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基于颜色判定的RT-LAMP技术检测HCoV-OC43冠状病毒 被引量：5
1
作者 耿合员 汪圣强 +7 位作者 吴海磊 易海华 于九洋 孙悦 邢琛 丁均 秋雯 曹晓蕴 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2018年第3期153-158,共6页
目的 建立基于颜色判定的适用于国境口岸简便、快速、灵敏和特异的逆转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法检测人冠状病毒OC43(HCoV-OC43)核酸。方法 通过序列比对,选择HCo... 目的 建立基于颜色判定的适用于国境口岸简便、快速、灵敏和特异的逆转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法检测人冠状病毒OC43(HCoV-OC43)核酸。方法 通过序列比对,选择HCoV-OC43(Gen Bank号:KU131570)为参考株,根据其核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白基因保守区序列设计6条特异性引物,在65℃等温条件下扩增45min。在扩增前加入钙黄绿素作为反应指示剂,以最终反应颜色变化作为结果判断标准。对病毒核酸依次倍比稀释以检验该方法的灵敏性;同时,对甲型、乙型流感病毒和其他HCoV进行检测,以检验该方法的特异性。结果 通过引物筛选最终选定了1组特异性引物,仅能与HCoV-OC43病毒核酸产生特异性反应并出现颜色改变,而与其他病毒均不能产生颜色变化,具有较高的特异性。与常规荧光定量RT-PCR法相比,该方法检测灵敏度达5.6拷贝/反应,灵敏度更高,且在短时间内达到对HCoV-OC43基因快速检测的目的。结论 建立的基于颜色判定的RT-LAMP方法可实现对HCoV-OC43病毒快速、灵敏、特异性检测,具有在国境口岸以及基层医疗机构和疫区现场推广应用的潜力。 展开更多
关键词 人冠状病毒 逆转录环介导等温扩增 可视化检测
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抗菌肽CM4与绿色荧光蛋白融合基因的真核载体构建及表达 被引量：1
2
作者 陈玉清 张双全 +2 位作者 焦波 秋雯 张杰 《生物技术通讯》 CAS 2008年第1期8-10,共3页
目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)与抗菌肽CM4融合基因的真核表达载体。方法:采用递归PCR(rPCR)将GFP基因与CM4基因通过一段核苷酸片段连接成GFP-CM4融合基因,构建真核表达载体pcDNA3-GFP-CM4,用脂质体介导转染人K562白血病细胞,用MTT检测其... 目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)与抗菌肽CM4融合基因的真核表达载体。方法:采用递归PCR(rPCR)将GFP基因与CM4基因通过一段核苷酸片段连接成GFP-CM4融合基因,构建真核表达载体pcDNA3-GFP-CM4,用脂质体介导转染人K562白血病细胞,用MTT检测其活性。结果:融合基因可在K562细胞中表达,抗菌肽CM4的表达可抑制K562细胞的生长。结论:为全面了解抗菌肽的生物学活性及其在基因治疗中的可能作用提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 抗菌肽CM4 绿色荧光蛋白 真核表达 K562细胞
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抗菌抗癌肽CM4N在大肠杆菌中的融合表达与活性鉴定 被引量：2
3
作者 陈玉清 秋雯 +2 位作者 焦波 张杰 张双全 《药物生物技术》 CAS CSCD 2008年第3期161-165,共5页
