目的:构建及鉴定头颈部黏膜恶性黑色素瘤(mucosal melanoma of head and neck,HNMM)病人源性肿瘤细胞(patient derived tumor cell,PDC)模型。方法 :通过肿瘤组织块原代培养、分离肿瘤细胞,利用免疫荧光染色鉴定分离的肿瘤细胞;以PDC皮...目的:构建及鉴定头颈部黏膜恶性黑色素瘤(mucosal melanoma of head and neck,HNMM)病人源性肿瘤细胞(patient derived tumor cell,PDC)模型。方法 :通过肿瘤组织块原代培养、分离肿瘤细胞,利用免疫荧光染色鉴定分离的肿瘤细胞;以PDC皮下成瘤,通过组织切片染色和免疫组织化学染色对比病人原发灶和PDC成瘤组织的细胞学形态。结果:头颈黏膜恶性黑色素瘤患者移植瘤组织块分离出的细胞细胞膜和细胞质HMB-45和Melan-A免疫荧光染色呈阳性。PDC可以在裸鼠皮下成瘤,成瘤组织与患者组织细胞形态一致。结论:头颈部黏膜恶性黑色素瘤构建的PDC模型能够反映患者的组织学特征,PDC模型能够为头颈部黏膜恶性黑色素瘤的研究提供可靠的模型。展开更多
目的:检测Smad7蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及临床意义,探讨其在口腔鳞癌细胞增殖和迁移中的作用。方法:利用免疫组织化学染色,检测31例原发性口腔鳞癌患者肿瘤组织及癌旁标本中Smad7的表达,并分...目的:检测Smad7蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及临床意义,探讨其在口腔鳞癌细胞增殖和迁移中的作用。方法:利用免疫组织化学染色,检测31例原发性口腔鳞癌患者肿瘤组织及癌旁标本中Smad7的表达,并分析其与淋巴结转移之间的关系;利用CCK-8及细胞划痕实验检测Smad7基因沉默对肿瘤细胞增殖及迁移能力的影响;通过Smad7 si RNA干扰HN4细胞,影响Smad7蛋白的表达,利用免疫印迹及q RT-PCR检测其对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标蛋白及RNA表达的影响。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:在口腔鳞癌肿瘤组织中,Smad7蛋白在细胞核和细胞质的表达均显著高于对应的癌旁组织。Smad7的表达与患者颈淋巴结转移显著相关。Smad7 si RNA干扰HN4细胞后,细胞的增殖能力减弱,迁移能力增强。Smad7 si RNA干扰使得HN4细胞神经钙黏附素(N-cadherin)蛋白的表达量升高,而上皮钙黏蛋白(E-cadherin)的表达量下降,N-cadherin蛋白及波形蛋白(Vimentin)RNA表达量显著升高,与对照组相比有显著差异。结论:Smad7的表达与口腔鳞癌患者颈淋巴结转移相关,且Smad7在口腔鳞癌肿瘤细胞的增殖及侵袭转移中发挥重要作用。展开更多
文摘目的:探讨成纤维细胞生长因子受体在头颈鳞癌细胞中的表达及其定位。方法:提取10种头颈鳞癌细胞系蛋白,采用Western印迹技术检测FGFR家族成员的表达;利用免疫荧光技术检测FGFR各型在SCC25和HN6细胞中的表达位置。应用Image J软件测量免疫印迹条带灰度值,Graph Pad Prism 5.01对灰度值结果进行统计学分析。结果:在10株头颈鳞癌细胞细中,6株表达FGFR1。FGFR2、3、4均在10株头颈鳞癌细胞细中表达。FGFR1、2、4表达于细胞核及细胞质,FGFR3仅表达于细胞质。结论:FGFR在头颈鳞癌细胞细中共表达,可能与头颈鳞癌的发生、发展有关;FGFR家族不同亚型在头颈鳞癌细胞的表达定位存在差异。
文摘目的:构建及鉴定头颈部黏膜恶性黑色素瘤(mucosal melanoma of head and neck,HNMM)病人源性肿瘤细胞(patient derived tumor cell,PDC)模型。方法 :通过肿瘤组织块原代培养、分离肿瘤细胞,利用免疫荧光染色鉴定分离的肿瘤细胞;以PDC皮下成瘤,通过组织切片染色和免疫组织化学染色对比病人原发灶和PDC成瘤组织的细胞学形态。结果:头颈黏膜恶性黑色素瘤患者移植瘤组织块分离出的细胞细胞膜和细胞质HMB-45和Melan-A免疫荧光染色呈阳性。PDC可以在裸鼠皮下成瘤,成瘤组织与患者组织细胞形态一致。结论:头颈部黏膜恶性黑色素瘤构建的PDC模型能够反映患者的组织学特征,PDC模型能够为头颈部黏膜恶性黑色素瘤的研究提供可靠的模型。
文摘目的:检测Smad7蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及临床意义,探讨其在口腔鳞癌细胞增殖和迁移中的作用。方法:利用免疫组织化学染色,检测31例原发性口腔鳞癌患者肿瘤组织及癌旁标本中Smad7的表达,并分析其与淋巴结转移之间的关系;利用CCK-8及细胞划痕实验检测Smad7基因沉默对肿瘤细胞增殖及迁移能力的影响;通过Smad7 si RNA干扰HN4细胞,影响Smad7蛋白的表达,利用免疫印迹及q RT-PCR检测其对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标蛋白及RNA表达的影响。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:在口腔鳞癌肿瘤组织中,Smad7蛋白在细胞核和细胞质的表达均显著高于对应的癌旁组织。Smad7的表达与患者颈淋巴结转移显著相关。Smad7 si RNA干扰HN4细胞后,细胞的增殖能力减弱,迁移能力增强。Smad7 si RNA干扰使得HN4细胞神经钙黏附素(N-cadherin)蛋白的表达量升高,而上皮钙黏蛋白(E-cadherin)的表达量下降,N-cadherin蛋白及波形蛋白(Vimentin)RNA表达量显著升高,与对照组相比有显著差异。结论:Smad7的表达与口腔鳞癌患者颈淋巴结转移相关,且Smad7在口腔鳞癌肿瘤细胞的增殖及侵袭转移中发挥重要作用。