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新疆部分地区牛、羊细粒棘球蚴感染情况调查及基因多态性分析 被引量：7
1
作者 郭璐 吴小霞 +14 位作者 段兰利 王冰洁 徐宁 阿热艾·阿哈太 乌云花 赵莉 班万里 陈云英 余婉蓉 刘帅 潘星羽 吾力江·卡马力 徐晶 穆尼拉·特列吾汗 张壮志 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2022年第5期603-609,共7页
目的 了解新疆维吾尔自治区(简称新疆)部分地区牛、羊细粒棘球蚴感染情况和基因多态性,为该地区细粒棘球蚴病的防治提供数据参考。方法于2020—2021年从伊宁市、阿勒泰市、塔城市、昭苏县、特克斯县、额敏县、博乐市的定点屠宰场采集屠... 目的 了解新疆维吾尔自治区(简称新疆)部分地区牛、羊细粒棘球蚴感染情况和基因多态性,为该地区细粒棘球蚴病的防治提供数据参考。方法于2020—2021年从伊宁市、阿勒泰市、塔城市、昭苏县、特克斯县、额敏县、博乐市的定点屠宰场采集屠宰后牛、羊的肝脏和肺脏,通过肉眼观察与触摸初步判定感染情况,采集疑似细粒棘球蚴包囊并提取DNA, PCR扩增细粒棘球绦虫细胞色素氧化酶1 (cox1)基因并测序。从GenBank中下载细粒棘球绦虫cox1基因G1、 G3、 G4、 G5、 G6型序列,与测定的序列行BLAST比对。利用MEGA 7.0软件用邻接法构建系统进化树,用Popart软件构建cox1基因单倍型网络图,用DnaSPv5软件分析cox1基因多态性位点。使用SPSS17.0软件进行统计学分析,对不同地区牛、羊及不同脏器感染率的比较采用χ^(2)检验。结果新疆7个县(市)共调查4 977头(只)牛、羊(牛563头、羊4 414只),采集到疑似细粒棘球蚴包囊141份,其中121份扩增出850 bp的条带并测序成功。牛、羊总感染率为2.07%(103/4 977),其中博乐市牛、羊的感染率最高(6.50%, 32/492),与伊宁市(1.80%, 38/2 108)、塔城市(1.14%, 9/790)、特克斯县(1.06%, 2/189)、额敏县(0.72%, 7/970)相比,感染率差异有统计学意义(χ^(2)=49.873、 33.682、 8.762、28.666,均P <0.05)。牛、羊的感染率分别为3.02%(17/563)、 1.95%(86/4 414),两者差异有统计学意义(χ^(2)=14.296, P <0.05)。共采集羊肝、肺包囊101份,其中肝包囊占42.57%(43/101),肺包囊占27.72%(28/101),肝、肺合并感染包囊占29.70%(30/101)。共采集牛肝、肺包囊20份,其中肝包囊占25.00%(5/20),肺包囊占45.00%(9/20),肝、肺合并感染包囊占30.00%(6/20)。BLAST比对结果显示,121条序列中120条(99.2%)与细粒棘球绦虫G1基因型序列(MN886258.1、 MG280957.1、 KX020359.1和MG672143.1)的同源性为98%~100%,在系统进化树上聚为一支;1条(0.8%)与G3基因型序列(MG682532.1)的同源 展开更多
关键词 细粒棘球蚴病 cox1基因 单倍型
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羊瘤胃积食发病原因及防治措施
2
作者 穆尼拉·特列吾汗 《农村新技术》 2024年第8期36-38,共3页
瘤胃积食是反刍动物常见的一种消化道疾病,一般由于反刍动物采食了过量的粗硬饲料引起,主要发病原因是采食过量、过精的饲料,当瘤胃内的食糜不能正常消化时,瘤胃内容物通过痉挛性收缩产生大量气体,使瘤胃壁扩张,引起疼痛。一般情况下。
关键词 瘤胃积食 痉挛性收缩 消化道疾病 反刍动物 瘤胃内容物 瘤胃壁 主要发病原因 食糜
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细粒棘球绦虫体外不同发育时期Eg M9基因差异表达研究 被引量：3
3
作者 陈云英 王冰洁 +12 位作者 潘星羽 余婉容 吾力江·卡马力 赵莉 班万里 刘帅 郭璐 段兰利 徐晶 穆尼拉·特列吾汗 喻昌盛 乌云花 张壮志 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期784-789,共6页
