孟鲁司特钠联合地氯雷他定治疗小儿过敏性紫癜的临床疗效及安全性 被引量：24

1

作者 秦大妮 雷勇 周泽民 《临床合理用药杂志》 2017年第15期14-15,共2页

目的探讨孟鲁司特钠联合地氯雷他定治疗小儿过敏性紫癜的临床疗效及安全性。方法选取江苏大学附属宜兴市人民医院儿科2014年1月—2016年1月收治的过敏性紫癜患儿80例,根据随机数字表法分为对照组和治疗组,各40例。对照组患儿给予常规治... 目的探讨孟鲁司特钠联合地氯雷他定治疗小儿过敏性紫癜的临床疗效及安全性。方法选取江苏大学附属宜兴市人民医院儿科2014年1月—2016年1月收治的过敏性紫癜患儿80例,根据随机数字表法分为对照组和治疗组,各40例。对照组患儿给予常规治疗,治疗组患儿在对照组基础上给予孟鲁司特钠联合地氯雷他定治疗,比较两组患儿的临床疗效及皮疹、消化道症状、关节症状消失时间、住院时间,并观察患儿不良反应发生情况。结果治疗组患儿治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗组患儿皮疹、消化道症状、关节症状消失时间及住院时间短于对照组(P<0.05),两组患儿均未出现严重不良反应。结论采用孟鲁司特钠联合地氯雷他定治疗小儿过敏性紫癜的临床疗效确切,可有效改善患儿的临床症状,缩短住院时间,且安全性高。 展开更多

关键词 紫癜 过敏性 孟鲁司特钠 地氯雷他定 治疗结果

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NYGGF4基因过表达对成熟脂肪细胞线粒体形态及动力学的影响 被引量：11

2

作者 朱冠忠 张春梅 +5 位作者 朱春 朱金改 赵亚萍 秦大妮 寇春兆 郭锡熔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期480-482,共3页

目的探讨NYGGF4基因过表达对成熟3T3-L1脂肪细胞线粒体形态及动力学的影响。方法以3T3-L1前体脂肪细胞为载体,建立NYGGF4基因稳定过表达细胞株,以空载质粒转染的细胞为对照,将前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞。采用透射电镜观察成... 目的探讨NYGGF4基因过表达对成熟3T3-L1脂肪细胞线粒体形态及动力学的影响。方法以3T3-L1前体脂肪细胞为载体,建立NYGGF4基因稳定过表达细胞株,以空载质粒转染的细胞为对照,将前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞。采用透射电镜观察成熟脂肪细胞的线粒体形态,采用荧光定量PCR技术检测成熟脂肪细胞中线粒体融合基因(Mfn)1 mRNA、Mfn2 mRNA、线粒体动态相关基因(Drp)1 mRNA的表达水平。采用Western blot方法检测Mfn1蛋白、Mfn2蛋白、Drp1蛋白的表达水平。结果 1.电镜观察发现NYGGF4基因过表达的成熟脂肪细胞线粒体体积变小、数量明显减少,线粒体嵴断裂、减少、消失,部分线粒体肿胀,甚至呈空泡状;对照组成熟脂肪细胞的线粒体形态基本正常,线粒体嵴清晰可见,线粒体无明显肿胀、皱缩。2.NYGGF4基因过表达成熟脂肪细胞Mfn1 mRNA及Mfn1蛋白表达水平均显著高于对照组。3.NYGGF4基因过表达成熟脂肪细胞的Mfn2 mRNA、Drp1mRNA及相应蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义。结论在3T3-L1成熟脂肪细胞中,NYGGF4基因过表达可导致线粒体形态发生变化、数量减少,同时上调Mfn1 mRNA和Mfn1蛋白表达水平,提示NYGGF4基因在成熟脂肪细胞中过表达能影响细胞线粒体形态及动力学。 展开更多

关键词 NYGGF4基因 线粒体 线粒体融合蛋白 3T3-L1脂肪细胞

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MicroRNA-19b过表达通过Wnt／β-catenin通路对P19细胞的影响 被引量：4

3

作者 刘雪华 秦大妮 +7 位作者 朱莎莎 李萌萌 余章斌 韩树萍 胡晓山 朱金改 朱春 彭宇竹 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期371-374,共4页

