凤梨亚科光萼荷属与其近源属亲缘关系的ISSR分子鉴定 被引量：10

1

作者 李萍 石金磊 +4 位作者 胡永红 陈醇 蒋昌华 王佳 明凤 《种子》 CSCD 北大核心 2007年第11期35-40,共6页

选用12对ISSR引物对14个从属于凤梨亚科中光萼荷属(Aechmea)与近源属的物种进行聚类分析。14个物种被分为3个家族,其中一个是由11个物种组成的大家族,记为A和其他3个光萼荷亚属分别组成的3个小家族。ISSR分子标记的分类情况表明,光萼荷... 选用12对ISSR引物对14个从属于凤梨亚科中光萼荷属(Aechmea)与近源属的物种进行聚类分析。14个物种被分为3个家族,其中一个是由11个物种组成的大家族,记为A和其他3个光萼荷亚属分别组成的3个小家族。ISSR分子标记的分类情况表明,光萼荷属的紫红光萼荷(Aechmea rubrolilacina),红苞光萼荷(Aechmea bracteata),绿叶光萼荷(Aechmea chlorophylla)和芬德光萼荷(Aechmea fendleri)为多起源;而光叶凤梨(Aechmea ramosa var. festiva),美叶光萼荷(Aechmea fasciata)和泰氏光萼荷(Aechmea tessmanii)为单起源,说明光萼荷属物种的复杂性与多样性。在与近源属的亲缘关系分析中,光萼荷亚属的紫红光萼荷(Aechmea rubrolilacina)和红苞光萼荷(Aechmea bracteata)与翼办美花凤梨(Portea alatisepala)和具毛赫氏凤梨(Hobenbergia lanata)亲缘关系很近;而肉穗凤梨亚属(Macrochordion)则与卜氏拟心花凤梨(Canistropsis burchellii)亲缘关系较近。本实验对光萼荷属是否来源于近源属的杂交以及凤梨亚科的分类标准科学化进行了研究。 展开更多

关键词 观赏凤梨 光萼荷属 ISSR 起源 亲缘关系

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水稻OsFAD2、OsFAD6的克隆及其家族成员对非生物胁迫的响应 被引量：9

2

作者 曹英萍 石金磊 +1 位作者 李钟 明凤 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期839-847,共9页

植物中的不饱和脂肪酸由脂肪酸去饱和酶(Fatty acid desaturase,FAD)合成,它在植物的生长发育以及植物非生物胁迫方面起着重要的作用。文章采用RT-PCR方法,从水稻日本晴(Oryza sativa L.)中克隆了分别与FAD2、FAD6同源的脂肪酸脱氢酶序... 植物中的不饱和脂肪酸由脂肪酸去饱和酶(Fatty acid desaturase,FAD)合成,它在植物的生长发育以及植物非生物胁迫方面起着重要的作用。文章采用RT-PCR方法,从水稻日本晴(Oryza sativa L.)中克隆了分别与FAD2、FAD6同源的脂肪酸脱氢酶序列,命名为OsFAD2和OsFAD6。OsFAD2的ORF为1 167 bp,推测其编码蛋白含有388个氨基酸,等电点为8.17,分子量为52.24 kDa,C端有内质网定位序列;OsFAD6的ORF长度为1 365 bp,推测编码454个氨基酸的蛋白质序列,分子量44.35 kDa,等电点为9.24,推测N端38个氨基酸为叶绿体导肽。两者都具有膜整合脂肪酸去饱和酶特有的3个组氨酸簇。RT-PCR分析表明,OsFAD2和OsFAD6在水稻所有器官中都表达,在叶中表达量为最高。在水稻FAD基因家族中,叶中OsFAD2、OsFAD6的mRNA对低温不响应,而OsFAD7和OsFAD8的mRNA在低温下上升。水稻叶中OsFAD2、OsFAD6、OsFAD3和OsFAD7的mRNA表达具有昼夜节律性,在光照下表达量低,而在随后的黑暗中表达量高,OsFAD6和OsFAD7 mRNA表达的昼夜节律性可能与水稻幼苗叶片中NADPH量的改变有关。 展开更多