目的探究Eg M9基因在细粒棘球绦虫体外不同发育时期的表达情况。方法体外培养细粒棘球绦虫原头蚴(protoscoleces,PSCs)向成虫方向发育;收集不同发育时期的虫体,通过H&E染色进行虫体形态学观察;运用荧光定量PCR方法,以β-Actin作为... 目的探究Eg M9基因在细粒棘球绦虫体外不同发育时期的表达情况。方法体外培养细粒棘球绦虫原头蚴(protoscoleces,PSCs)向成虫方向发育;收集不同发育时期的虫体,通过H&E染色进行虫体形态学观察;运用荧光定量PCR方法,以β-Actin作为内参基因,使用2^(-ΔΔCt)法计算虫体不同发育时期Eg M9基因的表达情况,用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析。结果最终成功建立了细粒棘球绦虫原头蚴向成虫方向发育的体外培养模型,培养虫体至50 d;体外培养的虫体在第50 d时可产生3个节片;体外培养第50 d的虫体Eg M9基因的表达量最高,与其他时期虫体表达量差异有统计学意义(F=11.32,P<0.05)。结论Eg M9基因是细粒棘球绦虫成虫阶段高表达的基因,可能与虫体性器官发育有关。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 体外培养 Eg M9 荧光定量PCR
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多房棘球蚴单克隆抗体的免疫特性分析
4
作者 段兰利 赵莉 +10 位作者 王冰洁 班万里 徐宁 陈云英 郭璐 余婉蓉 阿热艾·阿哈太 徐晶 穆尼拉·特列吾汗 喻昌盛 张壮志 《动物医学进展》 北大核心 2023年第3期67-72,共6页
用免疫学方法对2株抗多房棘球蚴单克隆细胞株进行免疫特性分析。研究制备抗多房棘球蚴单克隆抗体1G11、1C1,亲和层析纯化并检测纯度,采用ELISA、Western blot和免疫组化法分别检测所获抗体的抗体效价、特异性以及抗体在免疫组织化学定... 用免疫学方法对2株抗多房棘球蚴单克隆细胞株进行免疫特性分析。研究制备抗多房棘球蚴单克隆抗体1G11、1C1,亲和层析纯化并检测纯度,采用ELISA、Western blot和免疫组化法分别检测所获抗体的抗体效价、特异性以及抗体在免疫组织化学定位。结果显示,经亲和层析纯化获得的单克隆抗体1G11、1C1在分子质量约55 ku及24 ku可见清晰的重、轻链条带;ELISA与Western blot结果显示,单克隆抗体1G11、1C1与多房棘球蚴能特异性结合,与细粒棘球蚴抗原、细颈囊尾蚴抗原、多头蚴抗原不反应且无交叉反应;经免疫组化鉴定2株抗多房棘球蚴单克隆抗体均能与多房棘球蚴特异性结合。结果表明,抗多房棘球蚴单克隆抗体具有良好的免疫特性,为后期包虫病诊断试剂的研发提供了物质基础。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 单克隆抗体 免疫特性 免疫组化
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多房棘球绦虫粪抗原双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量：2
5
作者 吴小霞 赵莉 +11 位作者 王冰洁 班万里 穆尼拉·特列吾汗 马长丽 乌云花 布于其其格 陈云英 段兰利 岳城 徐晶 艾沙江 张壮志 《动物医学进展》 北大核心 2021年第8期1-6,共6页
建立多房棘球绦虫粪抗原双抗体夹心ELISA检测方法,为犬感染多房棘球绦虫的早期诊断提供技术支撑。以5E10H5杂交瘤细胞株腹腔接种Balb/c鼠制备的腹水作为包被抗体,多房棘球绦虫成虫可溶性抗原免疫新西兰大白兔制备的多克隆抗体血清作为... 建立多房棘球绦虫粪抗原双抗体夹心ELISA检测方法,为犬感染多房棘球绦虫的早期诊断提供技术支撑。以5E10H5杂交瘤细胞株腹腔接种Balb/c鼠制备的腹水作为包被抗体,多房棘球绦虫成虫可溶性抗原免疫新西兰大白兔制备的多克隆抗体血清作为检测抗体,HRP标记的驴抗兔IgG作为二抗,建立双抗体夹心ELISA方法,检测试验犬(感染多房棘球绦虫)和阴性对照犬犬粪。结果显示,多房棘球绦虫成虫可溶性抗原具有良好的抗原性并能产生高效价抗体;对该方法的灵敏度进行检测,阳性粪样稀释至1:10000时仍显示为阳性;在感染动态分析中,该方法最早可在犬感染72 h后,最迟6 d后检测到多房棘球绦虫粪抗原。表明建立的方法可用于诊断犬多房棘球绦虫感染,为后期研制犬多房棘球绦虫粪抗原双抗体夹心ELISA检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 双抗体夹心ELISA 粪抗原