目的MicroRNA（miR）-19b是通过芯片筛选出与心脏发育高度相关的-种miRNA，本研究旨在研究miR-19b通过Wnt／β-catenin信号通路对P19细胞的影响。方法生物信息学软件预测miR-19b潜在靶基因；双荧光素酶报告基因验证miR-19b是否作用于Wn... 目的MicroRNA（miR）-19b是通过芯片筛选出与心脏发育高度相关的-种miRNA，本研究旨在研究miR-19b通过Wnt／β-catenin信号通路对P19细胞的影响。方法生物信息学软件预测miR-19b潜在靶基因；双荧光素酶报告基因验证miR-19b是否作用于Wnt的预测靶点；脂质体2000转染miR-19b过表达质粒与空载质粒进入P19细胞；CCK-8法检测细胞增殖活性；磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡；Westernblot检测Wntl表达水平；实时定量-聚合酶链反应（PCR）检测miRNA-19b表达水平。结果TargetScan5．1软件预测Wntl为miR-19b在P19细胞中发挥作用的潜在靶点，双荧光素酶报告基因进行了验证，miR-19b过表达显著降低了靶基因Wnt的活性（P〈0．05）；miR-19b过表达降低了wnt信号通路中Wntl和B—catenin的表达水平，两者水平表达一致，于第2天至第10天均有统计学差异（P均〈0．05）。与空载对照组相比，miRNA-19b可促进P19细胞的增殖（各时间点P〈0．05），并且抑制其凋亡（P〈0．05）。结论miR-19b可能通过Wnt／β-catenin信号通路促进P19细胞的增殖，抑制凋亡，为其以后用于心脏发育的进一步研究奠定基础。 展开更多

关键词 MICRORNA 19b P19细胞 WNT通路

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小剂量依托红霉素对哮喘患儿急性发作肺功能及血清Gal-3、TGF-β1水平的影响 被引量：3

4

作者 雷勇 秦大妮 +1 位作者 鲍莉 惠郁 《临床肺科杂志》 2017年第12期2171-2174,共4页

目的 :探讨小剂量依托红霉素对哮喘急性发作患儿肺功能及血清Gal-3、TGF-β1表达水平的影响。方法选择经诱导痰分析的80例多叶核中性白细胞型哮喘患儿随机分为观察组与对照组两组,各40例,两组采用常规综合治疗,观察组加用依托红霉素口... 目的 :探讨小剂量依托红霉素对哮喘急性发作患儿肺功能及血清Gal-3、TGF-β1表达水平的影响。方法选择经诱导痰分析的80例多叶核中性白细胞型哮喘患儿随机分为观察组与对照组两组,各40例,两组采用常规综合治疗,观察组加用依托红霉素口服治疗。比较两组患儿肺通气功能及血清Gal-3、TGF-β1表达水平差异。结果两组患儿治疗后的肺功能指标(FEV_(1.0)/FVC,FEV_(1.0))均较治疗前明显升高,且观察组明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患儿血清中Gal-3与TGF-β1表达水平均明显降低,与治疗前相比,差异均具有统计学意义(P<0.05),且观察组明显低于对照组(P<0.05)。结论小剂量依托红霉素能够显著改善哮喘急性发作患儿的肺功能,降低血清中Gal-3与TGF-β1表达水平。 展开更多

关键词 依托红霉素 哮喘急性发作 半乳糖凝集素-3 转化生长因子-β1 儿童

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STEAP4抗体干预对人前体脂肪细胞内活性氧、线粒体膜电位的影响 被引量：3

5

作者 秦大妮 季晨博 +3 位作者 朱春 寇春兆 朱金改 郭锡熔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期1461-1463,共3页

目的探讨STEAP4抗体干预对人前体脂肪细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位的影响。方法应用锥虫蓝活性试验对细胞活性进行检测,并进一步确定STEAP4抗体原液按1:250的比例稀释。体外培养人前体脂肪细胞,应用质量浓度为0.5g.L-1的STEAP4抗体,... 目的探讨STEAP4抗体干预对人前体脂肪细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位的影响。方法应用锥虫蓝活性试验对细胞活性进行检测,并进一步确定STEAP4抗体原液按1:250的比例稀释。体外培养人前体脂肪细胞,应用质量浓度为0.5g.L-1的STEAP4抗体,按1:250的比例稀释后(即质量浓度为0.125g.L-1)干预人前体脂肪细胞。应用激光共聚焦显微镜拍照,定性、定量分析ROS、线粒体膜电位变化。结果 STEAP4抗体按1:250比例稀释作用于人前体脂肪细胞后,可显著降低细胞活性;人前体脂肪细胞在STEAP4抗体按1:250稀释浓度干预下,细胞内ROS水平显著增加、线粒体膜电位水平显著降低,差异均有统计学意义(Pa<0.05)。结论 STEAP4抗体按1:250比例稀释后,作用于人前体脂肪细胞后可显著提高ROS水平、降低其线粒体膜电位,推测STEAP4基因影响胰岛素敏感性的机制可能涉及线粒体功能变化。 展开更多

