目的探讨PDGFR-β在神经干细胞(NSC)多向分化过程中的作用机制。方法分离与培养出生后第1、28天(P1、P28)PDGFR-β基因敲除小鼠(PDGFR-β-/-)SVZ区NSC,利用实时定量PCR、细胞免疫荧光染色方法检验PDGFR-β在NSC神经元分化能力方面的作...目的探讨PDGFR-β在神经干细胞(NSC)多向分化过程中的作用机制。方法分离与培养出生后第1、28天(P1、P28)PDGFR-β基因敲除小鼠(PDGFR-β-/-)SVZ区NSC,利用实时定量PCR、细胞免疫荧光染色方法检验PDGFR-β在NSC神经元分化能力方面的作用机制。采用方差分析、Fisher精确检验进行统计学处理。结果在对NSC进行诱导分化的过程中,PDGFs和PDGFRs的表达量明显增加,且源自NSC的神经元和星形胶质细胞均可高表达磷酸化的PDGFR-β,在对照组细胞中,P28 NSC的神经元分化能力明显低于P1细胞(MAP2表达量:0.27±0.03 vs 1.00±0.15,t=4.215,P<0.01;MAP2+神经元数量:8.93±4.24 vs 29.7±6.69,t=3.991,P<0.01;Dcx+神经元数量:9.05±2.12vs 17.4±3.87,t=3.338,P<0.05),而胶质细胞分化能力明显高于P1细胞(GFAP表达量:4.82±1.21 vs 1±0.22,t=3.921,P<0.01;Olig2表达量:1.45±0.46 vs 1±0.51,t=4.337,P<0.05;GFAP+胶质细胞数量:73.2±17.9 vs 40.5±4.11,t=6.221,P<0.01;Olig2+少突胶质前驱细胞数量:72.1±14.2 vs 42.7±6.59,t=3.224,P<0.05;Sox10+少突胶质前驱细胞数量:61.8±12.5 vs 33.4±3.59,t=3.013,P<0.05)。同时,P1 PDGFR-β-/-NSC细胞的神经元分化能力明显低于P1对照组(MAP2表达量:0.59±0.06 vs 1±0.15,t=3.674,P<0.05;MAP2+神经元数量:22.1±4.03 vs 29.7±6.69,t=5.223,P<0.05;Dcx+神经前驱细胞数量:8.61±1.74 vs 17.4±3.87,t=4.997,P<0.05),而两组中的胶质细胞分化能力相当。结论本研究证明PDGFR-β信号系统在NSC多向分化方面起重要作用。因此,激活NSC中PDGFR-β信号途径,可能成为今后神经系统疾病细胞替代疗法又一新的治疗策略。展开更多
文摘目的探讨PDGFR-β在神经干细胞(NSC)多向分化过程中的作用机制。方法分离与培养出生后第1、28天(P1、P28)PDGFR-β基因敲除小鼠(PDGFR-β-/-)SVZ区NSC,利用实时定量PCR、细胞免疫荧光染色方法检验PDGFR-β在NSC神经元分化能力方面的作用机制。采用方差分析、Fisher精确检验进行统计学处理。结果在对NSC进行诱导分化的过程中,PDGFs和PDGFRs的表达量明显增加,且源自NSC的神经元和星形胶质细胞均可高表达磷酸化的PDGFR-β,在对照组细胞中,P28 NSC的神经元分化能力明显低于P1细胞(MAP2表达量:0.27±0.03 vs 1.00±0.15,t=4.215,P<0.01;MAP2+神经元数量:8.93±4.24 vs 29.7±6.69,t=3.991,P<0.01;Dcx+神经元数量:9.05±2.12vs 17.4±3.87,t=3.338,P<0.05),而胶质细胞分化能力明显高于P1细胞(GFAP表达量:4.82±1.21 vs 1±0.22,t=3.921,P<0.01;Olig2表达量:1.45±0.46 vs 1±0.51,t=4.337,P<0.05;GFAP+胶质细胞数量:73.2±17.9 vs 40.5±4.11,t=6.221,P<0.01;Olig2+少突胶质前驱细胞数量:72.1±14.2 vs 42.7±6.59,t=3.224,P<0.05;Sox10+少突胶质前驱细胞数量:61.8±12.5 vs 33.4±3.59,t=3.013,P<0.05)。同时,P1 PDGFR-β-/-NSC细胞的神经元分化能力明显低于P1对照组(MAP2表达量:0.59±0.06 vs 1±0.15,t=3.674,P<0.05;MAP2+神经元数量:22.1±4.03 vs 29.7±6.69,t=5.223,P<0.05;Dcx+神经前驱细胞数量:8.61±1.74 vs 17.4±3.87,t=4.997,P<0.05),而两组中的胶质细胞分化能力相当。结论本研究证明PDGFR-β信号系统在NSC多向分化方面起重要作用。因此,激活NSC中PDGFR-β信号途径,可能成为今后神经系统疾病细胞替代疗法又一新的治疗策略。