关键词 水稻 脂肪酸去饱和酶 非生物胁迫 昼夜节律 表达谱

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检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺的化学发光间接竞争免疫分析方法的建立 被引量：6

3

作者 王权 赵新宇 +4 位作者 蒋蔚 陈永军 刘迎春 宋宁宁 石金磊 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第3期17-21,共5页

将莱克多巴胺(RAC)与戊二酸酐反应,用混合酸酐法使反应产物与牛血清白蛋白(BSA)偶联生成免疫原,并采用淋巴细胞杂交瘤技术制备RAC单克隆抗体,建立检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺化学发光间接竞争免疫分析法。结果显示:飞行质谱法测得RAC-... 将莱克多巴胺(RAC)与戊二酸酐反应,用混合酸酐法使反应产物与牛血清白蛋白(BSA)偶联生成免疫原,并采用淋巴细胞杂交瘤技术制备RAC单克隆抗体,建立检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺化学发光间接竞争免疫分析法。结果显示:飞行质谱法测得RAC-戊二酸单酯分子量为416.2,RAC-戊二酸单酯与BSA偶联比为3.4∶1;RAC单克隆抗体最佳稀释倍数为1∶8×104,包被抗原最佳质量浓度为0.5μg/mL;标准曲线呈线性,回归方程为Y=-0.188 2x+0.392 2,R2=0.993 4,IC50值为0.267 ng/mL;与RAC类似化合物及其他药品无明显的交叉反应。尿样回收率为76.8%～90.8%,批内变异系数为6.8%～11.5%,批间变异系数为7.2%～13.8%;猪肉样回收率为75.2%～87.4%,批内变异系数为7.1%～11.6%,批间变异系数为8.6%～14.1%。结果表明:用RAC-戊二酸单脂与BSA偶联物作免疫原成功地研制了针对RAC的特异性抗体,以单抗为基础建立了检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺化学发光间接竞争免疫分析法,为进一步研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 莱克多巴胺 单克隆抗体 化学发光间接竞争免疫分析法

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月季RcHSP17.8基因表达提高大肠杆菌对非生物胁迫的耐性 被引量：4

4

作者 蒋昌华 胡永红 +5 位作者 徐健遥 张浩 石金磊 李敏 王雅琼 明凤 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1791-1798,共8页

月季RcHSP17.8为编码小分子热激蛋白基因,Southern检测其在月季基因组中为多拷贝存在。38℃/3h热激处理后,该基因在耐热月季品种‘曼海姆宫殿’(Schloss Mannieim)、‘彩虹’(Radio)、‘赌城’(Las Vegas)、‘梅郎随想曲’(Capricede Me... 月季RcHSP17.8为编码小分子热激蛋白基因,Southern检测其在月季基因组中为多拷贝存在。38℃/3h热激处理后,该基因在耐热月季品种‘曼海姆宫殿’(Schloss Mannieim)、‘彩虹’(Radio)、‘赌城’(Las Vegas)、‘梅郎随想曲’(Capricede Meiland)、‘小女孩’(Girl)中强表达,而在不耐热品种‘新十全’(Kordes Perfecta)、‘绯扇’(Hiogi)、‘莱茵黄金’(Pfalzer Gold)中弱表达或不表达,表明该基因与月季耐热性关系密切。为确定月季RcHSP17.8基因功能,将其转化E.coliBL21,结果表明重组菌株能正常诱导表达包含RcHSP17.8的融合蛋白,并因此提高了重组菌株对高温、低温、高盐、高pH、重金属、氧化等非生物胁迫的耐性,表明RcHSP17.8参与了上述非生物胁迫的响应。 展开更多

关键词 月季 RcHSP17.8基因 诱导表达 非生物胁迫

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月季eIF-5A基因的表达增强宿主大肠杆菌对高温和低温的耐性 被引量：4

5

作者 石金磊 徐健遥 +4 位作者 蒋昌华 李敏 李卓夫 胡永红 明凤 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期18-24,共7页

