沉默信息调节因子3调节肾间质纤维化过程中的细胞凋亡和有氧糖酵解

1

作者 简永红 杨一菲 +4 位作者 杨雪雁 程玲莉 万雨涵 管茜 杨定平 《临床肾脏病杂志》 2024年第7期579-587,共9页

目的观察肾纤维化模型中沉默信息调节因子3(silent information regulator 3,Sirt3)的表达变化及有氧糖酵解水平变化,探讨Sirt3在肾间质纤维化中的作用及机制。方法野生型小鼠及Sirt3基因敲除小鼠分别构建单侧输尿管梗阻肾纤维化模型,... 目的观察肾纤维化模型中沉默信息调节因子3(silent information regulator 3,Sirt3)的表达变化及有氧糖酵解水平变化,探讨Sirt3在肾间质纤维化中的作用及机制。方法野生型小鼠及Sirt3基因敲除小鼠分别构建单侧输尿管梗阻肾纤维化模型,对侧肾脏为假手术对照组。HE染色及Masson染色观察肾脏病理变化,蛋白质印迹法检测Sirt3、纤维化相关标志性蛋白(纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白)、有氧糖酵解关键酶(己糖激酶2、M2型丙酮酸激酶)及凋亡相关蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的表达,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术检测肾小管上皮细胞凋亡;体外培养人肾小管上皮细胞,分为对照组和si-Sirt3组,转化生长因子β1处理细胞,蛋白质印迹法检测上述纤维化相关蛋白及有氧糖酵解关键酶的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡。结果在体内外纤维化反应中,肾小管上皮细胞凋亡和有氧糖酵解水平明显增加,Sirt3表达显著下调。而Sirt3基因敲除进一步加重了肾小管上皮细胞凋亡和异常的有氧糖酵解,促进了肾间质纤维化。结论Sirt3可能通过抑制肾小管上皮细胞有氧糖酵解减轻肾间质纤维化,在慢性肾脏病中发挥保护作用。 展开更多

关键词 肾间质纤维化 沉默信息调节因子3 有氧糖酵解 凋亡

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自噬减轻造影剂诱导足细胞氧化应激损伤 被引量：6

2

作者 汪雄攀 杨定平 +4 位作者 杨定位 贾汝汉 丁国华 朱吉莉 简永红 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期684-688,共5页

目的 研究自噬在造影剂诱导足细胞氧化应激损伤中的作用.方法 培养的小鼠永生化足细胞共分为6组：（1）正常对照（Con）组;（2）造影剂（CM）组;（3）雷帕霉素（Rap）组;（4）造影剂加雷帕霉素（CM＋Rap）组;（5）3-甲基腺嘌呤（3-MA）... 目的 研究自噬在造影剂诱导足细胞氧化应激损伤中的作用.方法 培养的小鼠永生化足细胞共分为6组：（1）正常对照（Con）组;（2）造影剂（CM）组;（3）雷帕霉素（Rap）组;（4）造影剂加雷帕霉素（CM＋Rap）组;（5）3-甲基腺嘌呤（3-MA）组;（6）造影剂加3-甲基腺嘌呤（CM＋3-MA）组,予以相应的刺激2h.观察自噬增强剂雷帕霉素与自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤对造影剂诱导的足细胞氧化应激及细胞活性的影响.Western印迹检测各组足细胞内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1及氧化应激相关蛋白Catalase、MnSOD的表达,丹酰戊二胺（MDC）染色检测足细胞内自噬体变化,采用氯甲基-2＇,7＇-二氯二氢荧光素二乙酯（CM-H2DCFDA）荧光染色检测足细胞内活性氧（ROS）水平,CCK8试剂盒检测细胞活性.结果 （1）造影剂抑制了足细胞内氧化应激相关蛋白Catalase、MnSOD的表达,促进了细胞内ROS的生成,导致足细胞活性下降（均P＜ 0.05）;（2）3-MA共处理足细胞后,细胞内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1的表达及自噬体生成均减少,氧化应激相关蛋白Catalase、MnSOD的表达进一步减少,ROS生成进一步增加,导致足细胞活性下降更加显著（均P＜ 0.05）;（3）雷帕霉素共处理足细胞后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1的表达及自噬体生成增加,氧化应激相关蛋白Catalase、MnSOD的表达增强,ROS生成减少,促进了足细胞活性恢复（均P＜0.05）.结论 自噬在造影剂诱导的足细胞氧化应激损伤起保护性作用,一定程度自噬上调可以减轻其氧化应激水平从而抑制足细胞损伤. 展开更多

