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稳定表达猪德尔塔冠状病毒N蛋白的Vero细胞系的建立及鉴定 被引量:1
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作者 钱炳旭 薄宗义 +7 位作者 雪雁 张成成 郭梦娇 李梦娇 廖凯 薛峰 吴艳涛 张小荣 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第1期56-61,共6页
为获得稳定表达猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)核衣壳(N)蛋白的非洲绿猴肾(Vero)细胞系,本研究将PDCoV-N基因克隆入慢病毒载体中,获得重组质粒pLVX-PDCoV-N,利用慢病毒包装系统转染293T细胞,包装成表达N蛋白的慢病毒颗粒,慢病毒感染Vero细胞,... 为获得稳定表达猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)核衣壳(N)蛋白的非洲绿猴肾(Vero)细胞系,本研究将PDCoV-N基因克隆入慢病毒载体中,获得重组质粒pLVX-PDCoV-N,利用慢病毒包装系统转染293T细胞,包装成表达N蛋白的慢病毒颗粒,慢病毒感染Vero细胞,嘌呤霉素加压筛选目的细胞。RT-PCR扩增N基因和测序表明细胞系基因组中存在N蛋白编码序列,Western blot和IFA试验表明N蛋白可在细胞系中稳定表达。应用制备的细胞系对临床PDCoV阳性血清样品进行检测,与ELISA检测结果符合率达到100%。本研究成功建立了稳定表达PDCoV N蛋白的Vero细胞系,为PDCoV N蛋白生物学特性研究和PDCoV的临床检测、流行病学调查奠定了基础。 展开更多
关键词 猪德尔塔冠状病毒 核衣壳(N)蛋白 慢病毒 稳转细胞系
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猪德尔塔冠状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用 被引量:5
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作者 钱炳旭 雪雁 +6 位作者 张成成 郭梦娇 李梦娇 廖凯 薛峰 吴艳涛 张小荣 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1234-1241,共8页
通过DNAStar Protean软件对猪德尔塔冠状病毒(porcine Deltacoronavirus,PDCoV)N蛋白氨基酸序列进行分析,选取抗原性较强的区段(265~342 aa),根据大肠杆菌密码子使用的偏嗜性进行优化设计并人工合成了对应的基因片段N-Opti。利用融合表... 通过DNAStar Protean软件对猪德尔塔冠状病毒(porcine Deltacoronavirus,PDCoV)N蛋白氨基酸序列进行分析,选取抗原性较强的区段(265~342 aa),根据大肠杆菌密码子使用的偏嗜性进行优化设计并人工合成了对应的基因片段N-Opti。利用融合表达载体pET-32a进行原核表达,获得的融合蛋白携带His标签,命名为PDCoV-N-His,且呈可溶性表达。Western blot鉴定结果显示,该重组N蛋白约为31 kDa,与预期相符。利用Ni-NTA亲和层析介质纯化重组N蛋白作为包被抗原进行ELISA检测,并对反应条件进行摸索、优化,建立了检测PDCoV特异性抗体的间接ELISA方法。经测定,该方法具有良好的特异性且重复性良好,与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PRoV)特异性阳性血清无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%。应用该方法对20份已知阳性血清和20份阴性血清分别进行检测,结果显示阳性符合率为100%(20/20),阴性符合率为100%(20/20)。结果表明,该方法的特异性良好,可以进一步用于PDCoV感染的快速诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 猪德尔塔冠状病毒 核衣壳(N)蛋白 原核表达 间接ELISA
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一株超强马立克病病毒的分离鉴定与致病性试验 被引量:4
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作者 雪雁 张小荣 +4 位作者 张成成 郭梦娇 李梦娇 钱炳旭 吴艳涛 《动物医学进展》 北大核心 2020年第11期41-47,共7页
