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奶牛早孕因子重组蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备 被引量：4
1
作者 刘云 贾斌 +6 位作者 石峰 李鑫 李洪涛 张永生 宁梦影 纪俊明 秦炳燕 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期877-882,共6页
本研究旨在表达、纯化奶牛早孕因子重组蛋白及制备多克隆抗体。本试验构建奶牛早孕因子重组蛋白原核表达载体pET32a-EPF,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的早孕因子重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并用W... 本研究旨在表达、纯化奶牛早孕因子重组蛋白及制备多克隆抗体。本试验构建奶牛早孕因子重组蛋白原核表达载体pET32a-EPF,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的早孕因子重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并用Western blotting和ELISA对重组蛋白及抗体进行检测。结果显示,成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,重组蛋白分子质量约37ku,表达量约占菌体总蛋白的48.6%,纯化后目的蛋白纯度可达93%,重组蛋白可与所制备的多克隆抗体结合,ELISA测定的抗体效价为1∶12 800。结果表明,本研究成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,为研究奶牛早孕诊断奠定基础。 展开更多
关键词 早孕因子 原核表达 SDS-PAGE WESTERN BLOTTING ELISA
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复方恩诺沙星纳米乳的制备及体外透皮性能考察 被引量：4
2
作者 王波臻 欧阳五庆 +4 位作者 纪俊明 贾斌 高娴 郑寅 刘凯 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第3期77-83,共7页
本研究研制出一种新型复方恩诺沙星(ENR-CL-NE)O/W型纳米乳制剂。通过伪三元相图法、联合药敏试验筛选出ENR-CL-NE配方。其中恩诺沙星(ENR)、头孢氨苄(CL)的含量分别为0.94 wt%,1.88 wt%;通过透射电子显微镜和粒度分析仪观察,发现ENR-CL... 本研究研制出一种新型复方恩诺沙星(ENR-CL-NE)O/W型纳米乳制剂。通过伪三元相图法、联合药敏试验筛选出ENR-CL-NE配方。其中恩诺沙星(ENR)、头孢氨苄(CL)的含量分别为0.94 wt%,1.88 wt%;通过透射电子显微镜和粒度分析仪观察,发现ENR-CL-NE粒径分布均匀,平均为14.50 nm,zeta电位为-15.3 m V;通过HPLC建立ENR-CL-NE中ENR、CL含量测定的专属性方法;经体外透皮试验发现ENRCL-NE的透皮性能极显著优于原料药物混悬液组(P<0.01)。综上表明,以O/W型纳米乳为载体的复方恩诺沙星(ENR和CL),有助于药物经皮给药药物疗效的发挥。 展开更多
关键词 恩诺沙星 头孢氨苄 纳米乳 透皮试验
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盘羊及其杂交一代羊绒纤维细度的测定与形态学的显微观察 被引量：2
3
作者 张银国 张光俊 +2 位作者 张剑 纪俊明 李飞 《中国草食动物科学》 CAS 2013年第1期76-78,共3页
通过对盘羊、盘羊与巴什拜羊杂交一代羊及其回交羊、巴什拜羊、山羊的羊绒和新疆军垦型美利奴细毛羊毛纤维细度的测定和形态学的显微观察,结果显示:盘羊绒毛的纤维平均细度12.500μm<山羊绒细度15.595μm<盘羊杂交一代羊绒毛细度1... 通过对盘羊、盘羊与巴什拜羊杂交一代羊及其回交羊、巴什拜羊、山羊的羊绒和新疆军垦型美利奴细毛羊毛纤维细度的测定和形态学的显微观察,结果显示:盘羊绒毛的纤维平均细度12.500μm<山羊绒细度15.595μm<盘羊杂交一代羊绒毛细度15.825μm<新回交羊绒毛细度19.385μm<新疆军垦型美利奴细毛羊羊毛细度19.800μm<巴什拜羊绒毛细度23.319μm;盘羊及其杂交一代羊绒毛的鳞片排列结构和形状与山羊绒毛十分相似,与细毛羊的毛纤维有明显的区别,其中盘羊绒毛、盘羊杂交一代羊绒毛的纤维平均细度的标准差和变异系数明显小于山羊绒。 展开更多
关键词 盘羊及其杂交羊 巴什拜羊 山羊绒毛 美利奴细毛羊羊毛 绒毛细度
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高效siRNA的设计分析
4
作者 秦炳燕 张永生 +4 位作者 纪俊明 李超程 席继峰 王香祖 贾斌 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期109-113,294,共6页
RNA干扰(RNAi)介导的基因沉默已成为基因功能分析的高效工具,设计出高效的siRNA是RNA干扰(RNAi)成功的关键,但现有的siRNA设计规则存在许多不一致性,使得高效siRNA设计困难重重。为了对这些设计规则进行进一步的验证并探讨不同设计规则... RNA干扰(RNAi)介导的基因沉默已成为基因功能分析的高效工具,设计出高效的siRNA是RNA干扰(RNAi)成功的关键,但现有的siRNA设计规则存在许多不一致性,使得高效siRNA设计困难重重。为了对这些设计规则进行进一步的验证并探讨不同设计规则在高效siRNA设计中的价值,研究设计了9条靶向zfy基因(zfy-1、zfy-2、zfy-3、zfy-4、zfy-5、zfy-6、zfy-7、zfy-8、zfy-9)和4条靶向zfx基因(zfx-1、zfx-2、zfx-3、zfx-4)的siRNA并构建了重组载体,转染28~32日龄仔猪睾丸组织分离的猪生精细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测zfy和zfx基因mRNA的表达。结果表明:每个siRNA对靶基因的下调水平不同,zfy-9的沉默效率最高,为89%,zfy-1、zfy-2、zfy-3、zfx-1对靶基因的表达没有沉默作用。通过对13个siRNA序列特征进行分析表明,在siRNA设计中符合越多的碱基偏好性准则,沉默效率越好;但是不同的准则重要性不同,siRNA反义链中第10位的U和第13位的A/U对高效siRNA设计更有作用,应优先考虑;靶位点的选择对高效siRNA的设计也有重要作用。 展开更多
关键词 RNA干扰(RNAI) SIRNA设计 ZFY ZFX 实时荧光定量PCR
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