关键词 自噬 造影剂 足细胞 氧化应激

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雷公藤多苷调控miR-496表达对高糖诱导的人肾足细胞泛素化通路的影响

3

作者 李正翔 何德娇 +6 位作者 简永红 陈意 管茜 张淼淼 李婵 张丹 凌娜 《解剖学研究》 CAS 2024年第3期200-207,共8页

目的探究雷公藤多苷调控miR-496表达对高糖诱导的人肾足细胞泛素化通路的影响。方法将人肾足细胞分为NC组、HG组、TWP-L组、TWP-M组、TWP-H组、miR-496组、miR-NC组、TWP-H+anti-miR-496组。CCK-8检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;... 目的探究雷公藤多苷调控miR-496表达对高糖诱导的人肾足细胞泛素化通路的影响。方法将人肾足细胞分为NC组、HG组、TWP-L组、TWP-M组、TWP-H组、miR-496组、miR-NC组、TWP-H+anti-miR-496组。CCK-8检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质印迹检测细胞中p53、COP1、caspase-3、nephrin、podocin蛋白表达;qRT-PCR检测细胞中miR-496表达。结果与NC组比较,HG组细胞存活率、细胞中miR-496表达(0.23±0.04)和COP1(0.43±0.05)、nephrin(0.24±0.03)、podocin(0.31±0.04)蛋白表达均明显降低,细胞凋亡率(23.94±2.46)、细胞中p53(1.26±0.15)、caspase-3(0.61±0.08)蛋白表达均明显增加(P<0.05);与HG组比较,TWP-L组、TWP-M组、TWP-H组细胞存活率、细胞中miR-496表达和COP1、neph-rin、podocin蛋白表达均明显增加,细胞凋亡率、细胞中p53、caspase-3蛋白表达均明显降低(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-496组细胞存活率、细胞中miR-496表达(0.87±0.10)和COP1(0.80±0.09)、nephrin(0.58±0.06)、podocin(0.75±0.08)蛋白表达明显增加,细胞凋亡率(10.61±1.17)、细胞中p53(0.32±0.04)、caspase-3(0.25±0.03)蛋白表达明显降低(P<0.05);与TWP-H组相比,TWP-H+ant-miR-496组细胞存活率、细胞中miR-496表达(0.18±0.02)和COP1(0.46±0.06)、nephrin(0.31±0.04)、podocin(0.34±0.04)蛋白表达明显降低,细胞凋亡率(20.36±2.18)、细胞中p53(1.19±0.13)、caspase-3(0.57±0.06)蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论雷公藤多苷可能通过促进miR-496表达,对高糖诱导的人足细胞泛素化蛋白酶通路的活化发挥促进作用,对足细胞的凋亡发挥抑制作用。 展开更多

关键词 雷公藤多苷 人肾足细胞 高糖诱导 miR-496 泛素化通路 凋亡

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自噬在造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用 被引量：4

4

作者 简永红 杨定平 +5 位作者 贾汝汉 丁国华 朱吉莉 颜奇 杨倩 汪雄攀 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期863-869,共7页