真核生物翻译起始因子(eIF-5A)在调控生物生长发育、衰老与环境响应中起重要作用。设计eIF-5A基因的兼并引物,对月季受高温诱导的叶片cDNA进行PCR扩增,获得特异性片段,经回收、克隆和测序,确定该cDNA为月季eIF-5A(命名为RceIF5A),含有48... 真核生物翻译起始因子(eIF-5A)在调控生物生长发育、衰老与环境响应中起重要作用。设计eIF-5A基因的兼并引物,对月季受高温诱导的叶片cDNA进行PCR扩增,获得特异性片段,经回收、克隆和测序,确定该cDNA为月季eIF-5A(命名为RceIF5A),含有480bp的核苷酸,编码159个氨基酸。将该cDNA序列克隆到原核表达载体PET32a中,获得重组子pET32a-eIF5A。在高温(50℃)和低温(4℃)胁迫下含有该基因的大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(pET32a-eIF5A)比E.coliBL21(pET32a)抗性有明显的提高,据此认为含有重组子的E.coliBL21(pET32a-eIF5A)对高温和低温的抗性可能与eIF-5A基因的表达相关。该基因GenBank登录号为EF177192。 展开更多

关键词 EIF-5A 月季 原核表达 温度胁迫

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月季基因组DNA与总RNA提取方法的优化研究 被引量：4

6

作者 蒋昌华 徐健遥 +2 位作者 石金磊 张浩 明凤 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第21期8934-8935,8951,共3页

[目的]优化月季基因组DNA与总RNA的提取方法。[方法]通过对经典提取方法的改进与筛选,获得月季DNA和总RNA。[结果]经过改进与筛选的方法提取的月季DNA和总RNA可用于酶切、PCR和RT-PCR等一系列分子生物学的研究。[结论]该研究为其他以次... [目的]优化月季基因组DNA与总RNA的提取方法。[方法]通过对经典提取方法的改进与筛选,获得月季DNA和总RNA。[结果]经过改进与筛选的方法提取的月季DNA和总RNA可用于酶切、PCR和RT-PCR等一系列分子生物学的研究。[结论]该研究为其他以次生代谢物含量丰富植物为材料的研究提供了技术参考。 展开更多

关键词 月季 DNA提取 总RNA提取

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建筑工程技术专业人才需求调研与分析——以上海建筑业为例分析 被引量：1

7

作者 石金磊 邹翾 《学园》 2023年第21期14-16,共3页

满足新时代发展的新要求,培养出高水平高素质的土木建筑类专业人才是高职教学改革的核心。目前建筑工程技术专业人才培养过程中仍然存在人才培养目标与社会发展要求不适应等问题。从建筑工程技术专业人才需求入手,综合使用问卷调查、企... 满足新时代发展的新要求,培养出高水平高素质的土木建筑类专业人才是高职教学改革的核心。目前建筑工程技术专业人才培养过程中仍然存在人才培养目标与社会发展要求不适应等问题。从建筑工程技术专业人才需求入手,综合使用问卷调查、企业访谈等方法,通过回访往届毕业生,深入校企合作单位开展调研,为调整专业人才培养目标、优化人才培养方案、推进专业综合改革、提高人才培养质量提供建议。 展开更多

关键词 建筑工程技术专业 人才需求调研

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疫情防控期间“现代生物学基础实验理论”课程混合式在线教学方式的探索 被引量：4

8

作者 康宇佳 石金磊 《高校生物学教学研究（电子版）》 2020年第4期17-22,共6页

为积极响应教育部在防控新冠肺炎疫情下"停课不停教、停课不停学"的号召,上海科技大学各学院努力组织开课教师利用现有网络平台资源,结合自身教学特点,开展在线教学。"现代生物学基础实验理论"课程通过校内互动教... 为积极响应教育部在防控新冠肺炎疫情下"停课不停教、停课不停学"的号召,上海科技大学各学院努力组织开课教师利用现有网络平台资源,结合自身教学特点,开展在线教学。"现代生物学基础实验理论"课程通过校内互动教学平台、QQ群及校内邮件传送等方式,构建了新形势下的混合式在线教学模式。该课程教学进展顺利,学生反馈良好,教师和学生双方均已逐步适应教学节奏。本文将从教学方案设计、教学实施及教学反馈等方面进行阐述。期望这种特殊情势下的尝试和探索,可以为今后开展类似在线互动教学方式提供参考,也为传统课堂教学适应多媒体时代的混合教学要求提供有益的补充。 展开更多

