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杨桃根提取物DMDD对α-synuclein PFFs所致分化SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及机制研究
1
作者 粟璟曦 宋琼 +4 位作者 苏迎 周宇光 黄仁彬 王丽惠 邹春林 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第10期1433-1441,共9页
目的:探讨不同浓度杨桃根提取物DMDD对α-突触核蛋白预制原纤维(α-Syn PFFs)所致分化SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及作用机制。方法:使用不同浓度DMDD作用于视黄酸分化的SH-SY5Y细胞,通过MTS测定细胞活力,确定DMDD作用于分化SH-SY5Y细胞... 目的:探讨不同浓度杨桃根提取物DMDD对α-突触核蛋白预制原纤维(α-Syn PFFs)所致分化SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及作用机制。方法:使用不同浓度DMDD作用于视黄酸分化的SH-SY5Y细胞,通过MTS测定细胞活力,确定DMDD作用于分化SH-SY5Y细胞的低、中、高浓度;使用不同浓度的DMDD处理5μg/mLα-Syn PFFs诱导的细胞损伤模型,采用Hoechst 33342染色和一氧化氮试剂盒分别检测细胞核损伤细胞数与细胞内一氧化氮产生量;采用蛋白质印迹法检测细胞内酪氨酸羟化酶(TH)、多聚腺苷酸二磷酸(PAR)及多聚腺苷酸二磷酸核糖酶-1(PARP-1)蛋白表达水平;采用免疫荧光技术检测细胞内129位丝氨酸磷酸化α-突触核蛋白(pS129-α-Syn)、磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)阳性细胞数及凋亡诱导因子(AIF)核易位细胞数。结果:Hoechst 33342染色结果显示,与α-Syn PFFs模型组比较,各浓度DMDD处理组出现细胞核损伤的细胞数明显减少(P<0.001);一氧化氮检测结果显示,与α-Syn PFFs模型组比较,各浓度DMDD处理组细胞一氧化氮生成量显著降低(P<0.01或P<0.001);蛋白质印迹法结果显示,与α-Syn PFFs模型组比较,高浓度DMDD处理组细胞TH蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而中、高浓度DMDD处理组细胞PAR蛋白表达水平明显降低(P<0.05),高浓度DMDD处理组细胞PARP-1、Cleaved PARP-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);免疫荧光结果显示,与α-Syn PFFs模型组比较,中、高浓度DMDD处理组pS129-α-Syn阳性细胞数明显减少(P<0.05或P<0.01),各浓度DMDD处理组γH2AX阳性细胞数明显减少(P<0.01或P<0.001),AIF核易位细胞数也明显减少(P<0.01或P<0.001)。结论:DMDD可能通过抑制PARP-1/AIF通路介导的PARP-1依赖性死亡途径减轻α-Syn PFFs所致分化SH-SY5Y细胞损伤。 展开更多
关键词 杨桃根 DMDD α-突触核蛋白预制原纤维 PARP-1依赖性细胞死亡 SH-SY5Y
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食蟹猴纹状体内注射α-突触核蛋白预制原纤维对嗅球病理改变的影响 被引量：1
2
作者 丁雨潇 粟璟曦 +5 位作者 宋琼 王丽惠 吴日宝 况昕宇 苏迎 邹春林 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第6期586-590,共5页
目的探讨α-突触核蛋白预制原纤维(α-Syn PFF)纹状体注射后能否生成病理性α-突触核蛋白(α-Syn),并从纹状体传播至嗅球,从而引起嗅球中神经元损伤。方法3只健康雌性食蟹猴双侧纹状体注射α-Syn PFF作为实验组,以脑立体定向注射手术,将... 目的探讨α-突触核蛋白预制原纤维(α-Syn PFF)纹状体注射后能否生成病理性α-突触核蛋白(α-Syn),并从纹状体传播至嗅球,从而引起嗅球中神经元损伤。方法3只健康雌性食蟹猴双侧纹状体注射α-Syn PFF作为实验组,以脑立体定向注射手术,将300μgα-Syn PFF(7 g/L)注射到双侧纹状体的6个位点,即每侧纹状体壳核头部注射60μg,体部注射60μg,尾部注射30μg。另2只健康雌性食蟹猴相同部位注射同等剂量磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照组。注射2年后,实验猴行安乐死,取出嗅球经固定和切片,然后经尼氏染色检测组织病理改变,免疫组织化学染色检测磷酸化α-Syn(pS129)、酪氨酸羟化酶(TH)、双皮质素(DCX)的表达情况。结果实验组与对照组比较,嗅球中存在pS129阳性聚集体;实验组TH和DCX阳性神经元数量较对照组均显著减少[TH:(27.00±11.22)个vs.(65.80±36.54)个;DCX:(67.60±17.23)个vs.(88.30±19.89)个]。结论食蟹猴纹状体注射α-Syn PFF产生的病理性α-Syn可从纹状体传播至嗅球造成嗅球神经元损伤,诱导嗅球中多巴胺能神经元丢失,并抑制新生神经元生成。 展开更多
关键词 帕金森病 Α突触核蛋白 嗅球 成束猴 免疫组织化学
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