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线粒体NADH1基因和微卫星标记在棘球绦虫感染检测中的应用
6
作者 吕凤军 王冰洁 +11 位作者 丁伟强 赵莉 班万里 段兰利 穆尼拉·特列吾汗 吴小霞 徐晶 陈云英 郭涛 王方 乌云花 张壮志 《草食家畜》 2020年第4期43-51,共9页
(目的)利用线粒体NADH脱氢酶亚基1基因(NADH1)和微卫星标记进行棘球绦虫感染的基因型和遗传多样性分析。(方法)对不同地区牛、羊肝/肺包囊(8份)、野生鼠肝包囊(4份)和狐狸肠道寄生棘球绦虫成虫(2份)共14个样本提取DNA后,分别用棘球绦虫... (目的)利用线粒体NADH脱氢酶亚基1基因(NADH1)和微卫星标记进行棘球绦虫感染的基因型和遗传多样性分析。(方法)对不同地区牛、羊肝/肺包囊(8份)、野生鼠肝包囊(4份)和狐狸肠道寄生棘球绦虫成虫(2份)共14个样本提取DNA后,分别用棘球绦虫线粒体NADH1基因和微卫星标记进行检测。(结果)PCR扩增分别得到大小约为510 bp的NADH1核苷酸片段和200~300 bp不等的微卫星标记片段,产物的长度与引物设计的预期产物长度一致;序列比对发现不同地区、不同宿主来源的样品序列存在碱基的颠/转换和碱基缺失现象;测序发现8份牛、羊肝/肺包囊样本均为细粒棘球蚴G1基因型感染,4份野生鼠肝包囊均为多房棘球蚴感染,2份狐狸肠道寄生棘球绦虫样本为多房棘球绦虫感染。(结论)线粒体NADH1基因和微卫星标记均适用于棘球绦虫种间和种内的鉴别、分类及系统进化分析研究。 展开更多
关键词 棘球绦虫 NADH脱氢酶亚基1基因 微卫星
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细粒棘球绦虫成虫蛋白的提取及特异性成分分析
7
作者 穆尼拉·特列吾汗 班万里 +11 位作者 赵莉 王冰洁 王俊伟 吴小霞 马长丽 乌云花 布于其其格 陈云英 段兰利 徐晶 艾沙江 张壮志 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期211-218,共8页
旨在获得特异性蛋白提取效果好的细粒棘球绦虫(Eg)成虫蛋白提取方法,采用7种方法提取Eg成虫蛋白,以ELISA、SDS-PAGE、Western-blot等检测方法比较各蛋白提取方法的提取效果,对7种蛋白提取物进行凝胶层析获得不同蛋白组分,经过ELISA、SDS... 旨在获得特异性蛋白提取效果好的细粒棘球绦虫(Eg)成虫蛋白提取方法,采用7种方法提取Eg成虫蛋白,以ELISA、SDS-PAGE、Western-blot等检测方法比较各蛋白提取方法的提取效果,对7种蛋白提取物进行凝胶层析获得不同蛋白组分,经过ELISA、SDS-PAGE、Western-blot等检测各组分中特异性蛋白的含量,判断各提取方法的提取效果。结果表明,7种方法均能用于提取特异性蛋白;各蛋白提取物的ELISA、SDS-PAGE和Western-blot检测显示,PBS超声破碎蛋白中特异性蛋白含量较其他蛋白提取物高。凝胶层析和ELISA检测结果表明特异性蛋白分子质量较大。比较特异性组分占总蛋白的百分比发现,PBS液氮研磨蛋白、Tris-HCl超声破碎蛋白和PBS超声破碎蛋白中特异性组分较多。本研究通过分析结合物理化学7种方法提取蛋白,为寻找蛋白质组学标准物质提供了参考依据。 展开更多
关键词 棘球蚴病 细粒棘球绦虫 蛋白质组学 凝胶层析 特异性组分
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Eg犬粪抗原与多克隆抗体结合的条件筛选与纯化
8
作者 徐晶 班万里 +11 位作者 王冰洁 赵莉 穆尼拉·特列吾汗 吴小霞 陈云英 段兰利 艾沙江 郭涛 王方 乌云花 布于其其格 张壮志 《草食家畜》 2020年第3期39-50,共12页
