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基于磁性微球的固定化金属亲和载体及其在蛋白质/多肽纯化中的应用 被引量:9
1
作者 石若 张志超 +1 位作者 陈磊 万谦宏 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期628-632,共5页
采用模板法制备的单分散磁性硅胶微球,经过表面修饰偶联上亚氨基二乙酸(IDA),与过渡金属离子Cu2+螯合,制成一种新型的磁性固定化金属亲和纯化载体。用牛血清白蛋白(BSA)作为模型进行磁性固定化金属亲和吸附蛋白的研究,结果表明,BSA在磁... 采用模板法制备的单分散磁性硅胶微球,经过表面修饰偶联上亚氨基二乙酸(IDA),与过渡金属离子Cu2+螯合,制成一种新型的磁性固定化金属亲和纯化载体。用牛血清白蛋白(BSA)作为模型进行磁性固定化金属亲和吸附蛋白的研究,结果表明,BSA在磁性亲和载体上的吸附可用Langmuir吸附方程描述,对BSA的饱和吸附量为90mg/g。将磁性亲和载体用于带有组氨酸标签的镇痛抗肿瘤多肽(analgesic-antitumorpeptide,AGAP)纯化,在未经过滤的细胞裂解液中可以将AGAP一步纯化,非特异性吸附低,操作简便,完全适用于含有组氨酸标记的重组多肽或蛋白的分离纯化。 展开更多
关键词 磁性微球 固定化金属亲和基质 蛋白质纯化 重组多肽
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双阳离子型室温离子液体中Suzuki偶联反应研究 被引量:5
2
作者 张传越 石若 +1 位作者 陈才元 金传明 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第3期611-614,共4页
合成了具有钳子型的双咪唑阳离子核的室温离子液体2,它的相转变温度为-51℃,热力学分解温度为412℃,利用该离子液体作反应溶剂研究了不同钯催化剂PdCl2,Pd(OAc)2,Pd-NHC配合物3存在下的Suzuki偶联反应.结果表明:在NaOAc作碱,0.5 mol%的P... 合成了具有钳子型的双咪唑阳离子核的室温离子液体2,它的相转变温度为-51℃,热力学分解温度为412℃,利用该离子液体作反应溶剂研究了不同钯催化剂PdCl2,Pd(OAc)2,Pd-NHC配合物3存在下的Suzuki偶联反应.结果表明:在NaOAc作碱,0.5 mol%的Pd-NHC配合物3存在下溴代苯衍生物与苯硼酸反应具有较高的活性,产率可以达到85%以上,Pd-NHC配合物3催化剂能更好地负载在钳子型双阳离子核室温离子液体2中,该反应体系能重复循环使用多次,且分离简单、重现性强、环境友好. 展开更多
关键词 室温离子液体 SUZUKI偶联反应 N-杂卡宾配合物
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肝细胞生长因子是“乙癸同源”可能的物质基础探讨 被引量:5
3
作者 宁港 吴悔 +2 位作者 李波男 石若 周兴 《湖南中医药大学学报》 CAS 2022年第10期1720-1724,共5页
“乙癸同源”理论由来已久,通过历代医家的发扬与创新,补益肝肾、肝肾互治的理论对于临床疾病特别是男科疾病的治疗具有指导意义;肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在促进肝脏细胞再生及损伤修复、关节软骨及韧带肌腱损伤... “乙癸同源”理论由来已久,通过历代医家的发扬与创新,补益肝肾、肝肾互治的理论对于临床疾病特别是男科疾病的治疗具有指导意义;肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在促进肝脏细胞再生及损伤修复、关节软骨及韧带肌腱损伤修复方面与中医学“肝主升发”“肝主筋”存在一致性;在促进生殖功能方面与中医学“肾藏精,主生殖”存在一致性;此外,通过中医补益肝肾可以促进体内HGF的产生。由此,提出HGF是“乙癸同源”的可能物质基础,以期进一步丰富“乙癸同源”理论,为其在临床的应用提供科学的依据,提供临床疾病治疗的新思路。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 乙癸同源 肝肾同源 物质基础 补益补肾 肝主筋
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雄蚕益肾方对小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤后铁死亡的影响
4