关键词 人前体脂肪细胞 STEAP4抗体 活性氧 膜电位

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人脂肪组织中NYGGF4基因转录本检测 被引量：1

6

作者 邱洁 王玢 +4 位作者 朱春 朱金改 秦大妮 寇春兆 郭锡熔 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2009年第35期5039-5040,共2页

目的:探讨肥胖相关新基因NYGGF4在人脂肪组织中转录本的大小及是否存在剪切异构体。方法:采用Northern blot技术检测NYGGF4基因在人脂肪组织中的表达情况。结果:检测到一条大小1.5kb左右的条带,与数据库中NYGGF4 mRNA长度一致,未检测到... 目的:探讨肥胖相关新基因NYGGF4在人脂肪组织中转录本的大小及是否存在剪切异构体。方法:采用Northern blot技术检测NYGGF4基因在人脂肪组织中的表达情况。结果:检测到一条大小1.5kb左右的条带,与数据库中NYGGF4 mRNA长度一致,未检测到其他转录本。结论:NYGGF4基因在人脂肪组织中的转录本大小约为1.5kb,并不存在剪切异构体。 展开更多

关键词 肥胖 NYGGF4基因 转录本

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基于高通量测序技术观察哮喘患儿上呼吸道菌群多样性的变化

7

作者 秦大妮 马铁梁 +4 位作者 沈惠平 雷勇 魏萍 蒋益 戴标 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2023年第6期493-497,共5页

目的:分析哮喘患儿上呼吸道菌群定植种类和数量与健康儿童之间的差异。方法:选择2020年10月至2021年10月我院收治的8例学龄前哮喘患儿入哮喘组,另纳入18例同期在我院体检的健康儿童为对照组,分析两组之间呼吸道菌群种类及数量的差异。结... 目的:分析哮喘患儿上呼吸道菌群定植种类和数量与健康儿童之间的差异。方法:选择2020年10月至2021年10月我院收治的8例学龄前哮喘患儿入哮喘组,另纳入18例同期在我院体检的健康儿童为对照组,分析两组之间呼吸道菌群种类及数量的差异。结果:16S rDNA测序结果显示,哮喘患儿上呼吸道菌群物种丰富度及多样性增加,菌群结构发生显著变化。哮喘组和对照组共有扩增子序列变异(amplicon sequence variants,ASVs)375个,特有ASVs分别为889个和1037个,哮喘组菌群ASVs相较于对照组发生显著变化。在门水平,与对照组比较,哮喘组中厚壁菌门的相对丰度明显下降(P<0.01),放线菌门(Actinobacteria)、梭杆菌门(Fusobacteria)、弯曲杆菌门(Campilobacterota)的相对丰度明显增加(P<0.05)。在属水平,与对照组比较,哮喘组链球菌属、鞘氨醇单胞菌属相对丰度减少,奈瑟菌属(Neisseria)相对丰度明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:哮喘患儿上呼吸道菌群在种类和数量上与健康儿童之间存在显著差异,且哮喘患儿存在呼吸道菌群紊乱状态。 展开更多

关键词 哮喘 儿童 上呼吸道菌群 菌群多样性 16S rDNA测序

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miRNA-19b过表达对P19细胞分化的影响 被引量：1

8

作者 杨利民 王淮燕 +4 位作者 许国锋 刘雪华 秦大妮 余章斌 王永清 《临床和实验医学杂志》 2015年第15期1255-1259,共5页

目的通过过表达miRNA-19b,研究miRNA-19b对P19细胞分化的影响。方法脂质体2000转染miRNA-19b过表达质粒与空载质粒进入P19细胞,通过杀稻瘟菌素筛选出稳定株;实时定量聚合酶链反应检测miRNA-19b表达水平以及分化基因(c Tn T、ANP、GATA4... 目的通过过表达miRNA-19b,研究miRNA-19b对P19细胞分化的影响。方法脂质体2000转染miRNA-19b过表达质粒与空载质粒进入P19细胞,通过杀稻瘟菌素筛选出稳定株;实时定量聚合酶链反应检测miRNA-19b表达水平以及分化基因(c Tn T、ANP、GATA4)的表达水平。结果 miRNA-19b过表达载体与细胞系成功建立(P<0.05);在P19细胞分化过程中,miRNA-19b过表达组心肌标志物均显著高于对照组(P均<0.05)。miRNA-19b显著促进P19细胞向心肌细胞分化。结论 miRNA-19b可以显著促进P19细胞向心肌细胞的分化,为以后其用于心脏发育的进一步研究奠定基础。 展开更多