包虫病又称棘球蚴病,此病是由细粒棘球绦虫引起的一类严重的人兽共患寄生虫病,它严重危害人类与家畜的健康,并对畜牧业造成危害与阻碍。了解终末宿主犬科动物粪样中细粒棘球绦虫虫体蛋白组成,寻找特异性的靶抗原能对包虫病的预防和提高... 包虫病又称棘球蚴病,此病是由细粒棘球绦虫引起的一类严重的人兽共患寄生虫病,它严重危害人类与家畜的健康,并对畜牧业造成危害与阻碍。了解终末宿主犬科动物粪样中细粒棘球绦虫虫体蛋白组成,寻找特异性的靶抗原能对包虫病的预防和提高双抗夹心ELISA检测的敏感性与特异性提供重要依据。本文通过对缓冲溶液的筛选,多克隆血清与粪抗原结合条件的筛选,确定抗体与抗原结合最佳配比浓度,用亲和层析与凝胶层析对抗原抗体结合物纯化分离,并检测纯化后样品的敏感性和特异性。最终确定PBST和柠檬酸缓冲液都能用于溶解犬粪中细粒棘球绦虫可溶性抗原,且抗原抗体最佳结合浓度选用溶液体积不变情况下,多克隆血清占比20%与粪抗原结合。抗原抗体结合物通过凝胶层析柱在A峰(45.5~50.5 min附近)接收的样品中含有纯化的抗原抗体结合物。本研究的结果与方法可以为以后筛选鉴定靶抗原,提高粪抗原ELISA检测试剂盒的敏感性与特异性提供重要依据。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 棘球蚴 抗原抗体结合物
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抗细粒棘球绦虫疫苗候选抗原免疫犬IgG抗体水平监测及免疫组化定位研究 被引量：2
9
作者 赵莉 阿帕克孜.麦麦提 +8 位作者 王俊伟 张壮志 官亚婷 王冰洁 刘志强 穆尼拉.特列吾汗 刘明远 吕凤军 丁伟强 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期538-542,共5页
为探究细粒棘球绦虫(E.granulosus,Eg)成熟虫体(MAW)特异性蛋白(EgM)(EgM9、EgM123)的抗Eg感染保护效果,本研究利用Eg疫苗候选抗原EgM9和EgM123重组蛋白,分别3次免疫实验犬,利用ELISA法检测免疫犬血清中IgG、IFN-γ和IL-10的变化情况,... 为探究细粒棘球绦虫(E.granulosus,Eg)成熟虫体(MAW)特异性蛋白(EgM)(EgM9、EgM123)的抗Eg感染保护效果,本研究利用Eg疫苗候选抗原EgM9和EgM123重组蛋白,分别3次免疫实验犬,利用ELISA法检测免疫犬血清中IgG、IFN-γ和IL-10的变化情况,采用免疫组化法检测免疫犬肠系膜淋巴结和小肠中的特异性IgG抗体。结果显示,在第3次免疫后一周即免疫组犬抗体水平均最高时对其进行原头蚴攻击,攻毒后免疫组的抗体水平随之下降,且持续至第3次免疫后19周,免疫组均与对照组呈显著性差异(p<0.05);第3次免疫后一周免疫组犬血清中IFN-γ和IL-10水平均呈升高趋势,且至第3次免疫后23周剖检,免疫组犬的肠系膜淋巴结和小肠组织经免疫组化法均检测出特异性IgG抗体。表明用EgM重组蛋白免疫犬,可诱导其产生IgG抗体而发挥抗Eg感染保护效果,为终末宿主犬包虫病的免疫机理探究和疫苗及相关检测试剂的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 犬 EgM重组蛋白 抗体反应 免疫组织化学
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羊焦虫病的临床诊断与综合防制
10
作者 买吉提汗·乌拉孜哈力 穆尼拉·特列吾汗 努尔多拉·那斯诺拉 《北方牧业》 2024年第16期35-35,共1页
1流行特点羊焦虫病在羊的生长过程中比较常见,该病具有明显季节性,一般情况下,会在春、夏季感染焦虫病,因为春夏季节气候温暖、雨水充沛,比较适合寄生虫的繁殖和生长。据调查,焦虫病的发生与蜱虫的产生和消亡有密不可分的联系。该病的... 1流行特点羊焦虫病在羊的生长过程中比较常见,该病具有明显季节性,一般情况下,会在春、夏季感染焦虫病,因为春夏季节气候温暖、雨水充沛,比较适合寄生虫的繁殖和生长。据调查,焦虫病的发生与蜱虫的产生和消亡有密不可分的联系。该病的传播方式主要是通过蜱虫依附在羊的身体上吸血形成交叉感染,属于常见的寄生虫病,该病对于每个成长阶段的羊都具有传染性,染病后致死率也相当高,因此防制工作非常重要。 展开更多
关键词 焦虫病 交叉感染 临床诊断 寄生虫病 成长阶段 防制工作 致死率 蜱虫
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