关键词 在线教学 互动教学平台 混合式教学 生物学基础实验理论

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离子通道蛋白Piezo1在人源非小细胞肺癌中的功能研究

9

作者 赵敏萱 夏凡晨 +3 位作者 刘晨 张文悦 石金磊 康宇佳 《黑龙江科学》 2023年第12期86-93,共8页

为探讨Piezo1基因敲减对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响,通过siRNA转染构建Piezo1敲减A549细胞系,经RT-qPCR、Western blot检测其沉默效果,Piezo1的表达在mRNA水平与蛋白水平都显著下调。通过CCK8法检测敲减后细胞增殖能... 为探讨Piezo1基因敲减对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响,通过siRNA转染构建Piezo1敲减A549细胞系,经RT-qPCR、Western blot检测其沉默效果,Piezo1的表达在mRNA水平与蛋白水平都显著下调。通过CCK8法检测敲减后细胞增殖能力变化,通过划痕修复实验检测细胞迁移能力,通过Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,通过Fluo-4 AM Ca^(2+)探针成像实验检测胞内Ca^(2+)含量,通过RT-qPCR与Western blot法检测Piezo1下游信号通路相关基因的转录水平及蛋白磷酸化水平。结果表明,Piezo1靶向siRNA能够下调A549细胞系中Piezo1 mRNA及蛋白表达,抑制A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力,降低胞内Ca^(2+)水平,导致增殖相关基因Myc、Cyclin-D1、Cyclin-E、CDK2表达水平下调,迁移相关基因E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达水平上调,Ca^(2+)相关信号通路蛋白Akt的磷酸化水平下调,4EBP1蛋白的磷酸化水平显著提高,说明Piezo1基因敲减抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭能力,为非小细胞肺癌的治疗提供了新的分子靶标。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 Piezo1 A549细胞系 增殖 迁移 侵袭

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手工电弧焊管道修复技术应用 被引量：4

10

作者 石金磊 陈伟杰 《中国新技术新产品》 2010年第16期117-118,共2页

手工电弧焊简称手工焊。它是利用焊条与工件之间建立起来的稳定燃烧的电弧,使焊条和工件熔化,从而获得牢固的焊接接头。在锅炉和压力容器等设备的制造中手工电弧焊多用于设备内附件的焊接和支座、接管与开口补强等部位的焊接。由于手工... 手工电弧焊简称手工焊。它是利用焊条与工件之间建立起来的稳定燃烧的电弧,使焊条和工件熔化,从而获得牢固的焊接接头。在锅炉和压力容器等设备的制造中手工电弧焊多用于设备内附件的焊接和支座、接管与开口补强等部位的焊接。由于手工电弧焊的诸多特点,在工业生产中得以广泛应用,熟练地掌握基本技能并加以合理运用,只有在这个前提下,我们才能充分发挥其特点与优势。 展开更多

关键词 手工电弧焊 焊条

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呋喃它酮代谢物人工抗原及多克隆抗体的制备 被引量：2

11

作者 刘迎春 蒋蔚 +3 位作者 陈永军 高艺林 石金磊 王权 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第2期69-73,共5页

本文利用对醛基苯甲酸(CPA)与呋喃它酮代谢物(AMOZ)进行衍生化,得到衍生物CPAMOZ,并通过质谱法对其结构进行确证。然后采用混合酸酐法将CPAMOZ与载体蛋白偶联,采用紫外扫描(UV)法对偶联物进行验证。用偶联成功的人工全抗原(CPAMOZ-BSA)... 本文利用对醛基苯甲酸(CPA)与呋喃它酮代谢物(AMOZ)进行衍生化,得到衍生物CPAMOZ,并通过质谱法对其结构进行确证。然后采用混合酸酐法将CPAMOZ与载体蛋白偶联,采用紫外扫描(UV)法对偶联物进行验证。用偶联成功的人工全抗原(CPAMOZ-BSA)免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定小鼠血清抗体效价为1∶8×104,对NPAMOZ的半数抑制量为26.55μg/L,间接竞争ELISA鉴定小鼠血清多克隆抗体,与NPAMOZ、CPAMOZ的交叉反应率分别为100%、44.8%,与AMOZ、对醛基苯甲酸、对硝基苯甲醛以及同类其他三种药物呋喃妥因、呋喃西林、呋喃唑酮等原药及其代谢物以及代谢物衍生物的交叉反应均小于0.01%。结果表明,制备的AMOZ多克隆抗体效价高、特异性强,灵敏度高,为进一步制备AMOZ单克隆抗体和研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 呋喃它酮代谢物 人工抗原 化学合成 鉴定

