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题名紫细菌光合色素指纹图谱的建立与色素分析
被引量：13
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作者
卓民权
赵春贵
程茜茹
杨素萍
曲音波
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机构
华侨大学生物工程与技术系
山东大学
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出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期760-768,共9页
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基金
国家自然科学基金(31070054)
福建省自然科学基金(2010J01209)
中国科学院城市环境与健康重点实验室基金(KLUEH201005)~~
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文摘
【目的】探索快速高效的色素样品制备方法;为建立紫细菌全色素TLC和HPLC标准指纹图谱和数据库提供研究方法和思路;为色素代谢与调控等研究提供快速的色素分析方法。【方法】选择沼泽红假单胞菌(Rhodopesudomonas palustris CQV97)为材料,采用改良丙酮甲醇提取法、TLC重复展层法、图像灰度分析法、吸收光谱法、HPLC和MS法进行色素分析。【结果】甲醇或丙酮可选择性地提取样品的细菌叶绿素和类胡萝卜素,通过对丙酮甲醇法的改良,使色素提取总量提高了13.5%。建立了CQV97菌株全色素的TLC和HPLC指纹图谱,二者均含有11种色素组分。图像灰度分析法估算了TLC指纹图谱各色素组分的表观相对含量。以TLC图谱的各色素组分为外标物,明确了HPLC图谱中各色素组分的保留时间(Rt)与TLC图谱中各色素组分的迁移率(Rf)之间的对应关系。结合色素代谢途径、光谱分析和MS,定性分析了指纹图谱中11种色素组分。TLC或HPLC分析结果表明,理论样品与对照样品色素组分和含量一致,而实际样品与对照样品色素组分一致,但含量不同,重复测定3次,样品中色素相对含量的RSD均小于5%。【结论】改良的丙酮甲醇法可以快速高效地提取光合细菌的色素。采用TLC重复展层法和HPLC法建立的全色素指纹图谱色素组成一致,重复稳定性好,各具特色。TLC和HPLC两种指纹图谱分析方法均能进行光合色素的快速分析,适合于紫细菌色素合成途径中主要积累色素的组分和含量变化规律研究。
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关键词
紫细菌
类胡萝卜素
细菌叶绿素
沼泽红假单胞菌
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Keywords
purple bacteria, carotenoids, bacteriochlorophylls, Rhodopesudomonas palustris
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分类号
Q936
[生物学—微生物学]
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题名沼泽红假单胞菌光合色素的分离、组成分析与光稳定性
被引量：2
- 2
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作者
程茜茹
赵春贵
卓民权
贾雅琼
杨素萍
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机构
华侨大学生物工程与技术系
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出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期26-34,共9页
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基金
国家自然科学基金项目(No.31070054
31270106)
+1 种基金
福建省自然科学基金项目(No.2010J01209
2012J01136)
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文摘
【目的】探求光对不产氧光合细菌类胡萝卜素(Car)和细菌叶绿素a(BChl a)稳定性的影响规律。【方法】以沼泽红假单胞菌CQV97为材料,采用硅胶柱层析和HPLC方法进行Car和BChl a组分的纯化和成分分析,采用吸收光谱法研究Car和BChl a组分的光稳定性。【结果】在Car和BChl a组分分离过程中,Car组分回收率高且稳定,而BChl a回收率波动性较大。Car组分中含有6种螺菌黄质系Car和极少量(<0.25%)的细菌脱镁叶绿素a。BChl a组分中包含BChl aGG、BChl aDHGG、BChl aTHGG和BChl aP4种成分。Car和BChl a组分在黑暗条件下非常稳定。2 000 lx白炽灯、日光灯和自然光照射时,Car在70 min内非常稳定,但对紫外光敏感,半衰期为11.15 min,BChl a组分对白炽灯、日光灯、自然光和紫外灯的光降解速率常数(min–1)分别为0.169 8、0.028 9、0.213 9和0.026 4,半衰期(min)分别为4.47、29.68、4.20和26.19。【结论】一步硅胶柱层析可同时得到Car和BChl a纯组分。Car对白光相对稳定,对紫外光不稳定。BChl光稳定性很差,分离过程中短期见光是导致BChl a回收率波动性较大的原因,光降解过程中产生了相对稳定的中间产物。该研究结果为光合色素的精制、功能研究和应用提供了理论依据。
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关键词
沼泽红假单胞菌
类胡萝卜素
细菌叶绿素
光稳定性
不产氧光合细菌
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Keywords
Rhodopseudomonas palustris, Carotenoid, Bacteriochlorophyll, Light stability,Anoxygenic phototrophic bacteria
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分类号
X172
[环境科学与工程—环境科学]
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