作者 彭阿建 宁港 +6 位作者 吴悔 李波男 石若 王浩宇 刘为 唐雪 周兴 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2024年第7期640-647,共8页
目的:探讨雄蚕益肾方含药血清对H2O2诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤后铁死亡的影响。方法:应用H2O2诱导小鼠TM3睾丸间质细胞建立氧化应激损伤模型,将诱导成模的TM3细胞随机分为模型组、雄蚕益肾方组、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1组、F... 目的:探讨雄蚕益肾方含药血清对H2O2诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤后铁死亡的影响。方法:应用H2O2诱导小鼠TM3睾丸间质细胞建立氧化应激损伤模型,将诱导成模的TM3细胞随机分为模型组、雄蚕益肾方组、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1组、Ferrostatin-1联合雄蚕益肾方组,分别用空白血清、20%含药血清、2μmol/L Ferrostatin-1、2μmol/L Ferrostatin-1+20%含药血清干预,另设置对照组(正常TM3细胞+空白血清)。观察各组细胞形态,检测各组细胞分泌的睾酮、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、铁蛋白重链1(FTH1)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、脂肪酸辅酶A连接酶4(FACL4)、总铁离子及亚铁离子含量。结果:与模型组比较,对照组ROS、MDA、FACL4、总铁和亚铁离子表达均显著降低(P<0.05),睾酮、SOD、谷胱甘肽、FTH1、SLC7A11及GPX4表达均显著升高(P<0.05);雄蚕益肾方组能显著促进TM3细胞分泌睾酮并上调TM3细胞FTH1、SLC7A11、GPX4、GSH和SOD表达(P<0.05),显著下调ROS、MDA、FACL4、总铁离子和亚铁离子表达(P<0.05)。结论:H2O2暴露后可通过氧化应激诱导小鼠TM3睾丸间质细胞发生铁死亡,雄蚕益肾方可能通过激活SLC7A11/GSH/GPX4轴拮抗TM3细胞氧化应激损伤及铁死亡,这可能是雄蚕益肾方治疗男性迟发性性腺功能减退症的潜在作用机制。 展开更多
关键词 雄蚕益肾方 LEYDIG细胞 氧化应激 铁死亡 迟发性性腺功能减退症
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从“天癸-肝肾”论治男性迟发性性腺功能减退症 被引量:2
5
作者 吴悔 宁港 +2 位作者 李波男 石若 周兴 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第2期354-358,共5页
男性迟发性性腺功能减退症(late onset hypogonadism, LOH)临床症状多样,影响广泛,患病率较高,对中老年男性身心健康危害重大。基于天癸理论,从中医视角辨治LOH具有重要临床价值。天癸源于肾精,受肝脏疏泄而发挥正常功能,天癸竭、肾虚... 男性迟发性性腺功能减退症(late onset hypogonadism, LOH)临床症状多样,影响广泛,患病率较高,对中老年男性身心健康危害重大。基于天癸理论,从中医视角辨治LOH具有重要临床价值。天癸源于肾精,受肝脏疏泄而发挥正常功能,天癸竭、肾虚、肝郁三者相互作用共同导致LOH发病。在此过程中,“天癸渐竭”是LOH发病的根本因素;“肾虚肝郁”是LOH发病的主要因素,其中,“肾虚”导致天癸化生乏源而亏虚更甚;“肝郁”则导致天癸疏泄失司而功能失调。“天癸渐竭、肾虚肝郁”构成LOH发病的中医核心病机,因此,治疗上强调未病调天癸,既病调肝肾,以期为LOH的论治提供新思路。 展开更多
关键词 男性迟发性性腺功能减退症 病机 天癸 肾虚 肝郁
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从中医节律探讨男性迟发性性腺功能减退症发病及择时治疗 被引量:1
6
作者 吴悔 宁港 +2 位作者 李波男 石若 周兴 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2023年第4期101-103,115,共4页