从接种过马立克病CVI988/Rispens疫苗仍发生肿瘤性疾病的鸡群中分离到1株马立克病病毒(Marek's disease virus,MDV),经琼脂扩散试验、病毒分离、间接免疫荧光试验、PCR鉴定和致病性试验鉴定为血清Ⅰ型MDV,命名为MDV JS201801株。该... 从接种过马立克病CVI988/Rispens疫苗仍发生肿瘤性疾病的鸡群中分离到1株马立克病病毒(Marek's disease virus,MDV),经琼脂扩散试验、病毒分离、间接免疫荧光试验、PCR鉴定和致病性试验鉴定为血清Ⅰ型MDV,命名为MDV JS201801株。该毒株基因组含2个拷贝的132 bp重复序列;meq基因的第115、139、176和217位氨基酸发生突变,与MDV强毒株的特性相符。与MDV参考毒株进行meq基因序列比对分析,发现MDV JS201801株与超强毒株ZC2014和GX0101的同源性高达99.7%。用MDV JS201801株对SPF鸡进行攻毒试验,肿瘤发生率为85%;而接种过CVI988/Rispens疫苗的SPF鸡在MDV JS201801株攻毒后的肿瘤发生率为20%。研究证明,MDV JS201801株为MDV超强毒株,并且CVI988/Rispens疫苗对该毒株不能提供足够的免疫保护。 展开更多
关键词 马立克病病毒 分离鉴定 致病相关基因 动物试验
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多位置多形态多生牙1例报道并文献回顾 被引量:2
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作者 刘婷 张伟伟 +2 位作者 程艺 张荣和 雪雁 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2022年第3期378-380,共3页
多生牙(supernumerary tooth)又称额外牙,是指多于正常牙数以外的牙齿[1],好发部位依次为上颌骨前部、磨牙区和前磨牙区;形状变异较多,包括锥形、结节型、补充型等。临床中常见单个部位的多生牙,而多个位置同时存在不同形态的多生牙者... 多生牙(supernumerary tooth)又称额外牙,是指多于正常牙数以外的牙齿[1],好发部位依次为上颌骨前部、磨牙区和前磨牙区;形状变异较多,包括锥形、结节型、补充型等。临床中常见单个部位的多生牙,而多个位置同时存在不同形态的多生牙者较为少见。本文报道1例多位置多形态的多生牙病例,并进行相关文献的回顾,探讨其发病原因、临床特征、危害、诊断及治疗等,以提示医生对该疾病的认识,为今后相关的研究提供参考。 展开更多
关键词 多生牙 埋伏牙 好发部位
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网球运动员核心力量训练方法研究 被引量:3
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作者 雪雁 《网球天地》 2022年第1期102-104,共3页
在当今网球竞技运动中,无论是国际比赛、国内比赛,还是青少年的系列比赛,倘若网球运动员要想实现技战术水平的不断提升,必须要具备良好的身体素质,其中,网球运动员的核心力量尤为重要。本文首先介绍了网球运动核心力量的内涵特征,然后... 在当今网球竞技运动中,无论是国际比赛、国内比赛,还是青少年的系列比赛,倘若网球运动员要想实现技战术水平的不断提升,必须要具备良好的身体素质,其中,网球运动员的核心力量尤为重要。本文首先介绍了网球运动核心力量的内涵特征,然后阐述了核心力量对网球运动的重要性,接着分析了网球运动员核心力量训练现状,最后提出了网球运动员核心力量训练路径和方法,希望可以为网球运动员核心力量训练的顺利进行提供一些帮助。 展开更多
关键词 网球 运动员 核心力量 训练
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鸽感染H9N2亚型禽流感病毒的诊治 被引量:2
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作者 杨俊荣 陈健皓 +3 位作者 季文彬 谢迪 雪雁 张小荣 《中国家禽》 北大核心 2017年第11期74-76,共3页
鸽通常被认为对禽流感病毒易感性不高。近期江苏省泰兴市某农户饲养的肉鸽出现呼吸道症状和腹泻,并伴有一定程度的死亡。经实验室诊断,从病死鸽体内分离到H9N2亚型禽流感病毒,且鸽群血清抗体检测结果显示H9亚型禽流感病毒抗体阳性,结合... 鸽通常被认为对禽流感病毒易感性不高。近期江苏省泰兴市某农户饲养的肉鸽出现呼吸道症状和腹泻,并伴有一定程度的死亡。经实验室诊断,从病死鸽体内分离到H9N2亚型禽流感病毒,且鸽群血清抗体检测结果显示H9亚型禽流感病毒抗体阳性,结合该鸽群未接种禽流感疫苗的事实,确诊为H9N2亚型禽流感病毒感染。提示在鸽饲养过程中应该考虑H9亚型禽流感病毒感染的预防。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒
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安氏Ⅲ类错Bolton指数的检测 被引量:2
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作者 雪雁 范存晖 +1 位作者 陈秀娟 杨茜 《青岛大学医学院学报》 CAS 2011年第4期335-337,共3页
目的通过对安氏Ⅲ类错病人Bolton指数的测量,分析上下颌牙量的差异,探讨上下颌牙量关系对正畸诊断和治疗的影响。方法选取100例(男50例,女50例)安氏Ⅲ类错病人的初始模型,分别测量其Bolton指数,并与正常参考值进行比较。结果安氏Ⅲ... 目的通过对安氏Ⅲ类错病人Bolton指数的测量,分析上下颌牙量的差异,探讨上下颌牙量关系对正畸诊断和治疗的影响。方法选取100例(男50例,女50例)安氏Ⅲ类错病人的初始模型,分别测量其Bolton指数,并与正常参考值进行比较。结果安氏Ⅲ类错病人Bolton指数前牙比平均值为(79.70±2.73)%,全牙比平均值为(92.21±2.31)%,均较正常参考值增大,差异有显著性(u=3.29、3.72,P<0.05)。100例病人中前牙比和全牙比在正常范围内者分别占55%和54%,男女性别间差异无显著性(P>0.05)。结论安氏Ⅲ类错病人Bolton指数过大可能是引起错的原因之一,Bolton指数分析应成为诊断和制定正畸治疗计划的依据之一。 展开更多
关键词 错 安氏Ⅲ类 BOLTON指数 正畸学 矫正
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定期牙周洁治对固定正畸病人龈下菌斑中具核梭杆菌的影响 被引量:1
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作者 夏青 雪雁 +3 位作者 于新波 申勇 金娜 范存晖 《青岛大学医学院学报》 CAS 2014年第5期430-432,共3页
目的探讨定期牙周洁治对固定正畸病人龈下菌斑中具核梭杆菌(Fn)的影响。方法选取固定正畸病人48例,随机分为A、B、C共3组,每组16例,牙周洁治周期分别为1、3、6个月,分别于矫治前及矫治1、3、6、9个月时,采用荧光定量PCR法检测各组龈下... 目的探讨定期牙周洁治对固定正畸病人龈下菌斑中具核梭杆菌(Fn)的影响。方法选取固定正畸病人48例,随机分为A、B、C共3组,每组16例,牙周洁治周期分别为1、3、6个月,分别于矫治前及矫治1、3、6、9个月时,采用荧光定量PCR法检测各组龈下菌斑中Fn的百分含量。结果 A组和B组矫治1、3、6、9个月时龈下菌斑中Fn的百分含量与矫治前比较差异无显著性(P>0.05),C组在矫治6个月时龈下菌斑中Fn的百分含量较矫治前显著升高(t=2.81,P<0.05)。矫治6个月时,C组龈下菌斑中Fn的百分含量明显高于A组(F=6.62,q=5.14,P<0.05),而其他各组间各时间点龈下菌斑中Fn的百分含量比较差异无显著性(P>0.05)。结论定期牙周洁治对控制固定正畸病人龈下菌斑中Fn的含量具有一定作用。 展开更多
关键词 牙周洁治 正畸学 矫正 具核梭杆菌 聚合酶链反应
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浅谈儿童网球训练中的兴趣爱好培养策略 被引量:5
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作者 雪雁 《决策探索》 2017年第12期79-79,共1页
儿童网球训练是对刚刚学习网球的儿童进行启发诱导式的培训。儿童网球训练是建立在培养儿童对于网球训练的兴趣与爱好的基础之上的,关乎儿童的心理、生理等各个方面的健康。良好的儿童网球启蒙能够培养儿童兴趣,而兴趣又能够帮助儿童进... 儿童网球训练是对刚刚学习网球的儿童进行启发诱导式的培训。儿童网球训练是建立在培养儿童对于网球训练的兴趣与爱好的基础之上的,关乎儿童的心理、生理等各个方面的健康。良好的儿童网球启蒙能够培养儿童兴趣,而兴趣又能够帮助儿童进行训练,可以说二者是相辅相成、相互促进的。因而,探讨儿童网球训练当中兴趣爱好的培养策略对于儿童网球训练起着非常重要的作用。 展开更多
关键词 儿童 网球训练 兴趣爱好 培养策略
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