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呋喃妥因残留代谢物人工抗原的合成与鉴定 被引量：2

12

作者 宋宁宁 刘迎春 +4 位作者 陈永军 蒋蔚 石金磊 杨康 王权 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第3期55-61,共7页

利用对醛基苯甲酸对呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(1-Aminohydantoin hydrochloride,AHD)进行衍生化,衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)通过混合酸酐法与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联,用紫外扫描(UV)和变性凝胶电泳(... 利用对醛基苯甲酸对呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(1-Aminohydantoin hydrochloride,AHD)进行衍生化,衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)通过混合酸酐法与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联,用紫外扫描(UV)和变性凝胶电泳(SDS-PAGE)对偶联物进行验证。将偶联成功的人工全抗原(CPAHD-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过间接酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清抗体效价为1:32 000。用间接竞争ELISA鉴定抗体特性,结果显示:抗体对AHD与对硝基苯甲醛的衍生物(NPAHD)的灵敏度高,IC50为30.63μg/L,特异性好,与CPAHD有部分交叉反应外,与其他3类硝基呋喃类药物及代谢产物无交叉反应(交叉反应率<0.01%)。结果表明,用CPAHD-BSA作免疫原免疫小鼠可诱导产生针对AHD衍生物(NPAHD)的特异性抗体,为进一步制备AHD单克隆抗体和研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 呋喃妥因代谢物 人工抗原 合成 鉴定

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根瘤农杆菌介导的水稻转基因方法的优化研究 被引量：2

13

作者 牟晨 金菁 石金磊 《安徽农业科学》 CAS 2012年第7期3867-3867,3880,共2页

[目的]优化根瘤农杆菌介导的水稻转基因方法。[方法]通过对经典水稻转基因方法的优化和改进,高效获得转基因水稻苗。[结果]使用成熟胚,采取升汞灭菌,侵染时农杆菌的OD600值为0.1时,转化效率最高,较原方法提高约23%。[结论]该研究为以根... [目的]优化根瘤农杆菌介导的水稻转基因方法。[方法]通过对经典水稻转基因方法的优化和改进,高效获得转基因水稻苗。[结果]使用成熟胚,采取升汞灭菌,侵染时农杆菌的OD600值为0.1时,转化效率最高,较原方法提高约23%。[结论]该研究为以根瘤农杆菌介导的水稻转基因研究提供了技术参考。 展开更多

关键词 水稻 转基因 组织培养

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弓形虫烯醇化酶2基因的原核表达与鉴定 被引量：2

14

作者 张花景 蒋蔚 +7 位作者 刘迎春 陈永军 李欣彤 石金磊 乔元彪 薛俊欣 张梦 王权 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期503-508,共6页

为深入研究弓形虫烯醇化酶的生物学功能,根据已发表的eno2基因序列设计引物,通过RTPCR方法扩增弓形虫RH株的eno2基因。将eno2克隆到载体pET-28a(+)中后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SDS-PAGE... 为深入研究弓形虫烯醇化酶的生物学功能,根据已发表的eno2基因序列设计引物,通过RTPCR方法扩增弓形虫RH株的eno2基因。将eno2克隆到载体pET-28a(+)中后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SDS-PAGE分析表达情况,并通过Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定其免疫活性。结果显示,eno2基因全长1 353bp,编码444个氨基酸,与GenBank中登录的弓形虫烯醇化酶基因的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列的同源性均高达99.8%,与其他物种的烯醇化酶的同源性较低。在pH7.5、28℃和IPTG终浓度0.1mmol/L条件下,重组蛋白ENO2得到高效可溶性表达,分子质量约为55ku。Western-blot结果显示,重组蛋白能被感染弓形虫的犬阳性血清识别,说明ENO2具有较好的反应原性,可以作为血清学诊断抗原。IFA表明,NO2在弓形虫的细胞质和细胞核中均有分布。结果表明,本研究成功获得了可溶性、具有良好免疫活性的弓形虫重组蛋白ENO2,为深入研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 弓形虫 烯醇化酶2 原核表达 反应原性