《灵枢·岁露论》曰:“人与天地相参,与日月相应也。”古人在这种“天人合一”的哲学思维影响下,将疾病的发生、治疗以及预防同自然规律紧紧联系起来,强调遵循自然运行规律。《黄帝内经》中还有很多关于节律变化的记载,尤以日节律... 《灵枢·岁露论》曰:“人与天地相参,与日月相应也。”古人在这种“天人合一”的哲学思维影响下,将疾病的发生、治疗以及预防同自然规律紧紧联系起来,强调遵循自然运行规律。《黄帝内经》中还有很多关于节律变化的记载,尤以日节律、四时节律及生长节律对人体影响最大。 展开更多
关键词 中医节律 男性迟发性性腺功能减退症 发病 择时治疗
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男性迟发性性腺功能减退症中西医结合思路与方法探讨 被引量:1
7
作者 李波男 孙天松 +5 位作者 宁港 吴悔 石若 何清湖 周兴 唐乾利 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第4期723-728,共6页
随着人口老龄化进程的加剧,男性迟发性性腺功能减退症(late-onset hypogonadism,LOH)已成为中老年男性的多发病,采取中西医结合方法对本病的治疗与预防具有一定的优势。从辨证与辨病结合、中药与西药结合、宏观与微观结合、“病证结合... 随着人口老龄化进程的加剧,男性迟发性性腺功能减退症(late-onset hypogonadism,LOH)已成为中老年男性的多发病,采取中西医结合方法对本病的治疗与预防具有一定的优势。从辨证与辨病结合、中药与西药结合、宏观与微观结合、“病证结合”动物模型研究、流行病学调查与治未病思想结合5大方面进行探讨。认为在LOH防治与研究中,运用中西医结合思路与方法可提升诊断效率,减少药物不良反应,增强疗效,缩短治疗周期。解释LOH发病的部分中医机制,预测不同人群LOH发病率,早期干预,降低或避免LOH的发生。中西医结合思路与方法在LOH基础与临床研究中的运用,具有一定优势,值得推广运用。 展开更多
关键词 男性迟发性性腺功能减退症 中西医结合 思路与方法 临床研究 基础研究 病证结合 治未病
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人类黑色素瘤相关抗原A9在早期宫颈癌中的表达研究 被引量:4
8
作者 高新萍 石若 +5 位作者 何海鹏 张惠 刘金 李雅钗 刘丹阳 梁义娟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第1期119-122,共4页
目的检测人类黑色素瘤相关抗原A9(MAGE-A9)在正常宫颈和早期宫颈癌组织中的表达,探讨其在早期宫颈癌中的致病机制及临床病理特征之间的关系。方法收集宫颈癌组织69例、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织30例和正常宫颈组织标本20例,应用免疫组织... 目的检测人类黑色素瘤相关抗原A9(MAGE-A9)在正常宫颈和早期宫颈癌组织中的表达,探讨其在早期宫颈癌中的致病机制及临床病理特征之间的关系。方法收集宫颈癌组织69例、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织30例和正常宫颈组织标本20例,应用免疫组织化学SP法检测MAGEA9的表达,应用统计学方法分析其与年龄、FIGO分期、组织病理学分级及淋巴结转移等因素间的关系。另取20例宫颈癌、15例CIN、15例正常的新鲜组织,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测不同宫颈组织中MAGE-A9基因及其蛋白的表达水平。结果 MAGE-A9在正常宫颈组织不表达,CIN及宫颈癌组织中均有表达,阳性表达率分别为5.00%、13.33%、47.83%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。其在早期宫颈癌的表达与FIGO期、组织病理学分级、淋巴结转移有关,与年龄、组织类型无关。RT-qPCR结果提示,宫颈癌组织中的MAGE-A9表达量明显高于CIN及正常组织,宫颈癌组与正常组及CIN组间差异有统计学意义(P<0.05),而CIN与正常组织之间差异无统计学意义。结论MAGE-A9在正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中均有表达,阳性表达率随着疾病的进展而增高,提示在宫颈癌的发生发展中MAGE-A9具有重要作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 MAGE-A9 免疫组化 PCR
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雄蚕益肾方对雄性迟发性性腺功能减退大鼠睾丸组织生物钟基因表达的影响
9
