更多
关键词 鬼针草 总黄酮 酶辅助 提取工艺 响应面法
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鮟鱇鱼皮活性肽的分离纯化及其对HK-2细胞损伤保护的作用
2
作者 许珂 缪秉陶 +3 位作者 曹洪杰 任祥雨 李航婷 杨最素 《广东海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1-10,共10页
【目的】为探讨鮟鱇(Lophius litulon)鱼皮活性肽(Monkfish skin peptides,MSP)对棕榈酸(Palmitic acid,PA)诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤保护的作用。【方法】以新鲜鮟鱇鱼皮为材料,选取加酶量、提取时间、pH、温度和料... 【目的】为探讨鮟鱇(Lophius litulon)鱼皮活性肽(Monkfish skin peptides,MSP)对棕榈酸(Palmitic acid,PA)诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤保护的作用。【方法】以新鲜鮟鱇鱼皮为材料,选取加酶量、提取时间、pH、温度和料液比为因子,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除率为响应值,分别进行单因素实验和响应面实验,优化鮟鱇鱼皮肽的提取工艺;对得到的鮟鱇鱼皮肽经过超滤、葡聚糖凝胶过滤层析和全自动高压制备分离纯化得到MSP;利用液相二级质谱和多肽从头(de novo)测序技术对其进行结构分析,筛选抗氧化活性较强的肽段;通过构建PA诱导的HK-2细胞损伤模型,测定MSP对HK-2细胞中氧化应激指标、脂质代谢指标和炎症因子水平的影响。【结果】确定酸性蛋白酶与胃蛋白酶质量比2∶1的复配比例,加酶量3 800 U/g、pH 3、酶解时间4 h、温度50℃和料液比1 g∶10 mL为鮟鱇鱼皮活性肽的最佳酶解条件,此条件下制备的鮟鱇鱼皮肽对DPPH·的清除率为78.84%;经超滤,酶解多肽中<3 ku组分抗氧化活性最强,收集该组分进行凝胶色谱分离后,得到F1、F2和F3共3个峰,其中F1组分DPPH·清除率最高。F1组分经高效液相色谱法(HPLC)分离纯化后得到6个吸收峰,其中H2组分吸收峰强度最高,经氨基酸序列鉴定,从中筛选出3种寡肽,分别为Phe-Glu-Ala-Thr-Ser-Gln-Glu-Leu(FEATSQEL,FL-8)、Leu-Val-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu(LVSCSSL,LL-7)和Pro-Leu-Glu-Asn-Tyr(PLENY,PY-5)。3条多肽在HK-2细胞脂质损伤模型中的修复作用各不相同:FL-8和PY-5能提高HK-2细胞模型的抗氧化能力,使细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著升高,降低细胞中活性氧的荧光强度,并显著降低丙二醛(MDA)水平,而LL-7能降低GSH-Px活性与T-AOC能力,能显著降低MDA的含量;在调节细胞的脂质代谢方面,FL-8与PY-5分别在不同程度上降低总胆固醇、甘油三酯 展开更多
关键词 鮟鱇鱼皮 活性肽 分离纯化 HK-2细胞 保护
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[鱼安][鱼康]鱼皮酶溶胶原蛋白肽对小鼠非酒精性脂肪肝的影响及作用机制 被引量：2
3
作者 曹洪杰 张文 +4 位作者 缪秉陶 任祥雨 叶捷娜 唐云平 杨最素 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第3期72-84,共13页
为探究[鱼安][鱼康]鱼皮酶溶胶原蛋白肽(pepsin-solubilized collagen peptides from Lophius litulo skin, PSCP)对高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝的影响及其机制,48只C57BL/6小鼠喂食高脂饲料4周诱导非酒精性脂肪肝模型,采用二甲双... 为探究[鱼安][鱼康]鱼皮酶溶胶原蛋白肽(pepsin-solubilized collagen peptides from Lophius litulo skin, PSCP)对高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝的影响及其机制,48只C57BL/6小鼠喂食高脂饲料4周诱导非酒精性脂肪肝模型,采用二甲双胍,低、中、高剂量PSCP处理模型小鼠6周,分别测定小鼠血清生理生化指标、肝脏氧化应激水平、肝脏组织病理学变化和蛋白的表达水平。