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利用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达人鹅型溶菌酶2 被引量：3

15

作者 黄鹏 阎丽萍 +1 位作者 张宁 石金磊 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期55-63,共9页

利用甘油醛三磷酸脱氢酶（glyceraldehydes-3-phosphatedehydrogenase,GAP）启动子在毕赤酵母中表达人鹅型溶菌酶2（human goose-type lysozyme 2,h LysG2）,并在小试规模建立一套有效的重组hLysG2（recombinant h LysG2,rh LysG2）生... 利用甘油醛三磷酸脱氢酶（glyceraldehydes-3-phosphatedehydrogenase,GAP）启动子在毕赤酵母中表达人鹅型溶菌酶2（human goose-type lysozyme 2,h LysG2）,并在小试规模建立一套有效的重组hLysG2（recombinant h LysG2,rh LysG2）生产工艺流程。根据毕赤酵母密码子偏爱性设计并人工合成hLysG2基因,将其连接至pGAPZαA质粒中,构建重组表达质粒pGAPZαA-h LysG2。将重组表达载体线性化后电转化毕赤酵母GS115感受态细胞,通过Zeocin抗性筛选获取高拷贝重组菌株,并在5L生物反应器中进行发酵培养。发酵60h后发酵液上清酶活性达到最高,发酵液上清经SDS-PAGE及Western blot检测证实rh LysG2得到表达。与诱导型表达相比,组成型表达发酵时间缩短了48h,上清中rhLysG2总活性提高了23.8%;使用甲壳素亲和层析和分子筛层析对rhLysG2进行纯化后,每升发酵液上清可纯化到187.4mg重组蛋白,纯化产物纯度达99.0%以上;浊度测定法分析显示,在p H 5.6、30℃和0.1mol/L Na＋的条件下,rhLysG2可达到最大酶活性13 500U/mg。利用GAP启动子在毕赤酵母中成功表达了高纯度和高活性的rh LysG2,避免了甲醇的使用,缩短了发酵时间,提高了蛋白产量,为将rhLysG2开发为新型抗耐药菌药物奠定了基础。 展开更多

关键词 人鹅型溶菌酶2 毕赤酵母 GAP启动子 组成型表达 杀菌活性

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呋喃妥因代谢物AHD单抗的制备及鉴定 被引量：1

16

作者 石金磊 陈永军 +5 位作者 刘迎春 蒋蔚 张花景 李欣彤 乔元彪 王权 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第1期20-23,共4页

将呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰胺脲(AHD)的衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)分别与牛血清蛋白(BSA)和Jeffamine修饰的卵清蛋白(OVA)偶联,经紫外光谱扫描鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原CPAHD-Jeffamine-OVA。应用... 将呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰胺脲(AHD)的衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)分别与牛血清蛋白(BSA)和Jeffamine修饰的卵清蛋白(OVA)偶联,经紫外光谱扫描鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原CPAHD-Jeffamine-OVA。应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,获得了稳定分泌抗4-NPAHD单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为B10E7。使用本细胞株制备的McAb对4-NPAHD的半数抑制质量浓度(IC50)为3.65 ng/mL,与同类抗生素及其代谢物未发现交叉反应,显示高度的灵敏性和特异性。本抗体的研制为建立间接竞争酶联免疫方法奠定了基础。 展开更多

关键词 呋喃妥因代谢物 AHD 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附试验

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四碘甲状腺原氨酸单克隆抗体的制备

17

作者 高艺林 王权 +7 位作者 卫君超 邓志瑞 张文举 刘迎春 蒋蔚 陈永军 石金磊 陈沁 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第6期54-58,共5页