关键词 miRNA-19b P19细胞 分化

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LYRM1基因过表达对大鼠骨骼肌细胞线粒体功能的影响 被引量：1

9

作者 寇春兆 张敏 +4 位作者 曹新国 秦大妮 季晨博 邱洁 郭锡熔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期1467-1469,共3页

目的评价LYRM1基因过表达对成熟骨骼肌细胞线粒体功能的影响。方法体外培养大鼠骨骼肌细胞株(L6),分别将pcDNA3.1及LYRM1-pcDNA3.1转染L6,通过G418筛选稳定表达株,应用Western blot技术验证其转染情况。诱导L6分化成熟后电镜观察线粒体... 目的评价LYRM1基因过表达对成熟骨骼肌细胞线粒体功能的影响。方法体外培养大鼠骨骼肌细胞株(L6),分别将pcDNA3.1及LYRM1-pcDNA3.1转染L6,通过G418筛选稳定表达株,应用Western blot技术验证其转染情况。诱导L6分化成熟后电镜观察线粒体形态;经Mitotracker red染色,应用流式细胞仪检测线粒体膜电位变化。结果 Western blot技术证实LYRM1表达质粒转染成功;LYRM1-pcDNA3.1组细胞线粒体凝集、形态扭曲变形及线粒体空泡化、线粒体嵴排列不规则,甚至断裂、溶解、消失;流式细胞仪检测结果显示LYRM1-pcDNA3.1组荧光值为3.7667±0.1007,pcDNA3.1组荧光值为8.7633±0.2286,二组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LYRM1基因在骨骼肌细胞中过表达能明显改变线粒体形态,降低骨骼肌细胞线粒体的膜电位,提示LYRM1基因在骨骼肌细胞中过表达影响了线粒体的功能。 展开更多

关键词 肥胖 LYRM1基因 骨骼肌细胞 线粒体 膜电位

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STEAP4基因蛋白铁氧化还原酶活性分析 被引量：1

10

作者 秦大妮 季晨博 +3 位作者 张春梅 史春梅 朱冠忠 郭锡熔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期485-486,496,共3页

目的分析肥胖相关基因STEAP4的铁氧化还原酶活性。方法体外温箱培养昆虫细胞株(Sf9),分别将pAcSec1-STEAP4转移载体和pAcSec1-vector转移载体与SapphireTM杆状病毒基因组混合后共转染Sf9昆虫细胞,通过G418药物筛选稳定表达STEAP4蛋白的... 目的分析肥胖相关基因STEAP4的铁氧化还原酶活性。方法体外温箱培养昆虫细胞株(Sf9),分别将pAcSec1-STEAP4转移载体和pAcSec1-vector转移载体与SapphireTM杆状病毒基因组混合后共转染Sf9昆虫细胞,通过G418药物筛选稳定表达STEAP4蛋白的细胞株,并抽提细胞总蛋白进一步应用Western blot技术验证其转染情况。应用分光光度计法检测铁氧化还原酶活性。应用SPSS11.5软件进行统计学分析。结果 Western blot技术证实STEAP4过表达细胞株构建成功;分光光度计法检测STEAP4铁氧化还原酶活性,STEAP4过表达组A值为5.182 5±0.230 4,空载组A值为1.615 0±0.822 6,STEAP4过表达组铁氧化还原酶活性明显高于空载组,差异有统计学意义(Pa<0.001)。结论 STEAP4基因蛋白具有铁氧化还原酶活性。 展开更多

关键词 肥胖 STEAP4基因 铁氧化还原酶活性

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肿瘤坏死因子-α对人脂肪细胞STEAP4蛋白膜转位的影响及其机制

11

作者 邱洁 周晓玉 +3 位作者 程锐 季晨博 秦大妮 郭锡熔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期1481-1482,共2页

