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荧光探针法研究牛血清白蛋白和免疫球蛋白的表面疏水特性 被引量：14
1
作者 余晶梅 林东强 +1 位作者 童红飞 姚善泾 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第4期771-776,共6页
利用8-苯氨基-1-萘磺酸(ANS)荧光探针法,测定了牛血清白蛋白(BSA)与牛免疫球蛋白(bIgG)的表面疏水性,探讨了pH、温度、添加盐、十二烷基磺酸钠(SDS)、盐酸胍和辛酸钠(NaCA)对蛋白表面疏水性指数S0的影响。实验表明,对于阴离子型荧光探针... 利用8-苯氨基-1-萘磺酸(ANS)荧光探针法,测定了牛血清白蛋白(BSA)与牛免疫球蛋白(bIgG)的表面疏水性,探讨了pH、温度、添加盐、十二烷基磺酸钠(SDS)、盐酸胍和辛酸钠(NaCA)对蛋白表面疏水性指数S0的影响。实验表明,对于阴离子型荧光探针ANS,pH对S0测定的影响显著,选择pH略高于蛋白等电点比较合适。温度对两种蛋白S0的影响不同,从50℃升至80℃,BSA表面疏水性降低,bIgG表面疏水性升高。添加盐促使蛋白的表面疏水性增强,相比BSA,bIgG增加幅度较大。不同变性剂对两种蛋白S0的影响也不同,与变性机制、蛋白疏水特性及分子结构有关。添加NaCA对两种蛋白S0影响存在显著差异,随着NaCA浓度升高,BSA的S0值减小,而bIgG则维持基本不变,这与疏水层析分离过程的NaCA影响相一致。结果表明,ANS荧光探针法可用于考察不同溶液条件对蛋白质分子表面疏水性的影响,研究特定添加剂-蛋白质间疏水相互作用。 展开更多
关键词 表面疏水性 荧光探针 8-苯氨基-1-萘磺酸 牛血清白蛋白 牛免疫球蛋白
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疏水性电荷诱导层析纯化免疫球蛋白IgY 被引量：11
2
作者 童红飞 林东强 姚善泾 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1574-1580,共7页
利用疏水性电荷诱导层析(HCIC)从鸡血中分离免疫球蛋白IgY。采用经辛酸预处理后的血浆上清液作为原料,直接用HCIC分离纯化IgY。考察了两种HCIC介质,市售介质MEP HyperCel和实验室自制介质Bestarose-DVS-MMI,优化了上样pH、洗脱pH和上样... 利用疏水性电荷诱导层析(HCIC)从鸡血中分离免疫球蛋白IgY。采用经辛酸预处理后的血浆上清液作为原料,直接用HCIC分离纯化IgY。考察了两种HCIC介质,市售介质MEP HyperCel和实验室自制介质Bestarose-DVS-MMI,优化了上样pH、洗脱pH和上样量等条件。研究发现,以2-巯基-1-甲基咪唑为配基的Bestarose-DVS-MMI介质优于MEP HyperCel介质,前者分离IgY的纯度和收率较高,HPLC分析IgY纯度可达92%以上,收率约95%。通过配基结构比较和表面电势分析,探讨了HCIC分离IgY的机制。结果表明,采用HCIC可以实现IgY的高效分离,为从血液中分离免疫球蛋白提供了新方法。 展开更多
关键词 疏水性电荷诱导层析 免疫球蛋白 IGY 鸡血浆
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人免疫球蛋白G酶解制备Fab和Fc片段及其分离纯化 被引量：8
3
作者 唐思远 林东强 +1 位作者 童红飞 姚善泾 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1750-1756,共7页
为了制备抗体Fab和Fc片段,采用木瓜蛋白酶酶解人免疫球蛋白G(IgG),通过优化酶解条件和色谱法分离过程,得到了纯度较高的Fab片段和Fc片段。考察了酶解pH、酶加入量、添加半胱氨酸和酶解时间等对IgG酶解过程的影响,优化了酶解条件,提高酶... 为了制备抗体Fab和Fc片段,采用木瓜蛋白酶酶解人免疫球蛋白G(IgG),通过优化酶解条件和色谱法分离过程,得到了纯度较高的Fab片段和Fc片段。考察了酶解pH、酶加入量、添加半胱氨酸和酶解时间等对IgG酶解过程的影响,优化了酶解条件,提高酶解效率,IgG转化率大于98%。酶解产物通过Protein A亲和色谱法和DEAE阴离子交换色谱法进行了纯化,分离得到Fc片段和Fab片段,收率分别为72.6%和40.1%。经SEC-HPLC分析,Fc片段纯度达95.7%,Fab片段纯度达96.6%。 展开更多
关键词 人免疫球蛋白G Fc片段 FAB片段 木瓜蛋白酶 亲和色谱法 离子交换色谱法
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疏水性电荷诱导色谱分离抗HER2单克隆抗体 被引量：6
4
作者 李菁 林东强 +3 位作者 童红飞 姚善泾 叶帅东 崔加友 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第10期3931-3937,共7页
