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miR-450b-5p调控IL-1β诱导人牙龈上皮细胞粘附和迁移 被引量：1
1
作者 禹翠翠 叶潇元 +3 位作者 董志恒 王爱芹 高艳 高玉光 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期572-577,共6页
目的:本研究旨在明确miR-450b-5p对炎症因子IL-1β调控人牙龈上皮细胞(HGEs)粘附与迁移的作用。方法:体外培养HGEs,在对数生长期饥饿培养12 h,5 ng/mL IL-1β刺激3 h,RNAiso Plus提取总RNA,进行small RNA测序以及实时荧光定量-聚合酶链... 目的:本研究旨在明确miR-450b-5p对炎症因子IL-1β调控人牙龈上皮细胞(HGEs)粘附与迁移的作用。方法:体外培养HGEs,在对数生长期饥饿培养12 h,5 ng/mL IL-1β刺激3 h,RNAiso Plus提取总RNA,进行small RNA测序以及实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)分析;细胞划痕实验观察IL-1β调控HGEs迁移;转染miR-450b-5p mimic、inhibitor和NC慢病毒质粒,qRT-PCR检测IL-1β调控HGEs中miR-450b-5p、Integrinβ6(ITGβ6)、Lamininγ2(LAMC2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果:测序结果和qRT-PCR示IL-1β诱导miR-450b-5p表达降低;IL-1β诱导ITGβ6、LAMC2和MMP-9表达升高;过表达miR-450b-5p抑制ITGβ6、LAMC2和MMP-9基因表达,部分挽救IL-1β诱导的ITGβ6、LAMC2和MMP-9表达升高,敲低miR-450b-5p则出现相反结果;细胞划痕实验示过表达miR-450b-5p抑制IL-1β诱导的HGEs迁移。结论:miR-450b-5p抑制IL-1β诱导HGEs粘附与迁移,提示miR-450b-5p对维持HGEs稳定、抑制细胞迁移以及保护牙龈上皮屏障有重要作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-1Β 微小RNA-450b-5p 层粘连蛋白γ2 整合素β6 基质金属蛋白酶-9
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活化型TGFβRI(T204D)转基因小鼠的建立及其对牙釉质发育影响的初步研究
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作者 禹翠翠 张钰 +3 位作者 宋文英 褚青 杨春燕 高玉光 《滨州医学院学报》 2018年第1期47-52,共6页
目的建立人活化型TGFβRI(T204D)的转基因小鼠,并利用转基因动物模型初步研究T204D对牙齿釉质发育的影响。方法克隆小鼠釉原蛋白(Amelogenin,Amelx)启动子及人T204D的全长基因,并利用缺失突变原理扩增T204D基因。运用Gateway技术将T204... 目的建立人活化型TGFβRI(T204D)的转基因小鼠,并利用转基因动物模型初步研究T204D对牙齿釉质发育的影响。方法克隆小鼠釉原蛋白(Amelogenin,Amelx)启动子及人T204D的全长基因,并利用缺失突变原理扩增T204D基因。运用Gateway技术将T204D基因插入Amelx启动子下游构建转基因表达载体,通过显微注射法建立T204D转基因C57BL/6小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,RT-PCR检测外源性TGFβRI基因表达。体视显微镜及扫描电镜下观察转基因小鼠磨牙釉质的矿化程度和病理性磨损程度。结果构建了T204D转基因表达载体并制备转基因小鼠;转入的人T204D基因在小鼠颌骨组织中特异性表达;组织学分析显示:活化型TGFβRI转基因小鼠磨牙釉质矿化程度较野生型小鼠差。6个月龄时,与野生型小鼠相比,活化型TGFβRI转基因小鼠磨牙釉质有严重磨损。结论 TGFβRI在牙齿釉质发育过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 TGFβRI 基因突变 转基因动物 釉质发育
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