实验结果表明:与模型组相比,二甲双胍和高剂量PSCP显著降低了小鼠血清中总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein, LDL-C)水平及谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)和谷丙转氨酶(alanime aminotransferase, ALT)活力,显著提高了高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;二甲双胍及中、高剂量PSCP显著升高了小鼠肝脏中谷胱甘肽(glutathione, GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)含量,显著降低肝脏丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平。苏木精-伊红染色和透射电镜结果显示,二甲双胍组和PSCP组小鼠肝脏结构明显好转。蛋白免疫印迹结果显示,与正常组相比,模型组小鼠肝脏中AMPKα、p-AMPKα和IκBα的蛋白表达量显著降低,SREBP-1和p65、p50、IKKα的蛋白表达量显著升高;而给予二甲双胍和PSCP后AMPKα、p-AMPKα和IκBα的蛋白表达量增加,SREBP-1和p65、p50、IKKα的蛋白表达量降低。研究结果表明,PSCP可显著改善非酒精性脂肪肝小鼠的生化指标,恢复肝组织结构,其改善机制可能与AMPK/NF-κB信号通路转导相关。 展开更多
关键词 [鱼安][鱼康]鱼皮胶原蛋白肽 非酒精性脂肪肝 血脂 AMPK/NF-κB通路 炎症
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海洋藻类提取物的护肝功效研究进展 被引量：1
4
作者 叶捷娜 徐宝贵 +3 位作者 缪秉陶 王斌 余方苗 杨最素 《浙江海洋大学学报（自然科学版）》 CAS 2021年第5期449-453,468,共6页
海藻是海洋植物中数量和种类最多的一类,经现代海洋生物技术从海藻中提取的主要活性物质有多糖、蛋白质及其水解物、多酚、光合色素等,具有多种生物活性,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗肥胖、抗糖尿病、降血脂、护肝护肾等作用。肝是体内... 海藻是海洋植物中数量和种类最多的一类,经现代海洋生物技术从海藻中提取的主要活性物质有多糖、蛋白质及其水解物、多酚、光合色素等,具有多种生物活性,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗肥胖、抗糖尿病、降血脂、护肝护肾等作用。肝是体内重要的代谢器官,过度饮酒、肥胖、炎症、药物等多种原因均导致肝病的发生率不断升高,从而影响肝脏的代谢机能。本文综述近年来海洋藻类提取物的护肝功效研究进展,并对海洋藻类护肝功能食品的研发进行了展望,旨在为开发海洋藻类护肝食品提供理论依据。 展开更多
关键词 海洋藻类 提取物 生物活性 肝损伤 护肝
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岩藻黄素对高脂饮食诱导的小鼠肾损伤的修复作用
5
作者 缪秉陶 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期162-163,共2页
高脂血症引起的脂质代谢紊乱是慢性肾损伤的危险因素之一。选择岩藻黄素作为研究对象,探讨岩藻黄素对高脂饮食诱导的肾功能损伤的保护机制。将48只雄性C57BL/6J小鼠分为4组。对照组喂养标准饲料,其余3组给予高脂饮食8周诱发高血脂。造... 高脂血症引起的脂质代谢紊乱是慢性肾损伤的危险因素之一。选择岩藻黄素作为研究对象,探讨岩藻黄素对高脂饮食诱导的肾功能损伤的保护机制。将48只雄性C57BL/6J小鼠分为4组。对照组喂养标准饲料,其余3组给予高脂饮食8周诱发高血脂。造模成功后给予岩藻黄素治疗,剂量分别为每天20mg/kg或40mg/kg;6周后,测定小鼠血清生化指标、肾功能指标、抗氧化酶活性和炎症因子水平,分析肾脏组织形态病理变化。 展开更多
关键词 脂质代谢紊乱 肾功能损伤 C57BL/6J小鼠 肾功能指标 肾脏组织 危险因素 高脂血症 高脂饮食
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岩藻黄素对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的改善作用
6
作者 叶捷娜 徐宝贵 +1 位作者 缪秉陶 杨最素 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期234-234,共1页
岩藻黄素是海藻的天然提取物,已有研究表明它具有较强的抗氧化活性及修复脂肪肝等生物活性。为探讨岩藻黄素对小鼠肝纤维化的改善作用,本实验采用持续4周腹腔注射四氯化碳,建立小鼠肝纤维化模型。将小鼠随机分为正常组、四氯化碳组(模型... 岩藻黄素是海藻的天然提取物,已有研究表明它具有较强的抗氧化活性及修复脂肪肝等生物活性。为探讨岩藻黄素对小鼠肝纤维化的改善作用,本实验采用持续4周腹腔注射四氯化碳,建立小鼠肝纤维化模型。将小鼠随机分为正常组、四氯化碳组(模型组)、四氯化碳+岩藻黄素组(50、100mg·kg^(-1)·d^(-1))、阳性对照组(秋水仙碱组,0.1mg·kg^(-1)·d^(-1))。 展开更多
关键词 四氯化碳 天然提取物 纤维化 肝纤维化模型 秋水仙碱组 脂肪肝 岩藻黄素 生物活性
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