作者 吴悔 宁港 +5 位作者 李波男 石若 彭阿建 王浩宇 曾顺 周兴 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期76-82,共7页
目的:探讨雄蚕益肾方对雄性迟发性性腺功能减退症(LOH)大鼠睾丸组织细胞生物钟基因表达的影响。方法:48只8周龄雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,丙酸睾酮组,雄蚕益肾方低、中、高剂量组。模型组,丙酸睾酮组,雄蚕益肾方低、中、高剂量... 目的:探讨雄蚕益肾方对雄性迟发性性腺功能减退症(LOH)大鼠睾丸组织细胞生物钟基因表达的影响。方法:48只8周龄雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,丙酸睾酮组,雄蚕益肾方低、中、高剂量组。模型组,丙酸睾酮组,雄蚕益肾方低、中、高剂量组大鼠腹腔注射480 mg/(kg·d)D-半乳糖(D-gal),连续注射56 d进行LOH造模,正常组大鼠每日腹腔注射相同体积生理盐水。造模成功后,雄蚕益肾方低、中、高剂量组分别给予10.4、20.8、41.6 g/(kg·d)体重剂量的雄蚕益肾方中药汤剂灌胃,每组每日均早、晚各灌胃1次;丙酸睾酮组大鼠肌注5.21 mg/(kg·d)体重剂量的丙酸睾酮,每周3次;正常组和模型组给予相同体积的蒸馏水灌胃;各组均连续操作28d。实验结束后,采血离心取上清液ELISA法检测睾酮(T)水平,取睾丸组织进行RT-qPCR、Western印迹分别检测BMAL1、NR1D1、PER2、CRY1、StAR、CYP11A1 mRNA表达量和蛋白表达水平。结果:模型组大鼠血清睾酮水平、睾丸组织BMAL1、NR1D1、PER2、CRY1、StAR、CYP11A1在mRNA表达量和蛋白表达水平均显著低于正常组(P<0.05);与模型组相比,丙酸睾酮组、雄蚕益肾方低、中、高剂量组大鼠血清睾酮显著升高(P<0.05),雄蚕益肾方高剂量组大鼠睾丸组织StAR mRNA表达量、CYP11A1 mRNA表达量和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),雄蚕益肾方低、中、高剂量组大鼠睾丸组织StAR蛋白表达水平显著升高(P<0.05),丙酸睾酮组、雄蚕益肾方低、中、高剂量组大鼠睾丸组织BMAL1、NR1D1蛋白表达水平及PER2蛋白表达水平和mRNA表达量显著升高(P<0.05),雄蚕益肾方中、高剂量组大鼠睾丸组织BMAL1 mRNA表达量、CRY1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),雄蚕益肾方低、中、高剂量组大鼠睾丸组织NR1D1 mRNA表达量显著升高(P<0.05),丙酸睾酮组、雄蚕益肾方中、高剂量组大鼠睾丸组织CRY1 mRNA表达量显著升高(P<0.05)。结论:雄蚕益肾方能上 展开更多
关键词 雄蚕益肾方 男性迟发性性腺功能减退症 LEYDIG细胞 生物钟基因
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D-半乳糖诱导迟发性性腺功能减退大鼠模型的建立与评价 被引量:3
10
作者 宁港 吴悔 +3 位作者 李波男 石若 王浩宇 周兴 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期675-684,共10页
目的:探讨D-半乳糖(D-gal)复制迟发性性腺功能减退(LOH)大鼠模型的可行性及其最佳造模浓度与造模时长,为LOH基础研究提供可参考模型。方法:35只8周龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组,6周D-gal低、中、高剂量组,8周D-gal低、中、高剂量组。... 目的:探讨D-半乳糖(D-gal)复制迟发性性腺功能减退(LOH)大鼠模型的可行性及其最佳造模浓度与造模时长,为LOH基础研究提供可参考模型。方法:35只8周龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组,6周D-gal低、中、高剂量组,8周D-gal低、中、高剂量组。D-gal高、中、低剂量组分别腹腔注射480、240、120 mg/(kg·d)D-gal,6周组连续注射42 d,8周组连续注射56 d,正常对照组大鼠每日腹腔注射相同体积生理盐水,18月龄SD大鼠5只视为阳性对照组。实验结束后,进行大鼠悬尾试验和交配实验。称重后处死,采血检测空腹血糖,离心后取上清液酶联免疫法检测睾酮(T)水平,取双侧睾丸称重计算睾丸指数,取附睾收集精液用精子质量检测系统检查精液常规,取睾丸组织进行Western印迹检测BMAL1、NR1D1蛋白表达,以光学显微镜和透射电子显微镜观察睾丸组织的病理变化与超微结构。