为探讨内含肽intein在抗菌肽表达与纯化中的应用,采用递归PCR法合成CM4末端添加Asn的基因CM4N,克隆至E.coli表达载体pTYB11中,构建了与intein的C端融合的表达载体pTYB11-CM4N。重组质粒转化至E.coliBL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,融合蛋... 为探讨内含肽intein在抗菌肽表达与纯化中的应用,采用递归PCR法合成CM4末端添加Asn的基因CM4N,克隆至E.coli表达载体pTYB11中,构建了与intein的C端融合的表达载体pTYB11-CM4N。重组质粒转化至E.coliBL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,融合蛋白intein-CM4N主要以可溶形式存在于胞内。利用载体中intein中的chitin结合域,将融合蛋白通过chitin亲和层析一步纯化,经DTT诱导intein的自我切割活性,实现CM4N在亲和柱上的切割与分离,透析冻干后得到了纯度95%以上的重组CM4N。活性检测结果显示,重组CM4N具有抗大肠杆菌、沙门氏菌和K562肿瘤细胞的活性。研究认为,内含肽在抗菌肽的基因工程中可能具有重要的应用前景。 展开更多
关键词 抗菌肽CM4 原核表达 intein融合 活性
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网络文学语言对传统文学的突破 被引量：4
4
作者 汤志国 孟隋尹 秋雯 《长沙铁道学院学报（社会科学版）》 2007年第2期107-108,共2页
网络文学语言之于传统文学具有突出的“异在性”特征,即它有不同于传统文学语言之处,又有超越传统语言的一些显著特征。最能体现网络语言特性的是三个相关联的特征,这三个特征形成了它之于传统文学的“异在性”:一,“片段引入效应”既... 网络文学语言之于传统文学具有突出的“异在性”特征,即它有不同于传统文学语言之处,又有超越传统语言的一些显著特征。最能体现网络语言特性的是三个相关联的特征,这三个特征形成了它之于传统文学的“异在性”:一,“片段引入效应”既有古典美学意和境、情和景的结合,又包含了漫画(视觉)文化的流行元素;二,语言界限的“内爆”就是指在语言和语言逻辑内部瞬间消除区别的过程,“内爆”之后,一切都相互交叠、一切都相互渗透,原本对立的概念不再对立;三,语言的“去理性化”,这是传播媒介对文学内容的一种规定性。 展开更多
关键词 网络文学 语言特征 镶嵌式 内爆 去理性化
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2015年无锡空港口岸入境人员传染病监测结果分析 被引量：2
5
作者 顾海俊 秋雯 +3 位作者 丁均 黄玮 曹晓蕴 钱学铭 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2016年第2期95-98,共4页
目的分析无锡空港口岸入境人员传染病监测资料,寻找更科学和高效的检疫手段,指导口岸传染病防控。方法对2015年无锡空港口岸入境人员中有呼吸道或消化道传染病症状或体征者的流行病学调查资料和实验室检测结果进行统计,分析地区分布、... 目的分析无锡空港口岸入境人员传染病监测资料,寻找更科学和高效的检疫手段,指导口岸传染病防控。方法对2015年无锡空港口岸入境人员中有呼吸道或消化道传染病症状或体征者的流行病学调查资料和实验室检测结果进行统计,分析地区分布、时间分布、主要症状、性别分布、发现方式。结果 2015年,无锡空港口岸共发现有传染病症状人员285名,采集样本285份,病原体检测阳性60份,其中呼吸道病原体阳性51份,消化道病原体阳性9份。有症状人员在各年龄段均有分布,性别差异无统计学意义,有症状人员的发现方式以仪器为主;有症状人员主要来自中国香港、中国台湾和中国澳门;主要分布在冬春季节;病原体检测阳性的入境人员的腋下体温明显高于其他人员。结论无锡空港口岸应加强来自中国香港、中国台湾和中国澳门的入境旅客的检疫查验,在冬春季节加强旅客查验工作。 展开更多
关键词 入境人员 流行病学调查
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JWA编码区PKC磷酸化位点突变对佛波酯诱导MCF-7细胞分化的影响 被引量：2
6
作者 叶健 李爱萍 +2 位作者 秋雯 周进红 周建伟 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期398-401,共4页
