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高山被孢霉ATCC16266Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达 被引量:26
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作者 刘莉 李明春 +4 位作者 胡国武 葛军 张丽 程志 邢来君 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期161-164,共4页
Δ6 脂肪酸脱氢酶是形成γ 亚麻酸的关键酶。从含有高山被孢霉Δ6 脂肪酸脱氢酶基因的重组质粒pT MACL6中 ,酶切出 1 4kb的目的片段 ,亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体 pYES2 .0 ,在大肠杆菌中筛选到含有目的基因的重组质粒 pY... Δ6 脂肪酸脱氢酶是形成γ 亚麻酸的关键酶。从含有高山被孢霉Δ6 脂肪酸脱氢酶基因的重组质粒pT MACL6中 ,酶切出 1 4kb的目的片段 ,亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体 pYES2 .0 ,在大肠杆菌中筛选到含有目的基因的重组质粒 pYMAD6 ,用醋酸锂方法转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INCSc1中 ,在SC Ura合成培养基中 ,选择得到酿酒酵母工程株YMAD6。在合适的培养基及培养条件下 ,加入外源底物亚油酸 ,经半乳糖诱导后 ,收集菌体。通过GC MS对酵母工程株进行脂肪酸色谱分析 ,结果表明 ,产生了 31 6 %的γ 亚麻酸。这是迄今为止 ,国内外Δ6 脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中表达量最高的报道。 展开更多
关键词 △^6-脂肪酸脱氢酶基因 Γ-亚麻酸 酿酒酵母 表达 高山被孢霉
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新形势下开展微生物类课程教学改革的探索与实践 被引量:14
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作者 宋存江 王淑芳 +7 位作者 李国强 马挺 潘皎 杨超 魏东盛 程志 蔡峻 邓飞 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期598-602,共5页
生物科学和生物技术专业连续数年位列高考"红牌警告"专业;互联网+的飞速发展和智能手机的广泛使用,让教师和学生可以同时获得生物科学与技术的最新研究信息。在这样的新形势下如何开展微生物类课程教学?这是每一位专业教师必... 生物科学和生物技术专业连续数年位列高考"红牌警告"专业;互联网+的飞速发展和智能手机的广泛使用,让教师和学生可以同时获得生物科学与技术的最新研究信息。在这样的新形势下如何开展微生物类课程教学?这是每一位专业教师必须直面的课题。本文结合南开大学精品资源共享课"微生物发酵工程"的建设,结合理论教学、实验教学和实践教学"三位一体"的教学模式,谈谈我们对于微生物类课程教学的思考与实践探索。 展开更多
关键词 模块教学 案例教学 综合性研究型实验课 实践教学 “三位一体”教学模式 师德修养
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糖尿病足创面铜绿假单胞菌三型分泌系统和生物膜特点及与抗生素耐药性的关系 被引量:8
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作者 徐俊 霍爱梅 +5 位作者 王素 李梦君 柴周毅 程志 吴卫辉 王鹏华 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期135-142,共8页
目的探讨糖尿病足(diabetic foot,DF)创面中铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)三型分泌系统、生物膜特点,分析其与抗生素耐药性的关系。方法收集2018年2月1日至2018年12月31日天津医科大学朱宪彝纪念医院糖尿病足科住院DF患者创面... 目的探讨糖尿病足(diabetic foot,DF)创面中铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)三型分泌系统、生物膜特点,分析其与抗生素耐药性的关系。方法收集2018年2月1日至2018年12月31日天津医科大学朱宪彝纪念医院糖尿病足科住院DF患者创面中铜绿假单胞菌33株,作为DF组,同时收集非糖尿病创面中铜绿假单胞菌13株,作为对照组。做抗生素敏感试验,检测铜绿假单胞菌三型分泌系统毒力基因exoS、exoU及生物膜形成能力。分析其特点及与抗生素敏感性的关系和临床转归情况。结果两组均以携带exoS的铜绿假单胞菌为主。DF组占90.9%,对照组占84.6%,差异无统计学意义(χ^(2)=0.54,P=0.46)。携带exoS的多重耐药菌株在DF组占16.7%,对照组占18.2%,差异无统计学意义(χ^(2)=0.18,P=0.83)。携带exoU的铜绿假单胞菌共5株,DF组3株,1株多重耐药,对照组2株,无多重耐药株。DF组中生物膜增强的铜绿假单胞菌占57.6%,多重耐药株生物膜增强的占83.3%。两种铜绿假单胞菌产生的生物膜耐药性不同,但均对碳青霉烯类抗生素无效。产生生物膜的DF创面清创次数更多(P<0.01),抗生素使用时间更长(P<0.01),但愈合率在75%~90%。结论DF创面中以分泌exoS铜绿假单胞菌为主。DF创面中铜绿假单胞菌产生生物膜是其产生耐药的原因之一,通过多次清创联合敏感抗生素治疗是清除生物膜的有效方法。 展开更多
关键词 糖尿病足 铜绿假单胞菌 exoS基因 exoU基因 生物膜 抗生素耐药
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BcsT对Enterobacter sp.FY-07合成细菌纤维素的调控作用
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作者 高歌 程志 +4 位作者 曹艺严 刘丹 张一博 马挺 李国强 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期94-100,共7页
细菌纤维素是一种重要的大分子生物聚合物,具有广泛的应用价值.Enterobacter sp.FY-07可以在兼性厌氧条件下产生细菌纤维素,具有替代Gluconacetobacter xylinus应用于工业生产的潜力,但其合成细菌纤维素的调控机制仍不清楚.在进行代谢... 细菌纤维素是一种重要的大分子生物聚合物,具有广泛的应用价值.Enterobacter sp.FY-07可以在兼性厌氧条件下产生细菌纤维素,具有替代Gluconacetobacter xylinus应用于工业生产的潜力,但其合成细菌纤维素的调控机制仍不清楚.在进行代谢途径研究时发现Enterobacter sp.FY-07的细菌纤维素合成操纵子中含有一个未知基因bcsT.利用基因敲除、RT-qPCR、β-半乳糖苷酶活性测定以及凝胶迁移阻滞实验(EMSA)等手段证明了bcsT基因编码的蛋白BcsT是细菌纤维素合成操纵子的调控蛋白,对细菌纤维素的合成具有促进作用.这些结果对更好的了解并改造Enterobacter sp.FY-07进行工业生产具有重要的意义. 展开更多