结果:与正常对照组比较,造模后大鼠血清T水平,6周D-gal中剂量组、6周D-gal高剂量组、8周D-gal中剂量组、8周D-gal高剂量组、阳性对照组均明显降低(P<0.05);精子浓度、前向运动精子百分率,8周D-gal高剂量组、阳性对照组均显著降低(P<0.05);8周D-gal低、中、高剂量组体重均显著增加(P<0.05);扑捉次数、射精次数各剂量造模组、阳性对照组均明显降低(P<0.05);悬尾不动时间6周D-gal高剂量组和8周D-gal低、中、高剂量组及阳性对照组均显著升高(P<0.05);空腹血糖各剂量造模组、阳性对照组均明显升高(P<0.05);睾丸组织中BMAL1蛋白表达量,6周D-gal高剂量组和8周D-gal低、中、高剂量组及阳性对照组均明显降低(P<0.05);NR1D1蛋白表达量,8周D-gal中、高剂量组及阳性对照组均明显降低(P<0.05)。与阳性对照组比较,大鼠血清T水平,6周D-gal高剂量组、8周D-gal高剂量组无显著差异(P>0.05);睾丸指数8周D-gal中、高剂量组无显著差异(P>0.05);精子浓度、前向运动精子百分 展开更多
关键词 迟发性性腺功能减退 大鼠模型 D-半乳糖
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人黑色素瘤抗原A3在宫颈癌组织和细胞中的表达研究 被引量:3
11
作者 石若 王琰 +6 位作者 何海鹏 李青 马英 梁义娟 刘金 齐冀 高新萍 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第11期1726-1729,共4页
目的:深入研究人黑色素瘤相关抗原A3(MAGE-A3)在宫颈癌(CC)组织和CC细胞系中的表达情况,探讨其在CC治疗中的意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测MAGE-A3在40例CC组织和20例正常宫颈组织中的表达。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测MA... 目的:深入研究人黑色素瘤相关抗原A3(MAGE-A3)在宫颈癌(CC)组织和CC细胞系中的表达情况,探讨其在CC治疗中的意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测MAGE-A3在40例CC组织和20例正常宫颈组织中的表达。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测MAGE-A3 mRNA在3种不同CC细胞株及正常宫颈细胞株中的表达情况。应用Western blot检测MAGE-A3蛋白在3种不同CC细胞株(HeLa、SiHa和C-33A)及正常宫颈细胞株(End1/E6E7)中的表达水平。结果:MAGE-A3在正常宫颈组织中不表达,在CC组织中有表达,阳性表达率分别为0%和70%。MAGE-A3 mRNA和蛋白在3种CC细胞株中的表达明显高于正常宫颈细胞株(P<0.05)。结论:MAGE-A3在CC组织和CC细胞中高表达,提示在CC的发生发展中MAGE-A3可能具有重要作用。 展开更多
关键词 MAGE-A3 宫颈肿瘤 基因表达
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河北保定地区234例汉族女性外阴测量分析 被引量:2
12
作者 马英 李青 +4 位作者 高新萍 何海鹏 王琰 石若 梁义娟 《中国生育健康杂志》 2022年第2期176-178,197,共4页
目的测量河北保定地区汉族已婚正常女性的外阴,为河北保定女性外阴部测量数据提供初步资料。方法对2018年6月至2019年12月于河北大学附属医院妇科门诊就诊的234例河北保定户籍的已婚汉族女性进行外阴测量,患者年龄18~50岁,每例测量16个... 目的测量河北保定地区汉族已婚正常女性的外阴,为河北保定女性外阴部测量数据提供初步资料。方法对2018年6月至2019年12月于河北大学附属医院妇科门诊就诊的234例河北保定户籍的已婚汉族女性进行外阴测量,患者年龄18~50岁,每例测量16个指标,对各项测量指标进行统计描述,与近期国内相关文献比较,并与年龄、身高、体重指数进行Pearson′s相关性分析。