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病毒性脓毒症的发病机制及其对严重急性呼吸综合征冠状病毒2脓毒症治疗的指导意义 被引量：7
1
作者 孙剑会 刘迪 +12 位作者 张华才 米俊伟 陆红祥 张安强 甘乐彬 王强 孙家莉 王俊 邓进 李阳 张连阳 蒋建新 曾灵 《中华危重症医学杂志（电子版）》 CAS CSCD 2020年第1期8-14,共7页
新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)自2019年12月起在中国湖北省武汉市出现并开始传播,其病原体为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)。截至2020年2月17日,... 新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)自2019年12月起在中国湖北省武汉市出现并开始传播,其病原体为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)。截至2020年2月17日,确诊病例已超过7万,仅湖北就有近6万,且尚未看到拐点。世界卫生组织已经宣布COVID-19为全球关注的公共卫生紧急事件。COVID-19患者的主要临床症状是发热、乏力、干咳等,而重症患者多在一周后就出现呼吸困难,并快速进展为急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)、脓毒性休克、多器官功能障碍,危重症患者多死于脓毒性休克和多器官功能障碍。因此,本文将回顾病毒性脓毒症的流行病学、免疫学发病机制和潜在的治疗方法,以期提高对SARS-CoV-2脓毒症发病机制的认识,并为SARS-CoV-2脓毒症和脓毒性休克的治疗提供新思路和策略。 展开更多
关键词 呼吸困难 脓毒性休克 公共卫生 病毒性 临床症状 脓毒症 严重急性呼吸综合征冠状病毒 紧急事件
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公路工程施工中的试验检测方法及要点研究 被引量：6
2
作者 米俊伟 《交通世界》 2022年第27期102-105,共4页
为解决公路工程建设中的试验检测问题,对路面平整度、弯沉值和压实度对试验检测具体方法及策略进行分析,并提出试验检测计划制定及室内检测频率确定的建议,旨在保证公路施工试验检测结果的准确性。
关键词 公路工程 试验检测 路面平整度 弯沉值
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白细胞介素6对人脐静脉血管内皮细胞-间质细胞转化的作用 被引量：3
3
作者 郭玲 何静 +9 位作者 崔莉 米俊伟 张蜀 孙剑会 杜娟 文大林 张华才 蒋建新 王建民 黄宏 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期420-428,共9页
目的观察白细胞介素6(IL-6)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表型和功能的影响,探索IL-6在内皮-间充质转化(EndMT)过程中的作用。方法采用实验研究方法。取产妇行分娩手术后弃用的新鲜正常胎儿脐带,分离培养原代细胞的第2天在倒置相差显微镜... 目的观察白细胞介素6(IL-6)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表型和功能的影响,探索IL-6在内皮-间充质转化(EndMT)过程中的作用。方法采用实验研究方法。取产妇行分娩手术后弃用的新鲜正常胎儿脐带,分离培养原代细胞的第2天在倒置相差显微镜下观察细胞形态;免疫荧光法鉴定第4代细胞是否为HUVEC后,取2批第3~5代HUVEC,用于后续实验。将第1批细胞按随机数字表法(下同)分为6组:空白对照组、5 ng/mL IL-6组、10 ng/mL IL-6组、25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组、100 ng/mL IL-6组,将第2批细胞分为4组:空白对照组、10 ng/mL IL-6组、25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组;空白对照组仅加入完全培养液,其余各组细胞还加入相应终质量浓度的IL-6。第1批细胞,分组培养后72 h,倒置相差显微镜下观察6组HUVEC形态;免疫荧光法检测6组HUVEC凝血因子Ⅷ和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的阳性表达,并计算双阳性细胞数占凝血因子Ⅷ阳性细胞数的比值(以下简称双阳性细胞数的比值),样本数为6;实时荧光定量反转录PCR法检测6组HUVEC血管内皮钙黏蛋白和α-SMA蛋白的mRNA表达量,样本数为3。第2批细胞,分组培养后72 h,蛋白质印迹法检测4组HUVEC血管内皮钙黏蛋白、α-SMA和Ⅰ型胶原的蛋白表达量,样本数为3。对数据行单因素方差分析、Bonferroni校正。结果原代分离培养的第2天细胞呈短梭形或多边形,免疫荧光法鉴定第4代细胞为HUVEC。第1批细胞,分组培养后72 h,6组细胞随IL-6浓度的逐渐增加,其形态向长梭形变化,细胞间连接减少或消失、间隙变大。分组培养后72 h,与空白对照组双阳性细胞数的比值相比,25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组、100 ng/mL IL-6组显著增高(P<0.01);与5 ng/mL IL-6组双阳性细胞数的比值相比,25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组和100 ng/mL IL-6组显著升高(P<0.01);与10 ng/mL IL-6组双阳性细胞数的比值相比,50 ng/mL IL-6组和100 ng/mL IL-6组显著升 展开更多
关键词 白细胞介素6 内皮细胞 纤维化 内皮-间质转化
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低物质的量浓度过氧化氢预处理对小鼠骨髓间充质干细胞氧化应激性凋亡的作用及其机制
4
作者 张蜀 郭玲 +8 位作者 米俊伟 文大林 孙剑会 张华才 杜娟 崔莉 蒋建新 王建民 黄宏 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期256-265,共10页