目的 观察造影剂对肾小管上皮细胞自噬及凋亡的影响,探讨自噬在造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用.方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）,以不同浓度（25、50、100、200 gI/L）造影剂碘普罗胺处理NRK-52E细胞1h或以50 gI/... 目的 观察造影剂对肾小管上皮细胞自噬及凋亡的影响,探讨自噬在造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用.方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）,以不同浓度（25、50、100、200 gI/L）造影剂碘普罗胺处理NRK-52E细胞1h或以50 gI/L碘普罗胺刺激NRK-52E细胞不同时间（0.5、1、3、6、12、24 h）,吖啶橙染色观察细胞内自噬体形成,Western印迹检测自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率.雷帕霉素（Rap,1μg/L）或3-甲基腺嘌呤（3-MA,2 mmol/L）与碘普罗胺（50 gI/L）共处理肾小管上皮细胞后,Western印迹法检测各组LC3及自噬相关蛋白Beclin-1的表达,绿色荧光蛋白标记的LC3（GFP-LC3）转染后荧光显微镜观察GFP-LC3的表达,Hoechst-33342染色观察细胞凋亡.结果 （1）随碘普罗胺刺激浓度增加肾小管上皮细胞自噬体表达先上升后下降.（2）随碘普罗胺刺激浓度及时间的增加肾小管上皮细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达先上升后下降（P＜0.05）.（3）碘普罗胺刺激后,肾小管上皮细胞的凋亡率呈浓度及时间依赖性增加（P＜0.05）.（4）Rap与碘普罗胺共处理肾小管上皮细胞后,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1及GFP-LC3表达上调,细胞凋亡减少（P＜0.05）;3-MA与碘普罗胺共处理肾小管上皮细胞后,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1及GFP-LC3表达下调,细胞凋亡增加（P＜0.05）.结论 造影剂可诱导肾小管上皮细胞凋亡和自噬,小剂量造影剂刺激下肾小管上皮细胞自噬和凋亡同时发生,但高峰早于凋亡.在刺激早期一定程度增强自噬可抑制细胞凋亡,反之抑制自噬后细胞凋亡增加. 展开更多

关键词 自噬 细胞凋亡 造影剂 肾小管上皮细胞

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脓肿切排联合抗生素治疗血液透析患者带隧道和涤纶套的透析导管隧道脓肿

5

作者 简永红 杨定平 《临床肾脏病杂志》 2023年第6期515-517,共3页

对于长期依赖血液透析的患者,血管通路就是生命线,动静脉内瘘是透析患者首选的血管通路,但随着透析患者生存时间的延长,血管通路逐渐耗竭,带隧道和涤纶套的透析导管成为长期血管通路很好的补充。随着应用的逐渐普遍,其相关的并发症也日... 对于长期依赖血液透析的患者,血管通路就是生命线,动静脉内瘘是透析患者首选的血管通路,但随着透析患者生存时间的延长,血管通路逐渐耗竭,带隧道和涤纶套的透析导管成为长期血管通路很好的补充。随着应用的逐渐普遍,其相关的并发症也日益增多。 展开更多

关键词 隧道脓肿 脓肿切排 带隧道和涤纶套的透析导管 血液透析

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前列腺素E1预防对比剂肾病的Meta分析 被引量：2

6

作者 简永红 杨定平 《临床肾脏病杂志》 2015年第9期525-529,共5页

目的：对比剂肾病（contrast-induced nephropathy,CIN）在临床中的发生率逐年增高,但目前关于 CIN 的防治仍未取得令人满意的效果,有文献报道采用前列腺素 E1（prostaglandin E1, PGE1）预防 CIN 有一定疗效,但缺乏循证医学依据。本文... 目的：对比剂肾病（contrast-induced nephropathy,CIN）在临床中的发生率逐年增高,但目前关于 CIN 的防治仍未取得令人满意的效果,有文献报道采用前列腺素 E1（prostaglandin E1, PGE1）预防 CIN 有一定疗效,但缺乏循证医学依据。本文拟对目前已发表的关于 PGE1预防 CIN 的随机对照试验进行 Meta 分析,评价 PGE1预防 CIN 的效果。方法检索 PubMed、EMBase、Med-line、Cochrane library、Clinical trials、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库、中国知网、临床试验注册网站等数据库,检索时间均为2000年1月至2015年5月。收集关于使用PGE1预防 CIN 的临床 RCT,采用 RevMan5.1软件进行 Meta 分析。结果按照检索要求初检出相关文献共33篇,按照纳入及排除标准筛选后最终有15篇 RCT 纳入分析,共2261例患者被纳入研究,其中 PGE1组共1208例,对照组共1053例,Meta 分析结果显示,以 PGE1为干预措施的 PGE1组 CIN 的发生率低于以安慰剂为干预措施的对照组,差异有统计学意义[OR=0.34,95% CI（0.26,0.45）,P 〈0.00001],剔除未常规行水化治疗的5项研究后,Meta 分析结果显示,在水化基础上应用PGE1与单纯水化相比,仍可明显降低造影患者 CIN 的发生率,差异有统计学意义[OR=0.36,95%CI（0.25,0.51）,P 〈0.00001]。结论PGE1能够降低造影患者 CIN 的发生率,在水化基础上联用PGE1较单纯水化预防 CIN 的效果更加显著。 展开更多