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人脂肪细胞STEAP4蛋白膜转位的影响,并分析其可能的机制。方法应用1-甲基-3-异丁基黄嘌呤(MIX)、地塞米松、胰岛素、罗格列酮方案诱导人前体脂肪细胞分化,以人重组TNF-α或加用细胞外信号调节蛋白激酶... 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人脂肪细胞STEAP4蛋白膜转位的影响,并分析其可能的机制。方法应用1-甲基-3-异丁基黄嘌呤(MIX)、地塞米松、胰岛素、罗格列酮方案诱导人前体脂肪细胞分化,以人重组TNF-α或加用细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)抑制剂PD-98059干预人成熟脂肪细胞24 h,采用Western blot技术检测细胞膜蛋白与总蛋白中STEAP4蛋白的表达。结果 TNF-α干预能显著促进人成熟脂肪细胞中STEAP4蛋白向细胞膜转位;ERK抑制剂PD-98059联合TNF-α与单独应用TNF-α诱导人成熟脂肪细胞的细胞膜蛋白和总蛋白中STEAP4蛋白的表达水平比较均无显著差异。结论 TNF-α干预显著促进人成熟脂肪细胞中STEAP4蛋白的膜转位,初步排除丝裂原活化蛋白激酶信号途径参与这一调控机制。 展开更多

关键词 肥胖 STEAP4 肿瘤坏死因子-A

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多氯联苯暴露对斑马鱼视网膜形态学及CRX基因表达的影响 被引量：4

12

作者 王艳萍 洪琴 +5 位作者 寇春兆 秦大妮 郭梅 池霞 郭锡熔 童梅玲 《中国儿童保健杂志》 CAS 2010年第12期963-966,共4页

【目的】探讨环境有机污染物多氯联苯暴露对斑马鱼视网膜形态学及视锥-视杆同源盒基因(cone-rod ho-meobox,CRX)表达的影响。【方法】以斑马鱼为模式生物,配制1.0、0.5、0.25、0.125 mg/L 4个不同浓度的多氯联苯对斑马鱼胚胎进行暴露处... 【目的】探讨环境有机污染物多氯联苯暴露对斑马鱼视网膜形态学及视锥-视杆同源盒基因(cone-rod ho-meobox,CRX)表达的影响。【方法】以斑马鱼为模式生物,配制1.0、0.5、0.25、0.125 mg/L 4个不同浓度的多氯联苯对斑马鱼胚胎进行暴露处理,同时设空白对照和0.01%甲醇对照组,观察多氯联苯暴露对斑马鱼幼鱼存活率、视网膜形态学及CRX基因表达变化情况。【结果】1)低浓度(0.125 mg/L)多氯联苯暴露对斑马鱼幼鱼的存活率、视网膜形态学、CRX基因表达均无明显影响;2)中、高浓度(0.25 mg/L以上)的多氯联苯暴露96 hpf后,斑马鱼存活率明显下降;视网膜总厚度、神经节细胞层、感光细胞层厚度均较对照组明显增厚(P<0.05),感光细胞层细胞排列紊乱,同时在1 mg/L多氯联苯暴露组中可见感光细胞数明显减少;中、高浓度的多氯联苯暴露组CRX基因表达均较对照组明显降低(P<0.05)。【结论】中、高浓度的多氯联苯暴露对斑马鱼视网膜尤其是感光细胞层产生明显的毒害作用,必须加强对环境有机污染物的监测和控制。 展开更多

关键词 多氯联苯 斑马鱼 视网膜 形态学 CRX基因 realtimePCR

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小鼠WNT1基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体的构建 被引量：2

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作者 秦大妮 周泽民 +2 位作者 沈惠平 余章斌 韩树萍 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期987-989,993,共4页

目的构建小鼠WNT1基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测其在P19细胞中的表达。方法采用PCR方法获得WNT1基因启动子最小功能单位和3'UTR区域在内的DNA片段。双酶切后插入到pGL3-Basic载体中构成重组表达载体,使萤火虫荧光... 目的构建小鼠WNT1基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测其在P19细胞中的表达。方法采用PCR方法获得WNT1基因启动子最小功能单位和3'UTR区域在内的DNA片段。双酶切后插入到pGL3-Basic载体中构成重组表达载体,使萤火虫荧光素酶报告基因的表达受WNT1启动子控制。将构建的重组表达载体或pGL3-Basic载体分别与内参质粒pRL-SV40(表达海肾荧光素酶)共转染P19细胞,24 h后用双荧光检测试剂盒测定萤火虫荧光素酶及海肾荧光素酶活性。结果重组表达载体经双酶切及测序鉴定证明构建正确,空白对照组(荧光强度比值:2.820 4±0.294 4)与对照组(荧光强度比值:3.050 8±0.303 7)及WNT-3'UTR突变组(荧光强度比值:51.475 8±0.983 7)比较,差异均有统计学意义(Pa<0.001),该重组表达载体在P19细胞特异性高表达萤火虫荧光素酶。结论成功构建小鼠WNT1基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测到该载体在P19细胞的特异性表达。 展开更多

关键词 WNT1 P19细胞 pGL3-Basic 基因表达载体构建 萤火虫荧光素酶

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