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新型抗广谱性除草剂草甘膦转基因油菜的创制及其鉴定 被引量:6
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作者 李杰华 +6 位作者 史明涛 吴潞梅 柳寒 林拥军 吴高兵 范楚川 周永明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期789-798,共10页
草甘膦是世界上应用最广泛的广谱性除草剂,目前我国还没有自主知识产权的抗草甘膦油菜品种。本研究利用农杆菌介导的油菜下胚轴遗传转化方法,将新型抗草甘膦基因I.variabilis EPSPS转入甘蓝型油菜品系J9707中,获得了126株阳性转化株,阳... 草甘膦是世界上应用最广泛的广谱性除草剂,目前我国还没有自主知识产权的抗草甘膦油菜品种。本研究利用农杆菌介导的油菜下胚轴遗传转化方法,将新型抗草甘膦基因I.variabilis EPSPS转入甘蓝型油菜品系J9707中,获得了126株阳性转化株,阳性率为97.0%。这些转化单株中的T-DNA插入以单拷贝为主(占44.8%)。通过反向PCR确定了EPS-2、EPS-6和EPS-7等油菜转化体中T-DNA插入位置,并设计转化体特异性引物对它们的T0~T3代材料进行检测,证明了它们的T-DNA在基因组水平上整合的稳定性。RNA和蛋白水平的表达分析证实,I.variabilis EPSPS转基因及其蛋白产物在各转化株系不同世代能够稳定表达。苗期进行不同剂量的除草剂喷施处理发现,EPS-1、EPS-2、EPS-5、EPS-6和EPS-7等株系可耐受4倍田间推荐使用剂量的草甘膦。本研究所创建的新型抗草甘膦油菜种质资源将为我国抗除草剂油菜品种培育奠定了重要基础。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 I.variabilis EPSPS 转基因 草甘膦 分子特征
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抗草铵膦除草剂转基因油菜新种质的创制及鉴定
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作者 吴潞梅 覃萍 +7 位作者 闫彤 于洋 柳寒 林拥军 吴高兵 范楚川 周永明 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1696-1708,共13页
草铵膦是一种在世界范围内广泛使用的内吸型除草剂。目前,我国还未研发出具有自主知识产权的抗草铵膦除草剂油菜品种。本研究通过油菜下胚轴遗传转化方法成功将1个新型草铵膦抗性基因Syn1-RePAT转化到甘蓝型油菜中,通过筛选获得了27株... 草铵膦是一种在世界范围内广泛使用的内吸型除草剂。目前,我国还未研发出具有自主知识产权的抗草铵膦除草剂油菜品种。本研究通过油菜下胚轴遗传转化方法成功将1个新型草铵膦抗性基因Syn1-RePAT转化到甘蓝型油菜中,通过筛选获得了27株阳性单株。利用Southern blot技术筛选出其中的单拷贝T-DNA插入株系,并通过后代分离比检测对重要株系进行了拷贝数验证。利用Inverse-PCR技术对OV40-7、OV40-15、OV40-16和OV40-17等转化体进行T-DNA侧翼序列分析与比对,分离获得了各转基因株系的插入位点信息。对不同转化体株系设计特异性引物,通过PCR技术检测外源基因序列在T1~T3代材料的整合稳定性。RT-PCR和qRT-PCR表达分析证实,Syn1-RePAT转基因在多个转化株系的不同世代稳定超量表达。对T1代转化体进行功能鉴定,各转化体对草铵膦具有良好的抗性,至少可耐受6倍田间推荐施用剂量的草铵膦。本研究所创建的新型抗草铵膦油菜种质资源极具应用前景,为我国抗草铵膦良种培育工作提供了有力支持。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 Syn1-RePAT 转基因油菜 草铵膦 分子特征
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一次勇敢的尝试
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作者 刘梦妃 (指导) 《快乐语文》 2022年第19期87-87,共1页
上课回答问题对于大多数同学来说如同家常便饭,但对于我来说却是非常艰难的事。在课堂上我只要一站起来,心脏就开始狂跳,脸也不由自主地红起来,话在喉陇里就是说不出来。这个问题一直困扰着我,直到那一次勇敢的尝试后。那是在一次数学课... 上课回答问题对于大多数同学来说如同家常便饭,但对于我来说却是非常艰难的事。在课堂上我只要一站起来,心脏就开始狂跳,脸也不由自主地红起来,话在喉陇里就是说不出来。这个问题一直困扰着我,直到那一次勇敢的尝试后。那是在一次数学课上,老师出了一道很难的题目,把我们班的数学“学霸”都给难住了。因为之前自学时遇到过类似的题目,所以我很快就解答出来了。 展开更多
关键词 数学课 课堂 勇敢 家常便饭 上课 老师 不由自主
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