关键词 前列腺素E1 对比剂肾病 水化 META分析

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自噬在急性肾损伤中的作用研究进展 被引量：1

7

作者 简永红 杨定平 《临床肾脏病杂志》 2016年第9期516-521,共6页

一、自噬的概述 1．自噬现象的发现1955年，科学家DeDuve发现了溶酶体和过氧化物酶体。1963年，DeDuve在电子显微镜下研究溶酶体的结构时在细胞内无意中发现了一种包含有降解的细胞器及溶酶体酶的双层膜结构，后将这种现象命名为“自... 一、自噬的概述 1．自噬现象的发现1955年，科学家DeDuve发现了溶酶体和过氧化物酶体。1963年，DeDuve在电子显微镜下研究溶酶体的结构时在细胞内无意中发现了一种包含有降解的细胞器及溶酶体酶的双层膜结构，后将这种现象命名为“自噬”，顾名思义“自食”。在进一步的研究中，他发现了溶酶体参与了自噬体降解胞内物质的过程。 展开更多

关键词 自噬体 急性肾损伤 溶酶体酶 过氧化物酶体 电子显微镜 膜结构 细胞内 科学家

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N-乙酰半胱氨酸在对比剂急性肾损伤防治中的应用 被引量：1

8

作者 简永红 杨定平 《临床肾脏病杂志》 2014年第12期758-761,共4页

随着造影和介入技术的发展，对比剂逐渐广泛应用于临床，而由此引起的急性肾损伤已成为不可忽视的临床问题，临床上曾把这种由于接受对比剂引起的肾脏损害称为“对比剂肾病（contrast-inducednephropathy，CIN）”，而近年来更倾向于采... 随着造影和介入技术的发展，对比剂逐渐广泛应用于临床，而由此引起的急性肾损伤已成为不可忽视的临床问题，临床上曾把这种由于接受对比剂引起的肾脏损害称为“对比剂肾病（contrast-inducednephropathy，CIN）”，而近年来更倾向于采用对比剂急性肾损伤（contras-inducedacutekidneyinjury，CI-AKI）代替CIN。有研究报道在接受对比剂注射的患者中发生cI-AKI的概率为2％～25%]，而对于存在危险因素（肾功能不全、糖尿病、心力衰竭、肝硬化、低血压、肾毒性药物、高龄等）的患者，CI-AKI的发生率则大大提高。 展开更多

关键词 对比剂肾病 急性肾损伤 N-乙酰半胱氨酸 损伤防治 应用 临床问题 肾功能不全 肾毒性药物

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沉默信息调节因子3在脂多糖诱导的肾小管上皮细胞线粒体动力学异常中的作用 被引量：1

9

作者 简永红 杨定平 +3 位作者 蔡怡旎 程玲莉 柯心雨 丁国华 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期824-830,共7页

