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基于镧系高敏荧光的生物毒素现场快速检测方法的研究
被引量：
4
1
作者
刘军波
金志颖
+7 位作者
白雪
欣
万伟
杨浩
李岩伟
吴俊清
章健
高姗
王景林
《军事医学》
CAS
2021年第7期537-542,547,共7页
目的利用时间分辨荧光技术建立一种可快速、准确地对蓖麻毒素、A型肉毒毒素及产气荚膜梭菌ε毒素进行定量检测的方法。方法首先合成了一种可见光激发的镧系荧光微球,通过比较不同粒径的铕离子荧光微球,筛选出最佳粒径的微球偶联标记效...
目的利用时间分辨荧光技术建立一种可快速、准确地对蓖麻毒素、A型肉毒毒素及产气荚膜梭菌ε毒素进行定量检测的方法。方法首先合成了一种可见光激发的镧系荧光微球,通过比较不同粒径的铕离子荧光微球,筛选出最佳粒径的微球偶联标记效价最高的捕获抗体,分别与相应检测抗体平行组合,确定最优的配伍组合条件建立检测方法。其次,对该法的敏感性、精密性、定量能力和特异性进行评价。结果所建立的时间分辨荧光免疫层析法(TRFIC)可在20 min内完成对3种生物毒素的定性/定量检测。3种毒素的最低检出限均可达0.5 ng/ml,定量范围为0.5~50 ng/ml,3种毒素间及与黄曲霉毒素B_(1)、T-2毒素均无交叉反应,批内重复性和批间重复性变异系数均小于15%。结论该研究建立了一种基于可见光激发的TRFIC,在生物毒素的检测中获得了较高的最低检测限,与配套的小型便携式检测仪器一起使用,具有检测快速、可远程传输结果的优势,未来在生物反恐、生物武器核查等领域具有较高的应用价值和应用前景。
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关键词
蓖麻毒素
A型肉毒毒素
产气荚膜梭菌ε毒素
镧系荧光
免疫层析
生物安全
原文传递
基于微针的经皮免疫的应用现状及研究进展
被引量：
2
2
作者
李月
王菁
+9 位作者
金志颖
万伟
白雪
欣
胡宸艺
李岩伟
辛文文
康琳
杨浩
王景林
高姗
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第9期3301-3315,共15页
微针经皮免疫借助微针刺破皮肤的角质层,使疫苗高效地被抗原提呈细胞识别后引起特异性免疫应答,从而实现疫苗的经皮免疫。由于微针的经皮免疫所具有的高效诱导免疫应答、低痛感、易储存等优点,近年来被广泛应用于多种疫苗免疫接种。本...
微针经皮免疫借助微针刺破皮肤的角质层,使疫苗高效地被抗原提呈细胞识别后引起特异性免疫应答,从而实现疫苗的经皮免疫。由于微针的经皮免疫所具有的高效诱导免疫应答、低痛感、易储存等优点,近年来被广泛应用于多种疫苗免疫接种。本综述对用于经皮免疫的各类微针(固体微针、空心微针、涂层微针和可溶性微针)的制备材料、在经皮免疫的应用、领域的研究热点与尚需要解决的问题进行探讨,以期为研究者的制备和应用提供参考和借鉴。
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关键词
微针
疫苗
经皮免疫
CITESPACE
原文传递
浅谈沥青路面画层摊铺的质量控制
3
作者
贾士通
王艳
白雪
欣
《内蒙古林业调查设计》
2005年第B12期155-156,共2页
文章对沥青路面面层摊铺的质量控制进行探讨,着重对摊铺工艺、碾压工艺等提出一些建议和意见。
关键词
沥青
路面
摊铺
质量
控制
下载PDF
职称材料
副溶血弧菌耐热直接溶血素DAS-ELISA检测方法的建立
被引量：
1
4
作者
白雪
欣
胡宸艺
+6 位作者
金志颖
万伟
李月
王菁
李岩伟
高姗
王景林
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第8期666-672,共7页
目的建立副溶血弧菌耐热直接溶血素的双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法。方法本研究通过PCR技术扩增副溶血弧菌耐热直接溶血素基因序列,并将其克隆至pET-28a载体后进行原核表达,对表达蛋白进行纯化...