目的探讨低物质的量浓度过氧化氢预处理对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)氧化应激性凋亡的作用及其机制。方法采用实验研究方法。通过全骨髓培养法从2只2周龄雄性BALB/c小鼠中分离培养BMSC,鉴定后取第3~7代对数生长期细胞进行实验。将细胞... 目的探讨低物质的量浓度过氧化氢预处理对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)氧化应激性凋亡的作用及其机制。方法采用实验研究方法。通过全骨髓培养法从2只2周龄雄性BALB/c小鼠中分离培养BMSC,鉴定后取第3~7代对数生长期细胞进行实验。将细胞按随机数字表法(分组方法下同)分为用相应终物质的量浓度过氧化氢处理的0μmol/L过氧化氢组(即不加入过氧化氢,下同)、25μmol/L过氧化氢组、50μmol/L过氧化氢组、100μmol/L过氧化氢组、150μmol/L过氧化氢组、200μmol/L过氧化氢组、250μmol/L过氧化氢组、300μmol/L过氧化氢组,培养24 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率(样本数为4)。将细胞分为用相应终物质的量浓度过氧化氢处理的0μmol/L过氧化氢组、25µmol/L过氧化氢组、50µmol/L过氧化氢组、100µmol/L过氧化氢组,培养24 h后,用蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达,计算Bcl-2/Bax比值(样本数为3)。将细胞分为用相应终物质的量浓度过氧化氢处理的0μmol/L过氧化氢组、25μmol/L过氧化氢组、50μmol/L过氧化氢组、100μmol/L过氧化氢组、200μmol/L过氧化氢组、300μmol/L过氧化氢组,培养24 h后,用蛋白质印迹法检测糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)及磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)的蛋白表达(样本数为3)。将细胞分为用相应终物质的量浓度过氧化氢处理的0μmol/L过氧化氢组、50μmol/L过氧化氢组、300μmol/L过氧化氢组,以及预先加入50μmol/L过氧化氢刺激12 h再加入300μmol/L过氧化氢的过氧化氢预处理组,培养24 h后,用倒置荧光显微镜(非荧光条件)和免疫荧光法观察细胞形态和生长情况,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、剪切型caspase-3、剪切型caspase-9、GSK-3β及p-GSK-3β蛋白表达,计算Bcl-2/Bax比值,样本数均为3。对数据进行单因素方差� 展开更多
关键词 干细胞 过氧化氢 氧化性应激 细胞凋亡 糖原合成酶激酶类 骨髓间充质干细胞
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纳米金促进神经营养因子-3透皮实验研究
5
作者 姚元江 吴永慧 +7 位作者 高继宁 王琳杰 关东伟 米俊伟 陈冰 肖志峰 赵燕南 戴建武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期97-102,共6页
目的探讨纳米金颗粒(gold nanoparticles,AuNP)运载神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT3)透皮的效果及其对皮下神经的作用,以开发具有透皮作用的纳米金载药体系。方法通过共价偶联方式,将His标记的NT3与纳米金共价偶联,应用于动物皮肤组... 目的探讨纳米金颗粒(gold nanoparticles,AuNP)运载神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT3)透皮的效果及其对皮下神经的作用,以开发具有透皮作用的纳米金载药体系。方法通过共价偶联方式,将His标记的NT3与纳米金共价偶联,应用于动物皮肤组织。实验分为空白对照组、金纳米颗粒与牛血清蛋白结合(AuNP-CONH-BSA)组、金纳米颗粒与NT3结合(AuNP-CONH-NT3)组和NT3注射组。利用抗His抗体进行免疫组化分析其透皮效果,同时利用免疫组化对神经丝蛋白(neuropeptide,NF200)阳性细胞进行检测,分析载药体系对皮下神经的作用。结果透皮24 h后免疫组化分析结果显示,在实验组AuNP-CONH-NT3组和NT3注射组中均检测到了NT3,而空白对照组和AuNP-CONH-BSA组中则未检测到;在透皮1个月和3个月免疫组化分析结果显示,AuNP-CONH-NT3组NF200阳性细胞数量所占百分比明显高于空白对照组和AuNP-CONH-BSA组(P<0.01),而与NT3注射组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论构建的AuNP-CONH-NT3具有很好的透皮效果,可以促进神经再生。 展开更多
关键词 载药 金纳米粒子 神经营养因子-3 透皮
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基于Ⅱ型肺泡上皮细胞RNAscope多通道荧光检测技术在类器官研究中的应用
6
作者 孙剑会 刘迪 +4 位作者 张华才 张安强 米俊伟 蒋建新 曾灵 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2021年第10期1976-1982,共7页
该文探讨了RNAscope多通道荧光检测技术在类器官中的应用并建立了相应的实验体系,旨在为类器官的研究提供更多的技术与方法。该研究采用磁珠分选方法从大鼠肺组织中分选Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcells,AEC2s),并采... 该文探讨了RNAscope多通道荧光检测技术在类器官中的应用并建立了相应的实验体系,旨在为类器官的研究提供更多的技术与方法。该研究采用磁珠分选方法从大鼠肺组织中分选Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcells,AEC2s),并采用免疫荧光鉴定AEC2s细胞的纯度,对分离的AEC2s细胞进行肺类器官培养,培养第15天时采用倒置显微镜观察肺类器官的生长规律,HE染色观察肺类器官的形态结构特征,RNAscope多通道荧光检测技术检测肺类器官原位单细胞中Sftpc、Aqp5、krt5、ki67等四个RNA的基因表达情况。结果表明,RNAscope多通道荧光检测技术在类器官应用中具有可行性,该技术能实现类器官单细胞水平同时分析多个RNA的表达水平,在获得单细胞中拷贝RNA表达数据的同时提供完整的组织形态学信息,提高对疾病与标志物之间复杂的生物学相关性认识,因此,RNAscope多通道荧光检测技术为类器官在单细胞水平的研究开辟了新的途径。 展开更多
关键词 类器官 RNAscope多通道荧光检测技术 AEC2s细胞
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