目的探讨JWA蛋白PKC磷酸化位点对TPA诱导的MCF-7细胞分化的影响。方法利用连续PCR引入点突变技术构建JWA编码区PKC磷酸化位点1、2以及两位点同时突变的三种pEGFP-N1载体,脂质体稳定转染获得相应的三种MCF-7细胞株,油红O染色观察细胞分... 目的探讨JWA蛋白PKC磷酸化位点对TPA诱导的MCF-7细胞分化的影响。方法利用连续PCR引入点突变技术构建JWA编码区PKC磷酸化位点1、2以及两位点同时突变的三种pEGFP-N1载体,脂质体稳定转染获得相应的三种MCF-7细胞株,油红O染色观察细胞分化状态。结果20μmol/L TPA处理MCF-7-N1(稳定转染pEGFP-N1载体的MCF-7细胞)、MCF-7-JWA(稳定转染pEGFP-N1-JWA载体的MCF-7细胞)、MCF-7-JWA-1、MCF-7-JWA-2、MCF-7-JWA-1+2细胞2d后,油红O染色阳性细胞百分比分别为48%、67%、69%、67%、70%。与MCF-7-N1相比,TPA诱导MCF-7- JWA、MCF-7-JWA-1、MCF-7-JWA-2、MCF-7-JWA-1+2细胞分化率(油红O染色阳性细胞百分比)显著升高(P<0.05),但MCF-7-JWA、MCF-7-JWA-1、MCF-7-JWA-2、MCF-7-JWA-1+2细胞分化率,差异无统计学意义(P>0.05)。结论稳定转染JWA能增强TPA诱导的MCF-7细胞分化;JWA编码区PKC磷酸化位点突变并不影响TPA诱导MCF-7细胞分化,可能存在其他的分子机制。 展开更多
关键词 JWA TPA PKC 细胞分化
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2015年苏南硕放国际机场入境旅客发热情况分析 被引量：1
7
作者 顾海俊 曹晓蕴 +4 位作者 秋雯 丁均 黄玮 贡佳鸣 钱学铭 《口岸卫生控制》 2016年第6期28-31,共4页
目的了解2015年苏南硕放国际机场入境人员发热情况,为今后的旅客检疫工作提供参考性建议。方法对入境发热人员的基本情况和发现方式进行记录,对所有入境发热人员的人口学特征、入境时间、来源和发现方式进行描述性分析。结果入境发热旅... 目的了解2015年苏南硕放国际机场入境人员发热情况,为今后的旅客检疫工作提供参考性建议。方法对入境发热人员的基本情况和发现方式进行记录,对所有入境发热人员的人口学特征、入境时间、来源和发现方式进行描述性分析。结果入境发热旅客性别差异不显著,中青年为主,旅客数量在春节前后大幅增多;确诊病例的旅客主要来源于港澳台地区和东南亚地区;医学巡查和主动申报发现的发热旅客所占比例逐渐升高。结论苏南硕放国际机场入境发热旅客呈现出明显的人口学特征和时间/空间分布规律,应加强对重点人群的体温监测和医学巡查,加大对旅客的宣传力度,并且积极进行相关知识技能的培训以适应新时代的旅客检疫工作。 展开更多
关键词 发热 苏南硕放国际机场 入境 旅客
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无锡空港口岸航空器空气质量和微小气候监测分析 被引量：1
8
作者 顾海俊 曹晓蕴 +3 位作者 秋雯 张勇 朱京京 李宗 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2012年第3期203-204,216,共3页
目的了解无锡空港口岸航空器客舱内微小气候与空气质量情况,为进一步提升卫生监督质量,保障国际旅行者身体健康提供科学依据。方法对深圳航空公司在无锡空港口岸执行飞行任务的航空器客舱内的空气质量与微小气候现状进行了监测,对不同... 目的了解无锡空港口岸航空器客舱内微小气候与空气质量情况,为进一步提升卫生监督质量,保障国际旅行者身体健康提供科学依据。方法对深圳航空公司在无锡空港口岸执行飞行任务的航空器客舱内的空气质量与微小气候现状进行了监测,对不同载客量情况下进行了空气质量状况对比研究,并采用空气质量综合评价指数法对监测结果进行评价。结果在1年的监测周期中,空气质量综合评价指数在0.21~0.50之间,空气污染指数属于一级和二级,空气质量综合评价指数在空舱与50%载客量时进行比较,差异有统计学意义（P=0.016）;与满员时进行比较,差异有统计学意义（P=0.003）。结论无锡空港口岸国际通航航空器卫生状况良好,微小气候与空气质量评价指标大部分符合国家卫生标准,出入境检验检疫部门应进一步有针对性地加强卫生监督管理。 展开更多
关键词 口岸 航空器 微小气候 质量 监测
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无锡空港口岸航空器微小气候与空气质量分析 被引量：1