采用碳二亚胺(EDC)法合成游离3,3',5,5'-四碘甲状腺原氨酸(FT4)的完全抗原FT4-BSA和FT4-OVA,将FT4-BSA作为免疫原,免疫BALB/c雌鼠,以FT4-OVA为包被原,利用ELISA方法确定抗FT4多克隆抗体的效价和敏感性。通过杂交瘤技术筛选出分... 采用碳二亚胺(EDC)法合成游离3,3',5,5'-四碘甲状腺原氨酸(FT4)的完全抗原FT4-BSA和FT4-OVA,将FT4-BSA作为免疫原,免疫BALB/c雌鼠,以FT4-OVA为包被原,利用ELISA方法确定抗FT4多克隆抗体的效价和敏感性。通过杂交瘤技术筛选出分泌抗T4单克隆抗体(T4 McAb)的杂交瘤细胞株,制备腹水单抗。经检测,腹水单抗效价是1∶9.0×104,以此建立的间接竞争ELISA方法,半数抑制质量浓度(IC50)是24.7 ng/mL;FT4单抗与游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)的交叉反应率是4.2%,与促甲状腺激素(TSH)无交叉反应;经抗体类型鉴定,获得的单抗重链属于IgG1亚类,轻链属于κ型。结果表明:本试验制备的单抗特异性强、敏感性高,能够为T4免疫学检测方法的建立和相关研究奠定良好基础。 展开更多

关键词 3 3' 5 5'-四碘甲状腺原氨酸 完全抗原 单克隆抗体

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基于统一设计变量方法的导管架海洋平台动力优化设计

18

作者 石金磊 赵德有 《中国海洋平台》 2008年第1期39-44,共6页

基于统一设计变量方法,实现了导管架海洋平台在动冰载荷作用下的截面和形状动力优化设计。以JZ20-1MUQ平台为例进行了计算。计算结果表明,应用统一设计变量方法同时进行截面和形状的优化设计结果明显好于截面优化设计结果。

关键词 优化设计 统一设计变量 导管架平台 动冰载荷

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Ca对AZ31镁合金CO_2激光焊接接头组织和性能的影响

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作者 严红革 陈琼 +3 位作者 陈吉华 俞照辉 田津 石金磊 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期55-59,共5页

采用添加填充材料的CO2激光焊接工艺对AZ31镁合金薄板进行焊接,研究了不同Ca含量对焊缝金属的显微组织和力学性能的影响.结果表明:当激光功率为1 500W,焊接速度为3 m/min时,AZ31镁合金CO2激光焊接的焊缝金属中添加一定量的σCa<0.19... 采用添加填充材料的CO2激光焊接工艺对AZ31镁合金薄板进行焊接,研究了不同Ca含量对焊缝金属的显微组织和力学性能的影响.结果表明:当激光功率为1 500W,焊接速度为3 m/min时,AZ31镁合金CO2激光焊接的焊缝金属中添加一定量的σCa<0.19%元素,可以得到成分相对较均匀、组织细小的焊缝.当填充带材为AZC04(焊缝中Cσa=0.19%)时,焊缝区晶粒相对细小,析出相细小弥散,此时焊接接头的力学性能最优,焊接效率基本可达到100%. 展开更多

关键词 镁合金 CO2激光焊接 填充金属带材 CA

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PCR-RFLP法鉴定人ALDH2基因型

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作者 时天麒 康宇佳 石金磊 《生物医学》 CAS 2022年第2期124-131,共8页

ALDH2编码乙醛脱氢酶,是人体乙醇代谢途径的重要组分。人类ALDH2基因存在SNP (单核苷酸多态性)现象,其gDNA在37,030位发生单碱基替换后导致乙醛脱氢酶失活,且该突变基因在东亚人群中有较高频率。根据此单碱基的差别,本文采用PCR-RFLP方... ALDH2编码乙醛脱氢酶,是人体乙醇代谢途径的重要组分。人类ALDH2基因存在SNP (单核苷酸多态性)现象,其gDNA在37,030位发生单碱基替换后导致乙醛脱氢酶失活,且该突变基因在东亚人群中有较高频率。根据此单碱基的差别,本文采用PCR-RFLP方法,通过提取、纯化、酶切受试者口腔上皮细胞基因组DNA,实现了对于三种ALDH2基因型的鉴定,其创新点在于简化实验步骤、提升产物回收效率的同时使判断更加准确。结论:PCR-RFLP法鉴定人ALDH2基因型可作为分子遗传学实验教学的案例。 展开更多

关键词 ALDH2基因型 PCR-RFLP 分子遗传学

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