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十溴联苯醚暴露通过胞外囊泡装载miR-221促进三阴性乳腺癌细胞转移
1
作者 江孟晓 王丽珍 +3 位作者 卢林明 童有华 李艳宇 支慧 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期481-489,共9页
目的:探讨环境污染物十溴联苯醚(BDE-209)暴露促进三阴性乳腺癌(TNBC)恶性进展的机制。方法:将TBNC细胞分为空白对照组和BDE-209暴露组。超速离心法提取胞外囊泡,分别应用扫描电子显微镜和蛋白质印迹法对提取的胞外囊泡进行鉴定,采用纳... 目的:探讨环境污染物十溴联苯醚(BDE-209)暴露促进三阴性乳腺癌(TNBC)恶性进展的机制。方法:将TBNC细胞分为空白对照组和BDE-209暴露组。超速离心法提取胞外囊泡,分别应用扫描电子显微镜和蛋白质印迹法对提取的胞外囊泡进行鉴定,采用纳米颗粒跟踪技术检测胞外囊泡生成量,细胞划痕实验和Transwell小室实验检测与胞外囊泡共培养后TNBC细胞的迁移能力和扩散能力,定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测囊泡中的miR-221表达水平,蛋白质印迹法检测共培养后TNBC细胞中基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达水平。结果:与空白对照组比较,2.00、20.00和200.00 ng/mL BDE-209暴露可显著增加胞外囊泡的生成(均P<0.05),其中200.00 ng/mL BDE-209暴露诱导释放的胞外囊泡共培养的细胞迁移率较空白对照组提高86%,穿膜细胞数提高至1.32倍,miR-221表达水平提高至2.71倍,MMP9表达水平提高至1.62倍(均P<0.05)。转染抗miR-221抗体能降低BDE-209暴露诱导生成的胞外囊泡内miR-221表达水平,使BDE-209促进MDA-MB-231细胞迁移的能力被显著抑制。结论:BDE-209暴露可通过增加胞外囊泡的生成及装载miR-221增强TNBC细胞的迁移能力,促进TNBC细胞转移。 展开更多
关键词 十溴联苯醚 三阴性乳腺癌 胞外囊泡 细胞迁移 微RNA-221 基质金属蛋白酶9
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小鼠创伤性脑损伤后血清外泌体粒径和miR-21-5P表达水平的变化及意义
2
作者 支敏 江孟晓 +2 位作者 童有华 郑旭东 支慧 《海南医学》 CAS 2023年第19期2737-2742,共6页
目的观察轻型创伤性脑损伤(mTBI)小鼠血清外泌体物理特征与外泌体miR-21-5P的表达水平,并分析外泌体的粒径及miR-21-5P表达对脑外伤诊断的价值。方法选择8周龄C57小鼠12只,按随机数表法分为mTBI组和假手术组(sham组)各6只;采用Feency法... 目的观察轻型创伤性脑损伤(mTBI)小鼠血清外泌体物理特征与外泌体miR-21-5P的表达水平,并分析外泌体的粒径及miR-21-5P表达对脑外伤诊断的价值。方法选择8周龄C57小鼠12只,按随机数表法分为mTBI组和假手术组(sham组)各6只;采用Feency法制作mTBI小鼠模型。第1天、第7天、第21天后取小鼠外周血,第3天、第7天、第14天、第28天后对小鼠进行神经功能缺失评分(mNSS)。采用PEG沉淀法提取外周血外泌体,运用纳米颗粒视踪技术(NTA)分析外泌体,采用定量PCR检测外泌体中miR-21-5P的表达水平。结果mTBI损伤组小鼠外周血外泌体在损伤发生1 d后其生成量为(0.84±0.24)×10^(7)particals/mL,明显低于假手术组的(10.83±0.7)×10^(7)particals/mL,且在损伤发生第28天mTBI损伤组小鼠外周血的外泌体虽然有所增加,但依然明显低于假手术组,差异均具有统计学意义(P<0.05);同时,外泌体粒径检测结果显示,mTBI发生后的第一天,mTBI组小鼠外周血外泌体的粒径为(131.1±2.27)nm,明显多于sham组小鼠的(114.6±6.01)nm,差异具有统计学意义(P<0.05),且直到损伤第28天时,mTBI组小鼠外周血外泌体的粒径依然明显大于sham组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。定量PCR检测结果表明,mTBI组小鼠外周血外泌体中的miR-21-5P表达水平不仅在损伤24 h明显高于sham组,在损伤发生后第28天依然维持在较高水平,明显高于sham组小鼠,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论创伤性脑损伤后外周血外泌体不仅生成量与粒径均有明显变化,其所携带的miR-21-5P表达水平亦明显升高,且这些变化在损伤发生28 d时依然存在。可见,外周血外泌体的生成量、粒径及其携带的miR-21-5P对mTBI损伤的临床评估具有较高的价值,有望成为mTBI预后评估的潜在生物指标。 展开更多
关键词 小鼠 轻型创伤性脑损伤 外周血外泌体 外泌体生成量 外泌体粒径 miR-21-5P
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