结果河北保定地区汉族正常女性外阴测量的各项指标均有一定的波动,各测量数据分别为阴蒂包皮长(25.8±2.7)mm,阴蒂头长(4.9±1.3)mm,阴蒂头宽(4.1±1.1)mm,尿蒂距(24.0±3.5)mm,尿阴距(10.3±5.4)mm,阴会距(15.2±5.3)mm,会阴体长度(24.6±4.2)mm,小阴唇底边长(45.3±6.4)mm,左前唇距(22.2±5.3)mm,右前唇距(22.4±5.4)mm,左后唇距(32.0±6.7)mm,右后唇距(31.7±6.6)mm,左大阴唇宽(17.5±5.1)mm,右大阴唇宽(17.3±4.8)mm,大阴唇长(78.3±11.3)mm,大阴唇宽(26.9±6.0)mm,外阴测量数据与近期国内报道的数据有差异,小阴唇底边长、大阴唇长及大阴唇宽与身高呈负相关,其他指标与身高无相关性;尿阴距、阴会距、会阴体长度、小阴唇底边长、前唇距、后唇距、小阴唇宽、大阴唇长、大阴唇宽与体重指数呈正相关,尿蒂距与体重指数呈负相关,阴蒂包皮长、阴蒂头长、阴蒂头宽与体重指数无相关性,各测量指标与年龄无相关性。结论通过与国内相关文献比较发现,中国不同地区不同种族外阴形态存在差异,河北保定汉族女性外阴测量数据,与王鲁文等报道的数据大部分没有显著差异,但阴蒂相关指标尤其是阴蒂头宽及大阴唇宽偏大。与新疆女性相比,无论是汉族还是维族,小阴唇相关指标偏大;除阴蒂头宽偏大外,其他相关数据差异不大;大阴唇长度偏小,但宽度无明显差异;其他数据大多数偏大。而与南粤地区汉族女性相比,小阴唇相关数据差异不明显;阴蒂相关指标同样 展开更多
关键词 女性外阴 小阴唇 大阴唇 人体测量
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MAGE-A3基因对宫颈癌细胞增殖及侵袭的影响及其机制探讨 被引量:3
13
作者 李青 马英 +6 位作者 何海鹏 石若 王琰 张惠 梁义娟 畅惠 高新萍 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期185-198,共14页
目的:研究黑素瘤相关抗原A3(melanoma-associated antigen-A3,MAGE-A 3)基因对宫颈癌细胞增殖及侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:首先采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测宫颈癌HeLa和Siha细胞中MAGE-A3 mRNA和蛋白的... 目的:研究黑素瘤相关抗原A3(melanoma-associated antigen-A3,MAGE-A 3)基因对宫颈癌细胞增殖及侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:首先采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测宫颈癌HeLa和Siha细胞中MAGE-A3 mRNA和蛋白的表达水平。再分别用携带有MAGE-A3基因的慢病毒(LV-MAGE-A3)感染Siha细胞,构建过表达MAGE-A3基因的细胞株(Siha-MAGE-A3细胞);用携带有靶向MAGE-A3基因的siRNA(siRNA-MAGE-A3)转染HeLa细胞,构建沉默MAGE-A3基因表达的细胞株(HeLa-siRNA-MAGE-A3细胞);实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测转染效率。采用细胞克隆形成实验和CCK-8法检测过表达或沉默MAGE-A 3基因表达对HeLa和Siha细胞克隆形成和增殖能力的影响;Transwell侵袭实验和细胞划痕愈合实验检测过表达或沉默MAGE-A3基因表达对HeLa和Siha细胞侵袭和迁移能力的影响;实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测过表达或沉默MAGE-A3基因对宫颈癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的影响;蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PBK,又称AKT)通路关键分子AKT及磷酸化AKT(phospho-AKT,p-AKT)表达水平的变化。结果:MAGE-A3基因在HeLa细胞中的表达被沉默,在Siha细胞中被成功过表达。与对照组和阴性对照组相比,MAGE-A3基因过表达Siha-MAGE-A3细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显增强(P值均<0.01),E-cadherin蛋白的表达水平下调(P<0.05),N-cadherin、vimentin和p-AKT蛋白的表达水平上调(P值均<0.01);与此相反,MAGE-A3基因沉默后,HeLa-siRNA-MAGE-A3细胞的增殖、迁移和侵袭能力受到明显抑制(P值均<0.01),E-cadherin蛋白的表达水平上调(P<0.05),N-cadherin、vimentin和p-AKT蛋白的表达水平下调(P值均<0.01)。结论:过表达MAGE-A3基因可以促进宫颈癌细胞的增 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 黑素瘤特异性抗原 细胞增殖 细胞运动 上皮-间质转化
