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抗凝蛋白EH体外活性检测条件的建立 被引量：5
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作者 秦晓永 于爱平 +6 位作者 王文文 毕建进 郭晓军 袁洪水 吴祖泽 靳继德 朱宝成 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期108-112,共5页
EH蛋白是一种水蛭素衍生物,它是在水蛭素的N端引入了一小段寡肽,该寡肽可被凝血因子XIa(factor XIa,FXIa)和Xa(factor Xa,FXa)裂解释放水蛭素的抗凝血酶活性。比较在不同条件下FXa裂解EH蛋白的效果,包括裂解时间(2h,4h,6h,8h,10h,20h)... EH蛋白是一种水蛭素衍生物,它是在水蛭素的N端引入了一小段寡肽,该寡肽可被凝血因子XIa(factor XIa,FXIa)和Xa(factor Xa,FXa)裂解释放水蛭素的抗凝血酶活性。比较在不同条件下FXa裂解EH蛋白的效果,包括裂解时间(2h,4h,6h,8h,10h,20h)、裂解温度(25℃,37℃,40℃),FXa与EH蛋白摩尔比(1∶300,1∶180,1∶60),反应溶液(水、生理盐水、裂解缓冲液)。分别采用凝块法和TH生色底物法检测EH蛋白经FXa裂解后的体外抗凝血酶活性。FXa对EH的裂解活性在一定条件下与反应时间和温度成正比,裂解活性随FXa的摩尔数增加而增强。反应溶液对其裂解活性影响较弱,其中生理盐水为最适裂解溶剂。最终确定EH体外活性检测时最适裂解条件为:用生理盐水稀释EH样品,FXa与EH的摩尔比为1∶180,在37℃裂解6h。此法裂解EH蛋白,操作方便,所测活性重现性好,适合作为EH蛋白质量控制中活性测定的方法。 展开更多
关键词 水蛭素 EH蛋白 抗凝活性 FXa
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