9
作者 曹晓蕴 李宗 +3 位作者 朱京京 秋雯 杨志俊 姚峰 《口岸卫生控制》 2012年第4期14-16,共3页
目的了解无锡空港口岸航空器客舱内微小气候与空气质量情况,为进一步提升卫生监督质量,保障国际旅行者身体健康提供科学依据。方法对深圳航空公司在无锡空港口岸执勤的航空器进行客舱内的微小气候与空气质量监测,并在载客量异同的情况... 目的了解无锡空港口岸航空器客舱内微小气候与空气质量情况,为进一步提升卫生监督质量,保障国际旅行者身体健康提供科学依据。方法对深圳航空公司在无锡空港口岸执勤的航空器进行客舱内的微小气候与空气质量监测,并在载客量异同的情况下进行了空气质量状况对比研究。结果在一年的监测周期中,相对湿度合格率为87.5%,CO2浓度合格率为91.7%,细菌总数合格率为95.8%;航空器满员时CO2和细菌总数与空舱时监测值比较,差异具有统计学意义,(P<0.01),而和载客量约为50%时监测值比较,差异也有统计学意义(P<0.05)。结论无锡空港口岸国际通航航空器卫生状况良好,微小气候与空气质量评价指标大部分符合国家卫生标准,出入境检验检疫部门应进一步有针对性地加强卫生监督管理。 展开更多
关键词 口岸 航空器 微小气候 空气质量
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2014—2016年无锡空港口岸核辐射监测处置情况 被引量：1
10
作者 曹晓蕴 顾海俊 +2 位作者 丁均 秋雯 周彪 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2017年第1期58-59,74,共3页
目的调查无锡空港口岸核辐射超标检出情况,防止核辐射超标物质通过国境口岸传入传出。方法 2014年1月-2016年5月,采用通道式、便携式辐射检测设备对入境人员及其携带物等进行放射线检测,并对核素进行分析。结果无锡空港口岸共检出核辐... 目的调查无锡空港口岸核辐射超标检出情况,防止核辐射超标物质通过国境口岸传入传出。方法 2014年1月-2016年5月,采用通道式、便携式辐射检测设备对入境人员及其携带物等进行放射线检测,并对核素进行分析。结果无锡空港口岸共检出核辐射超标33例,其中接受放射性治疗的人员放射性超标31例,旅客携带物放射性超标2例。核辐射超标33名旅客主要来自中国台湾,占总数的81.82%(27/33)。结合复查结果,33名旅客均给予放行处理。结论继续加强无锡空港口岸核辐射监测。 展开更多
关键词 口岸 核辐射 监测
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无锡口岸医学媒介生物本底调查
11
作者 顾海俊 曹晓蕴 +2 位作者 丁均 黄玮 秋雯 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2015年第4期258-262,265,共6页
目的掌握无锡口岸医学媒介生物的本底情况,为制定有效的防控措施提供依据。方法 2011年1月—2014年12月,分别采用鼠夹法、诱蚊法、诱蝇笼法和蜚蠊诱捕盒等,定期对无锡口岸医学媒介情况进行调查。结果此次调查共捕获鼠类33只,经分类鉴定... 目的掌握无锡口岸医学媒介生物的本底情况,为制定有效的防控措施提供依据。方法 2011年1月—2014年12月,分别采用鼠夹法、诱蚊法、诱蝇笼法和蜚蠊诱捕盒等,定期对无锡口岸医学媒介情况进行调查。结果此次调查共捕获鼠类33只,经分类鉴定隶属于3属3种,优势种为小家鼠;捕获蚊类1 850只,经分类鉴定隶属于2属5种,以淡色库蚊为优势种;捕获蝇类3 451只,经分类鉴定隶属于4科10属12种,以大头金蝇为优势种;捕获蜚蠊153只,经分类鉴定隶属于1属1种。结论本次调查较全面地掌握了无锡口岸医学媒介生物本底和季节消长情况,为开展媒介生物防控及虫媒传染病预警工作提供了科学依据。 展开更多
关键词 医学媒介生物 本底调查 种群构成 季节消长
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曹刿论战
12
作者 秋雯 《小朋友》 2003年第4期18-19,共2页
公元前684年,齐国军队侵犯鲁国,鲁庄公准备出战。曾国有个叫曹刿(qui)的武士,要去给鲁庄公出谋划策。他的一个同乡阻止他去,说:“这种大事自有那些达官贵人去管,你何必去参加呢!”又说,“你难道不知道这些达官贵人目光短浅吗?”