关键词 细菌纤维素 兼性厌氧 bcsT基因 调控
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铜绿假单胞菌毒力相关小RNA的筛选与鉴定
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作者 陈谷奎 陈荣伟 +3 位作者 程志 金守光 吴卫辉 靳永新 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期52-59,共8页
小RNA在细菌的基因调控过程中具有重要的作用,然而目前在铜绿假单胞菌中仅发现了几种有功能的小RNA.铜绿假单胞菌中存在着许多短片段RNA(100-250 bp),然而这些短片段RNA的功能尚不清楚.为了筛选与铜绿假单胞菌毒力相关的小RNA,结合生物... 小RNA在细菌的基因调控过程中具有重要的作用,然而目前在铜绿假单胞菌中仅发现了几种有功能的小RNA.铜绿假单胞菌中存在着许多短片段RNA(100-250 bp),然而这些短片段RNA的功能尚不清楚.为了筛选与铜绿假单胞菌毒力相关的小RNA,结合生物信息学手段和实验检测技术对这些短片段RNA进行了靶点基因预测及相关表型研究.结果显示:利用小RNA靶点预测软件,筛选到23个毒力相关小RNA;通过构建小RNA过表达质粒,对这些小RNA进行了高表达及相关的表型检测,发现Pant116对铜绿假单胞菌的3型分泌系统具有负调控作用. 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 小RNA 靶点预测软件 3型分泌系统
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Mechanistic insights for efficient inactivation of antibiotic resistance genes: a synergistic interfacial adsorption and photocatalytic-oxidation process 被引量:1
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作者 Zhiruo Zhou Zhurui Shen +5 位作者 Zhihui Cheng Guan Zhang Mingmei Li Yi Li Sihui Zhan John C.Crittenden 《Science Bulletin》 SCIE EI CSCD 2020年第24期2107-2119,M0006,共14页
Advanced oxidation processes(AOPs) have been applied to address multiple environmental concerns including antibiotic resistance genes(ARGs). ARGs have shown an increasing threat to human health,and they are either har... Advanced oxidation processes(AOPs) have been applied to address multiple environmental concerns including antibiotic resistance genes(ARGs). ARGs have shown an increasing threat to human health,and they are either harbored by antibiotic-resistant bacteria(ARB) or free in the environment.However, the control of ARGs has been substantially limited by their low concentration and the limited knowledge about their interfacial behavior. Herein, a novel AOP catalyst, Ag/TiO_(2)/graphene oxide(GO),combined with a polyvinylidene fluoride(PVDF) ultrafiltration membrane was designed with a synergistic interfacial adsorption and oxidation function to inactivate ARGs with high efficiency in both model solutions and in secondary wastewater effluent, especially when the residue concentration was low.Further analysis showed that the mineralization of bases and phosphodiesters mainly caused the inactivation of ARGs. Moreover, the interfacial adsorption and oxidation processes of ARGs were studied at the molecular level. The results showed that GO was rich in sp^(2) backbones and functional oxygen groups,which efficiently captured and enriched the ARGs via p-p interactions and hydrogen bonds. Therefore,the photogenerated active oxygen species attack the ARGs by partially overcoming the kinetic problems in this process. The Ag/Ti O2/GO catalyst was further combined with a PVDF membrane to test its potential in wastewater treatment applications. This work offers an efficient method and a corresponding material for the inactivation and mineralization of intra/extracellular ARGs. Moreover, the molecularlevel understanding of ARG behaviors on a solid–liquid interface will inspire further control strategies of ARGs in the future. 展开更多
关键词 Trace contaminants Antibiotic resistance genes(ARGs) Synergistic adsorption and photocatalytic oxidation Interfacial behaviors
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