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急性淋巴细胞白血病白细胞磷酸化蛋白质分析方法的建立
1
作者 段春燕 皮爽 +2 位作者 何涛 景莉 郑小莉 《泸州医学院学报》 2008年第3期255-257,共3页
目的:建立一种对急性淋巴细胞白血病白细胞磷酸化蛋白质分析方法。方法:分离人新鲜外周血白细胞,并随机分为刺激组和对照组。裂解细胞,用Bradford法测定细胞蛋白质含量,利用亲和层析富集白细胞磷酸化蛋白质,SDS-PAGE分离磷酸化蛋白质,采... 目的:建立一种对急性淋巴细胞白血病白细胞磷酸化蛋白质分析方法。方法:分离人新鲜外周血白细胞,并随机分为刺激组和对照组。裂解细胞,用Bradford法测定细胞蛋白质含量,利用亲和层析富集白细胞磷酸化蛋白质,SDS-PAGE分离磷酸化蛋白质,采用ScionImage软件分析电泳结果。结果:①电泳图谱显示每条泳道中蛋白质条带清晰,其相对分子量主要介于26～36kDa以及47～65kDa之间。②EGF刺激后出现有磷酸化蛋白质条带的增减或某些磷酸化蛋白质条带灰度的增强或减弱。结论:采用本研究建立的分析磷酸化蛋白质的方法对急性淋巴细胞白血病白细胞ERK相关磷酸化蛋白质进行动态的分析,其方法较简便、结果可信,可为细胞信息传递磷酸化蛋白质组的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 磷酸化蛋白质
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STAT6报告基因的构建与在成纤维细胞中表达
2
作者 王孝芸 皮爽 +3 位作者 刘春华 罗丽 李国平 熊瑛 《泸州医学院学报》 2009年第1期14-17,共4页
目的构建携带信号转导子与转录活化子6(STAT6)基因的真核表达载体,为进一步研究STAT6转录因子在肺纤维化中的作用与作用机制提供基础。方法:以含有STAT6的基因文库为模板通过PCR反应扩增出该基因的全序列cDNA,并克隆到增强型绿色荧光报... 目的构建携带信号转导子与转录活化子6(STAT6)基因的真核表达载体,为进一步研究STAT6转录因子在肺纤维化中的作用与作用机制提供基础。方法:以含有STAT6的基因文库为模板通过PCR反应扩增出该基因的全序列cDNA,并克隆到增强型绿色荧光报告基因的真核表达质粒中,经酶切鉴定及测序分析对重组质粒pEGFP-STAT6作进一步鉴定。将重组质粒pEGFP-STAT6转染到成纤维细胞中。结果:STAT6基因能正确克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,构建成重组质粒pEGFP-STAT6。STAT6基因在成纤维细胞中表达。结论:成功构建pEGFP-stat6重组质粒,并在成纤维细胞中表达。 展开更多
关键词 信号转导子与转录活化子6 成纤维细胞 真核表达载体
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