目的观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激对小鼠肾脏及人肾小管上皮细胞沉默信息调节因子3(silent information regulator 3,Sirt3)和线粒体动力学相关蛋白表达的影响,探讨Sirt3在LPS诱导的肾小管上皮细胞线粒体动力学异常中的作用... 目的观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激对小鼠肾脏及人肾小管上皮细胞沉默信息调节因子3(silent information regulator 3,Sirt3)和线粒体动力学相关蛋白表达的影响,探讨Sirt3在LPS诱导的肾小管上皮细胞线粒体动力学异常中的作用。方法无特定病原体(SPF)级雄性C57BL/6小鼠18只,随机分为对照组、LPS 24 h组和LPS 48 h组,对照组腹腔注射生理盐水(0.1 ml/10 g),LPS 24 h组和LPS 48 h组腹腔注射LPS(10 mg/kg)溶液。全自动生化分析仪检测小鼠肾功能,HE染色观察肾组织病理变化,Western印迹法检测线粒体分裂相关蛋白线粒体动力相关蛋白1(dynamin-related protein-1,Drp1)、融合相关蛋白视神经萎缩相关蛋白A1(optic atrophy type 1,Opa1)及Sirt3的表达,免疫组化检测肾组织中Sirt3的表达及分布。体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),Western印迹法检测10μg/ml LPS刺激24 h后Drp1、Opa1及Sirt3的表达变化,Hoechst-33342染色检测细胞凋亡。pcDNA3.1-Sirt3重组质粒转染HK-2细胞过表达Sirt3后同上方法检测Sirt3、Drp1、Opa1的表达变化及细胞凋亡。结果(1)LPS组小鼠血肌酐、尿素氮明显高于对照组(均P<0.05),并出现典型病理改变。(2)LPS组小鼠肾组织线粒体分裂相关蛋白Drp1表达明显高于对照组,融合相关蛋白Opa1表达明显低于对照组(均P<0.05)。(3)LPS组小鼠Sirt3蛋白表达明显低于对照组(P<0.05),免疫组化结果表明Sirt3主要表达在肾小球血管内皮细胞和肾小管上皮细胞中。(4)LPS刺激可诱导HK-2细胞Drp1表达升高(P<0.05),Opa1及Sirt3表达下降(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05)。(5)pcDNA3.1-Sirt3重组质粒转染HK-2细胞过表达Sirt3可减轻LPS诱导的线粒体动力学紊乱及细胞凋亡。结论LPS可诱导Sirt3表达下调及线粒体动力学紊乱,Sirt3可能通过调控线粒体动力学在LPS诱导的急性肾损伤中发挥保护作用。 展开更多

关键词 急性肾损伤 线粒体动力学 肾小管 上皮细胞 脂多糖 沉默信息调节因子3

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火铺矿选煤厂煤泥水原则流程的改造

10

作者 简永红 《煤炭加工与综合利用》 CAS 2002年第2期36-37,共2页

本文介绍火铺矿选煤厂煤泥水原则流程改造的情况 ;浓缩浮选流程存在的问题 ;直接浮选流程的特点以及改造后所取得的效果。

关键词 煤泥水原则流程 浓缩浮选 直接浮选 技术改造 选煤

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英语物主代词用法

11

作者 简永红 《初中生辅导》 2002年第19期43-44,共2页

关键词 物主 代词用法 名词性 形容词 初中英语 结构形式 所有关系 功能 所有格 表示

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小议“oo”的读音

12

作者 简永红 梁远才 《初中生辅导》 2003年第10期42-42,共1页

关键词 读音 英语单词 字母组合 小议 羊毛 动词过去式 商品 过去分词 常见 合成词

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学习英语感叹句应注意的几点

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作者 简永红 田仁虎 《初中生辅导》 2003年第8期46-46,共1页

关键词 感叹句 形容词 主语 谓语动词 陈述句 学习英语 句型结构 修饰 句子 不可数名词

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在英语中五种将来时间的表示法

14

作者 简永红 《初中生辅导》 2002年第3期72-72,共1页

根据近十几年的初中英语教学 ,逐步将表示将来时间的句子归纳总结为五种 ,下面谈谈这几种的表示方法 :一、用情态动词“Will(shall) +V”表将来时间 ,这种句子结构主要意义表示“预见”和“

关键词 将来时间 初中英语教学 句子结构 主要意义 情态动词 归纳总结 表示方法 表示法 意图 预见

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