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基于网络药理学方法探讨佳蓉片治疗男性迟发性性腺功能减退症的可能机制
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作者 胡瑞 吴悔 +4 位作者 李波男 宁港 石若 周兴 高茗 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期915-925,共11页
目的:通过网络药理学方法研究佳蓉片治疗男性迟发性性腺功能减退症(LOH)的分子靶点和信号通路,探讨可能潜在机制。方法:应用中药系统药理学分析平台(TCMSP)获取佳蓉片活性成分和作用靶点;GeneCards、OMIM数据库获取LOH的疾病靶点;筛选... 目的:通过网络药理学方法研究佳蓉片治疗男性迟发性性腺功能减退症(LOH)的分子靶点和信号通路,探讨可能潜在机制。方法:应用中药系统药理学分析平台(TCMSP)获取佳蓉片活性成分和作用靶点;GeneCards、OMIM数据库获取LOH的疾病靶点;筛选出与佳蓉片共同的靶点,Venny 2.1绘制共同靶点韦恩图;STRING构建共同靶点互作网络(PPI);Cytoscape 3.7.2软件构建佳蓉片-活性成分-LOH-靶点交集的网络;R语言软件对共同靶点进行生物功能(GO)和KEGG富集分析,筛选出佳蓉片治疗LOH的可能信号通路。结果:共获得佳蓉片80个生物活性成分,64个佳蓉片治疗LOH的共同靶点,其中核心靶点依次有IL-6、INS、AKT1、JUN、MAPK8等,GO和KEGG分析,上述靶点主要涉及MAPK、HIF-1、Ras、ErbB等多条信号通路。结论:网络药理学分析,佳蓉片治疗LOH具有的多靶点、多途径、多层次特点,主要与Leydig细胞睾酮合成酶表达、氧化应激、凋亡等相关,为后续临床和基础实验验证提供了很好的理论依据。 展开更多
关键词 网络药理学 佳蓉片 男性迟发性性腺功能减退症
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167例石工眼外伤的统计分析
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作者 石若 《中华眼外伤职业眼病杂志》 北大核心 1993年第S1期393-393,共1页
长泰县有大小石区37个,分布在5个乡镇及1个国营农场。有打石工592人,除12个家属女工外,其余都是男工,男女工比例为50:1,在529人中年龄在21~35岁者385人,占65%;35岁以上者106人,占18%;
关键词 眼外伤 长泰县 角膜异物伤 统计分析 眼球穿孔伤 异物部位 医院眼科 年龄组 下者
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醋酸氢化泼尼松局部注射治疗霰粒肿
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作者 石若 《福建医药杂志》 CAS 1992年第3期67-67,共1页
笔者从1978~1989年应用醋酸氢化泼尼松局部注射治疗霰粒肿137只眼,取得了较好的疗效。注射方法:患眼眼睑皮肤局部消毒,以4号注射针头将0.2ml醋酸氢化泼尼松经皮肤直接注入霰粒肿内。注射后滴0.25%氯霉素眼药水,并遮盖患眼1天。10天后... 笔者从1978~1989年应用醋酸氢化泼尼松局部注射治疗霰粒肿137只眼,取得了较好的疗效。注射方法:患眼眼睑皮肤局部消毒,以4号注射针头将0.2ml醋酸氢化泼尼松经皮肤直接注入霰粒肿内。注射后滴0.25%氯霉素眼药水,并遮盖患眼1天。10天后如果肿块不见消散,即可再行第二次同剂量注射。消散标准应为触诊无肿块或其直径≤1mm。治疗结果本组治疗的137只眼中,86只眼1次注射后消散,27只眼在第二次注射后才消散,有效率为82.5%。自1964年Leinfelder氏首先报告用皮质激素制剂局部注射治愈急性霰粒肿之后,又有人作过报道。 展开更多
关键词 霰粒肿 局部注射治疗 眼睑皮肤 氢化泼尼松 氯霉素眼药水 局部消毒 注射针头 次同 皮质激素 睑板腺
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