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猪Delta冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒多重PCR检测方法的建立和应用 被引量：11
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作者 李莎莎 纪立凯 +2 位作者 王中华 陈冈 严亚贤 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第9期74-79,共6页
旨在建立快速准确检测与猪腹泻相关的猪Delta冠状病毒(PDCoV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PRoV)多重PCR检测方法。针对PDCoV、PEDV、TGEV、PRoV的基因组序列设计了4对特异性引物,分别扩增PDCoV N基... 旨在建立快速准确检测与猪腹泻相关的猪Delta冠状病毒(PDCoV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PRoV)多重PCR检测方法。针对PDCoV、PEDV、TGEV、PRoV的基因组序列设计了4对特异性引物,分别扩增PDCoV N基因(447 bp)、PEDV M基因(204 bp)、TGEV M基因(612 bp)、PRoV VP6基因(329 bp),经过对反应条件的优化,成功建立了能同时特异性检测PDCoV、PEDV、TGEV、PRoV的多重RT-PCR,且特异性好。应用该检测方法对上海及周边地区养殖场临床猪腹泻病料进行检测,结果检出PEDV阳性样品16份,其中PEDV和TGEV混合感染1份,PDCoV和PRoV均未检出,与单一RT-PCR检测结果完全吻合。该快速检测方法的成功建立,将有助于提高对PDCoV、PEDV、TGEV、PRoV的病原学调查和疾病监测,为生态养殖提供技术储备。 展开更多
关键词 猪Delta冠状病毒(PDCoV) 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) 猪轮状病毒(PRoV) 多重PCR
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猪流行性腹泻病毒上海株PEDV/CHSH/2019的分离鉴定及遗传分析 被引量：2
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作者 王娜 纪立凯 +1 位作者 王建 严亚贤 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期46-53,共8页
为了解2019年上海地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行毒株的基因特征及其致病性,本研究将该地区猪的PEDV阳性样品接种Vero E6细胞连续盲传,成功分离了PEDV/CHSH/2019毒株。基于RT-PCR及第二代测序技术完成了该毒株的全基因组测序,利用GenB... 为了解2019年上海地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行毒株的基因特征及其致病性,本研究将该地区猪的PEDV阳性样品接种Vero E6细胞连续盲传,成功分离了PEDV/CHSH/2019毒株。基于RT-PCR及第二代测序技术完成了该毒株的全基因组测序,利用GenBank中公布的PEDV毒株序列对其进行全基因序列同源性比对及遗传进化树分析。结果显示:PEDV/CHSH/2019与我国近年来流行毒株序列一致性为97.71%~99.96%,明显高于LZC、CV777、DR13、SM98、SD-M等早期经典毒株,属于重组毒株G2-b亚群;基于S蛋白区域的变异分析发现,与经典CV777毒株相比,第58~61、139位发生了氨基酸的插入,第161和162位发生了氨基酸的缺失,而与近年来强毒株S蛋白的氨基酸序列较为一致。本研究结果将为掌握上海地区PEDV最新流行毒株的基因组特性、进化趋势和完善疫苗防控策略提供理论依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 全基因组测序 遗传分析
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猪δ冠状病毒感染及其对宿主先天免疫功能的影响 被引量：3
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作者 纪立凯 李莎莎 严亚贤 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期431-440,共10页
猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)是目前新发现的唯一一种感染哺乳动物的δ冠状病毒。PDCoV主要感染猪的小肠,特别是空肠和回肠,造成小肠绒毛上皮细胞萎缩,引起严重的萎缩性肠炎,临床症状主要表现为新生仔猪水样腹泻、呕... 猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)是目前新发现的唯一一种感染哺乳动物的δ冠状病毒。PDCoV主要感染猪的小肠,特别是空肠和回肠,造成小肠绒毛上皮细胞萎缩,引起严重的萎缩性肠炎,临床症状主要表现为新生仔猪水样腹泻、呕吐和脱水死亡,给养猪业造成很大的经济损失。2014年以来全球暴发的仔猪腹泻中,PDCoV单一感染检出率占有一定的比例,还与其他猪冠状病毒存在较高比例的共感染现象。随着PDCoV毒株的基因组测序完成和病毒的分离成功,以及病毒与宿主互作研究的推进,对该病毒有了更多的认知。本文根据现有的文献报道,结合本课题组的研究进展,对猪δ冠状病毒的流行、基因组结构的遗传多样性、病毒感染受体和对宿主先天免疫应答调控机制的研究进展进行了综述,以帮助相关人员对PDCoV有全面和深入的了解。 展开更多
关键词 猪δ 冠状病毒 遗传多样性 受体 先天免疫
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卓越医师培养之细胞与分子生物学整合课程“三全育人”路径探索
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作者 纪立凯 邵根宝 +2 位作者 杜凤移 金洁 龚爱华 《中国科技经济新闻数据库 教育》 2022年第7期36-38,共3页
培育具有扎实理论基础和全方位高素质的医学大学生,既是健全完善新时代医学人才培养方案的要求,也是培育新时代卓越医师的目标。医学细胞与分子生物学是医学基础理论课程的重要组成,是临床实践的基石,更是医学生理论指导实践培养创新能... 培育具有扎实理论基础和全方位高素质的医学大学生,既是健全完善新时代医学人才培养方案的要求,也是培育新时代卓越医师的目标。医学细胞与分子生物学是医学基础理论课程的重要组成,是临床实践的基石,更是医学生理论指导实践培养创新能力的源泉。在该课程教学过程中融入“三全”育人理念,改进授课方式方法,形成“社区流行病调查(预防)-小组研讨学习(疾病)-健康宣讲(预防+康养)”大PBL+大混合教学模式,为发挥学生学习主观能动性提供授课实践经验。 展开更多
关键词 三全育人 医学细胞与分子生物学 整合课程 PBL混合教学模式
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