目的探讨胆管癌组织中SKA3蛋白的表达和临床意义,以及体外干扰SKA3表达对胆管癌SSP-25细胞增殖、侵袭和迁移的影响和可能机制。方法回顾性收集2015年1月至2020年12月首都医科大学附属北京友谊医院172例远端胆管癌患者临床病理资料及癌...目的探讨胆管癌组织中SKA3蛋白的表达和临床意义,以及体外干扰SKA3表达对胆管癌SSP-25细胞增殖、侵袭和迁移的影响和可能机制。方法回顾性收集2015年1月至2020年12月首都医科大学附属北京友谊医院172例远端胆管癌患者临床病理资料及癌组织、癌旁组织标本。采用免疫组织化学法检测癌组织和癌旁组织中SKA3蛋白的表达水平。向胆管癌SSP-25细胞转染SKA3小干扰RNA(siRNA)(si-SKA3组),以未经处理的SSP-25细胞为对照组。采用细胞免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测转染效果;采用CCK-8法和细胞集落形成实验观察细胞增殖变化;采用细胞划痕实验检测细胞侵袭能力;采用蛋白质印迹法检测PI3K-AKT信号通路相关蛋白的表达情况。结果172例胆管癌患者中,男性116例,女性56例;年龄<60岁54例,≥60岁118例。胆管癌组织SKA3蛋白阳性率高于癌旁组织[78.49%(135/172)比13.95%(24/172)],差异有统计学意义(χ2=42.78,P<0.01);有神经侵犯[84.35%(124/147)比44.00%(11/25)]、淋巴结转移[88.78%(87/98)比64.86%(48/74)]患者癌组织SKA3蛋白阳性率均高于无神经侵犯、淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(均P<0.05),年龄、性别、TNM分期、肿瘤分化分层患者的癌组织SKA3蛋白阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05)。CCK-8法检测示,培养72 h si-SKA3组SSP-25细胞增殖能力(以450 nm处吸光度值表示)低于对照组(0.56±0.05比0.83±0.06),差异有统计学意义(t=3.06,P=0.006)。集落形成实验显示,培养2周后si-SKA3组SSP-25细胞集落形成数少于对照组。培养24 h,si-SKA3组和对照组SSP-25细胞划痕愈合率分别为(31±6)%、(72±5)%,差异有统计学意义(t=5.63,P=0.013)。蛋白质印迹法检测显示,PI3K-AKT信号通路中p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论胆管癌组织中SKA3蛋白高表达,与神经侵犯、淋巴结转移可能相关。干扰SKA3表达可抑制胆管癌S展开更多
文摘目的探讨胆管癌组织中SKA3蛋白的表达和临床意义,以及体外干扰SKA3表达对胆管癌SSP-25细胞增殖、侵袭和迁移的影响和可能机制。方法回顾性收集2015年1月至2020年12月首都医科大学附属北京友谊医院172例远端胆管癌患者临床病理资料及癌组织、癌旁组织标本。采用免疫组织化学法检测癌组织和癌旁组织中SKA3蛋白的表达水平。向胆管癌SSP-25细胞转染SKA3小干扰RNA(siRNA)(si-SKA3组),以未经处理的SSP-25细胞为对照组。采用细胞免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测转染效果;采用CCK-8法和细胞集落形成实验观察细胞增殖变化;采用细胞划痕实验检测细胞侵袭能力;采用蛋白质印迹法检测PI3K-AKT信号通路相关蛋白的表达情况。结果172例胆管癌患者中,男性116例,女性56例;年龄<60岁54例,≥60岁118例。胆管癌组织SKA3蛋白阳性率高于癌旁组织[78.49%(135/172)比13.95%(24/172)],差异有统计学意义(χ2=42.78,P<0.01);有神经侵犯[84.35%(124/147)比44.00%(11/25)]、淋巴结转移[88.78%(87/98)比64.86%(48/74)]患者癌组织SKA3蛋白阳性率均高于无神经侵犯、淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(均P<0.05),年龄、性别、TNM分期、肿瘤分化分层患者的癌组织SKA3蛋白阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05)。CCK-8法检测示,培养72 h si-SKA3组SSP-25细胞增殖能力(以450 nm处吸光度值表示)低于对照组(0.56±0.05比0.83±0.06),差异有统计学意义(t=3.06,P=0.006)。集落形成实验显示,培养2周后si-SKA3组SSP-25细胞集落形成数少于对照组。培养24 h,si-SKA3组和对照组SSP-25细胞划痕愈合率分别为(31±6)%、(72±5)%,差异有统计学意义(t=5.63,P=0.013)。蛋白质印迹法检测显示,PI3K-AKT信号通路中p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论胆管癌组织中SKA3蛋白高表达,与神经侵犯、淋巴结转移可能相关。干扰SKA3表达可抑制胆管癌S