采用疏水性电荷诱导色谱（HCIC）新型生物分离方法，从CHO细胞培养液中高效分离抗HER2单克隆抗体（单抗）。选用典型HCIC介质MEP HyperCel，考察了细胞培养液中单抗稳定性，比较了不同pH下MEP HyperCel介质对抗HER2单抗的吸附性能，发现... 采用疏水性电荷诱导色谱（HCIC）新型生物分离方法，从CHO细胞培养液中高效分离抗HER2单克隆抗体（单抗）。选用典型HCIC介质MEP HyperCel，考察了细胞培养液中单抗稳定性，比较了不同pH下MEP HyperCel介质对抗HER2单抗的吸附性能，发现pH6～9范围内吸附容量均较高，酸性条件下吸附容量显著下降。进一步考察了抗HER2单抗的动态吸附载量，优化了上样和洗脱条件，确定了合适的分离条件，实现了细胞培养液中高效分离单抗，纯度达到94.6%，收率约0.1 mg·（ml料液）-1。结果表明，HCIC从哺乳动物细胞培养液中分离单抗是切实可行的，为单抗分离提供了新思路。 展开更多
关键词 生物分离 单克隆抗体 色谱 疏水性电荷诱导色谱 抗HER2
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生物钟与衰老的相关研究进展 被引量：3
5
作者 顾佳黎 吴涛 +4 位作者 童红飞 盛丽娟 胡丽影 许扬 傅正伟 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期123-128,共6页
众所周知,从单细胞生物到人,几乎所有生物体在生理和行为上都表现出昼夜节律。内源性生物钟是产生昼夜节律的物质基础,由母钟和子钟组成,母钟位于下丘脑视交叉上核(SCN),子钟位于各个外周组织(肝脏、心脏等)。随着机体的逐渐衰老,反应... 众所周知,从单细胞生物到人,几乎所有生物体在生理和行为上都表现出昼夜节律。内源性生物钟是产生昼夜节律的物质基础,由母钟和子钟组成,母钟位于下丘脑视交叉上核(SCN),子钟位于各个外周组织(肝脏、心脏等)。随着机体的逐渐衰老,反应生物钟输出信号的生理昼夜节律在振荡幅度、振荡周期和表达时相等方面发生了相应的变化。另一方面,生物钟控制的生理昼夜节律影响衰老的进程,生物钟功能紊乱会严重加速机体的衰老。本文概述了衰老与生物钟之间的相关研究进展,为进一步认识衰老机制及其对机体的影响提供了线索。 展开更多
关键词 生物钟 衰老 生物节律
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鼠神经生长因子治疗HIV/AIDS合并隐球菌性脑膜炎临床观察 被引量：1
6
作者 李威 张小丹 +3 位作者 童红飞 黄晓婕 吴昊 汪雯 《中国病毒病杂志》 CAS 2012年第4期277-280,共4页
目的回顾性研究鼠神经生长因子在HIV/AIDS合并隐球菌性脑膜炎中的治疗作用。方法收集北京佑安医院2010年1月至2011年12月收治的26例HIV/AIDS合并隐球菌性脑膜炎患者的临床资料,其中鼠神经生长因子治疗组16例,对照组10例,回顾性分析两组... 目的回顾性研究鼠神经生长因子在HIV/AIDS合并隐球菌性脑膜炎中的治疗作用。方法收集北京佑安医院2010年1月至2011年12月收治的26例HIV/AIDS合并隐球菌性脑膜炎患者的临床资料,其中鼠神经生长因子治疗组16例,对照组10例,回顾性分析两组患者的临床特点。结果 73.1%(19例)的患者为31～38岁,男性18例(69.2%),发病时CD4<100个/μl者占76.9%(20例),从发现HIV阳性到发病时间在1年内者占57.7%(15例),入院时两组间在生命体征及脑脊液指标方面差异无统计学意义。经治疗后,鼠神经生长因子治疗组患者除2人未愈外均好转/痊愈出院,而对照组中7例好转/痊愈,2例未愈,1例死亡。治疗组抽搐、视乳头水肿和肌无力症状缓解时间与对照组比较有明显缩短(P值分别为0.025、0.013、0.032)。两组平均住院天数分别为(61.1±9.1)d和(70.0±11.1)d,差异无统计学意义。结论鼠神经生长因子对于HIV/AIDS合并隐球菌性脑膜炎的治疗可能有辅助作用。 展开更多
关键词 鼠神经生长因子 HIV/AIDS 隐球菌性脑膜炎
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珠钢热连轧轧辊使用优化与创新
7
作者 童红飞 谢劲松 《冶金丛刊》 2007年第5期38-41,共4页
介绍了珠钢热连轧轧辊的应用现状及其存在的问题。珠钢研究并开发了适应高比例薄规格热轧板生产的轧辊配置技术,包括工作辊辊径的配置技术和高性能材质轧辊应用技术等。轧辊配置技术的广泛应用降低了轧辊的辊耗,提高了薄规格热轧板的生... 介绍了珠钢热连轧轧辊的应用现状及其存在的问题。珠钢研究并开发了适应高比例薄规格热轧板生产的轧辊配置技术,包括工作辊辊径的配置技术和高性能材质轧辊应用技术等。轧辊配置技术的广泛应用降低了轧辊的辊耗,提高了薄规格热轧板的生产比例,改善了产品表面质量。 展开更多
关键词 轧辊 应用 创新
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资源节约环境友好型热轧钢板制造技术
8
作者 李轲新 童红飞 +2 位作者 沈训良 宋昕 谢劲松 《材料研究与应用》 CAS 2008年第4期317-323,共7页
通过用厚2.0 mm以下的薄规格热轧钢板替代同等厚度的冷轧钢板,实现"以热代冷";用更高强度的薄规格热轧板替代一般强度热轧板,实现"以薄代厚".珠江钢铁公司开发出薄规格热轧钢板生产成套技术,首次实现了薄规格热轧... 通过用厚2.0 mm以下的薄规格热轧钢板替代同等厚度的冷轧钢板,实现"以热代冷";用更高强度的薄规格热轧板替代一般强度热轧板,实现"以薄代厚".珠江钢铁公司开发出薄规格热轧钢板生产成套技术,首次实现了薄规格热轧钢板的高质量、高比例生产,薄规格热轧钢板能有效降低生产能耗. 展开更多
关键词 资源节约 环境友好 薄规格 热轧钢板 制造技术
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