关键词 曹刿论战 出谋划策 鲁国 军队 侵犯 阻止 战车 作战 目光短浅 公元前
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弦高犒师
13
作者 秋雯 《小朋友》 2003年第5期18-19,共2页
春秋时,郑国有个牛贩子弦高赶着一群牛到洛阳去做生意。走到半路上,弦高获悉了秦国已经发兵准备偷袭郑国的消息,不禁大吃一惊。他连夜叫人赶快回去报告,同时想方设法拯救郑国。秦军行动诡秘,悄悄地朝滑国进军,眼看快要到郑国边境了。
关键词 弦高 郑国 秦国 行动计划 准备 洛阳 国君 使臣 边境 消息
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夏禹治水
14
作者 秋雯 《小朋友》 2003年第2期18-19,共2页
大约在四五千年以前,我国还处于原始社会的末期,黄河流域发生了严重的水灾,洪水泛滥、一片汪洋,庄稼被淹,房屋倒塌。
关键词 黄河流域 部落联盟 原始社会 洪水泛滥 房屋倒塌 水灾 龙门山 庄稼 百姓 水流
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河神娶亲
15
作者 秋雯 《小朋友》 2003年第10期18-19,共2页
魏文侯的时候,西门豹做了邺地的县令。西门豹一上任,就到老百姓中去了解情况。有个老大爷气愤地告诉他一件“河神娶亲”的怪事。原来,这里的一些贪官污吏勾结巫婆,造谣惑众,说什么“如果不给河神娶亲,河神就要发大水”。所以,他们每年... 魏文侯的时候,西门豹做了邺地的县令。西门豹一上任,就到老百姓中去了解情况。有个老大爷气愤地告诉他一件“河神娶亲”的怪事。原来,这里的一些贪官污吏勾结巫婆,造谣惑众,说什么“如果不给河神娶亲,河神就要发大水”。所以,他们每年都要把贫苦人家的女孩子投到河里,给河神做新娘。为了给河神娶亲. 展开更多
关键词 魏文侯 贪官污吏 老百姓 巫婆 勾结 新娘 了解 官吏 改良土壤 情况
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重新认识粉底 打出上品好肤质
16
作者 秋雯 《医学美学美容（美颜志）》 2008年第3期30-31,共2页
根据《美颜志》2月问卷调查，如果有2000元闲钱，除了买保养品，许多女生都会买粉底，从而击败了精华液、口红等其他美妆品。而且多数人认为买粉底最信赖专柜品牌，感觉品质有保障。事实上，我们对粉底的认识不能只停留在依靠专柜产品... 根据《美颜志》2月问卷调查，如果有2000元闲钱，除了买保养品，许多女生都会买粉底，从而击败了精华液、口红等其他美妆品。而且多数人认为买粉底最信赖专柜品牌，感觉品质有保障。事实上，我们对粉底的认识不能只停留在依靠专柜产品的优秀品质上，要想拥有上品好底妆，贵在对粉的底细和多样保养功能的掌握上。 展开更多
关键词 肤质 问卷调查 保养品 专柜 品质
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涿鹿大战
17
作者 秋雯 《小朋友》 2003年第1期18-19,共2页
传说黄帝,也称轩辕氏,是我们中华民族的文化始祖。黄帝从小就很聪明,长大后成为部落首领。他的部落原来居住在我国西北的姬水地区,后来进入中原地区。就在那时候。
关键词 黄帝 炎帝 中华民族 中原地区 部落联盟 文化始祖 传说 蚩尤 黎族 居住
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骊山烽火
18
作者 秋雯 《小朋友》 2003年第3期18-19,共2页
周幽王是西周的末代国王。他是一个十足的昏君,整天只知道寻欢作乐,从不管国家大事。大臣褒珦劝谏他,他不但不听,反而把褒珦关进监狱。褒珦在监狱里一关就是三年,褒家的人可着急了,为了替褒珦赎罪,只好买来一个美女,
关键词 骊山 监狱 西周 大臣 京城 诸侯 好主意 赎罪 烽火台 释放
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孙武练兵
19
作者 秋雯 《小朋友》 2003年第6期18-19,共2页
孙武本来是齐国人, 因为是著名的军事家,有人就把他推荐给吴王阖闾。吴王接见孙武,客气地问:“你的十三篇兵法我已经都看了。
关键词 孙武 军事家 练兵 女兵 命令 队长 孙子兵法 齐国 人物档案 客气
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穰苴治军
20
作者 秋雯 《小朋友》 2003年第9期18-19,共2页
春秋时,燕国和晋国的军队联合进攻齐国,齐军连吃败仗,齐景公十分焦急。有人把田穰苴推荐给景公。景公和田穰苴一谈,觉得他确实很有军事才干,就让他做了将军,并答应他的请求,派庄贾担任监军。于是田穰苴和庄贾约定,第二天中午在军营里一... 春秋时,燕国和晋国的军队联合进攻齐国,齐军连吃败仗,齐景公十分焦急。有人把田穰苴推荐给景公。景公和田穰苴一谈,觉得他确实很有军事才干,就让他做了将军,并答应他的请求,派庄贾担任监军。于是田穰苴和庄贾约定,第二天中午在军营里一起检阅军队。 展开更多
关键词 军队 齐景公 治军 军法官 军营 进攻 晋国 燕国 和田 齐国
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