目的建立副溶血弧菌耐热直接溶血素的双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法。方法本研究通过PCR技术扩增副溶血弧菌耐热直接溶血素基因序列,并将其克隆至pET-28a载体后进行原核表达,对表达蛋白进行纯化和鉴定,随后用高纯度的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,得到抗体后利用分子互作测定抗体的亲和力,并利用该抗体建立检测副溶血弧菌耐热直接溶血素的DAS-ELISA方法。通过棋盘法对该方法的反应条件进行优化,建立标准曲线,并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。结果本实验制备的多克隆抗体亲和力可达1×10^(-8),使用该高亲和力抗体建立的DAS-ELISA方法灵敏度为78 ng/mL,定量范围为78~312 ng/mL;与创伤弧菌溶细胞毒素(Vibrio vulnificus hemolysin,VVH)、产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringensαtoxin,CPA)以及产气荚膜梭菌ε毒素(epsilon toxin,ETX)均无交叉反应;利用扇贝、花蛤和魁蚶制备海鲜模拟样本,在上述3种模拟样本内添加重组蛋白构建标准曲线,评价本方法复杂基质中检出能力时发现灵敏度均并未发生改变;同时在上述3种模拟样本中添加菌液上清评价本方法检测天然毒素能力,检出率为100%。结论成功构建了一种用于副溶血弧菌耐热直接溶血素检测的DAS-ELISA方法,该方法特异性强、灵敏度高,适用于复杂基质检测,有望开发成副溶血弧菌耐热直接溶血素快速诊断试剂盒,具有良好的应用前景。
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关键词
耐热直接溶血素
多克隆抗体
DAS-ELISA
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职称材料
题名
基于镧系高敏荧光的生物毒素现场快速检测方法的研究
被引量：
4
1
作者
刘军波
金志颖
白雪
欣
万伟
杨浩
李岩伟
吴俊清
章健
高姗
王景林
机构
军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所
河北师范大学生命科学学院
成都微瑞生物科技有限公司
出处
《军事医学》
CAS
2021年第7期537-542,547,共7页
基金
国家十三五生物安全重点研发专项(2018YFC1200501)
国家重点实验室自主课题(SKLPBS1812)。
文摘
目的利用时间分辨荧光技术建立一种可快速、准确地对蓖麻毒素、A型肉毒毒素及产气荚膜梭菌ε毒素进行定量检测的方法。方法首先合成了一种可见光激发的镧系荧光微球,通过比较不同粒径的铕离子荧光微球,筛选出最佳粒径的微球偶联标记效价最高的捕获抗体,分别与相应检测抗体平行组合,确定最优的配伍组合条件建立检测方法。其次,对该法的敏感性、精密性、定量能力和特异性进行评价。结果所建立的时间分辨荧光免疫层析法(TRFIC)可在20 min内完成对3种生物毒素的定性/定量检测。3种毒素的最低检出限均可达0.5 ng/ml,定量范围为0.5~50 ng/ml,3种毒素间及与黄曲霉毒素B_(1)、T-2毒素均无交叉反应,批内重复性和批间重复性变异系数均小于15%。结论该研究建立了一种基于可见光激发的TRFIC,在生物毒素的检测中获得了较高的最低检测限,与配套的小型便携式检测仪器一起使用,具有检测快速、可远程传输结果的优势,未来在生物反恐、生物武器核查等领域具有较高的应用价值和应用前景。
关键词
蓖麻毒素
A型肉毒毒素
产气荚膜梭菌ε毒素
镧系荧光
免疫层析
生物安全
Keywords
ricin toxin
botulinum toxin type A
epsilon toxin
lanthanide fluorescence
immunochromatography
biosafety
分类号
Q93-332 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
基于微针的经皮免疫的应用现状及研究进展
被引量：
2
2
作者
李月
王菁
金志颖
万伟
白雪
欣
胡宸艺
李岩伟
辛文文
康琳
杨浩
王景林
高姗
机构
军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第9期3301-3315,共15页
基金
北京市科技新星计划(Z201100006820028)。
文摘
微针经皮免疫借助微针刺破皮肤的角质层,使疫苗高效地被抗原提呈细胞识别后引起特异性免疫应答,从而实现疫苗的经皮免疫。由于微针的经皮免疫所具有的高效诱导免疫应答、低痛感、易储存等优点,近年来被广泛应用于多种疫苗免疫接种。本综述对用于经皮免疫的各类微针(固体微针、空心微针、涂层微针和可溶性微针)的制备材料、在经皮免疫的应用、领域的研究热点与尚需要解决的问题进行探讨,以期为研究者的制备和应用提供参考和借鉴。
关键词
微针
疫苗
经皮免疫
CITESPACE
Keywords
microneedle
vaccine
percutaneous immunity
citespace
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
浅谈沥青路面画层摊铺的质量控制
3
作者
贾士通
王艳
白雪
欣
机构
内蒙古金河林业局
内蒙古森工进出口有限责任公司
毕拉河林业
出处
《内蒙古林业调查设计》
2005年第B12期155-156,共2页
文摘
文章对沥青路面面层摊铺的质量控制进行探讨,着重对摊铺工艺、碾压工艺等提出一些建议和意见。
关键词
沥青
路面
摊铺
质量
控制
分类号
U416.217 [交通运输工程—道路与铁道工程]
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职称材料
题名
副溶血弧菌耐热直接溶血素DAS-ELISA检测方法的建立
被引量：
1
4
作者
白雪
欣
胡宸艺
金志颖
万伟
李月
王菁
李岩伟
高姗
王景林
机构
安徽医科大学基础医学院
军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第8期666-672,共7页
基金
“十三五”国家重点研发计划子课题(No.2018YFC1602505)。
文摘
目的建立副溶血弧菌耐热直接溶血素的双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法。方法本研究通过PCR技术扩增副溶血弧菌耐热直接溶血素基因序列,并将其克隆至pET-28a载体后进行原核表达,对表达蛋白进行纯化和鉴定,随后用高纯度的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,得到抗体后利用分子互作测定抗体的亲和力,并利用该抗体建立检测副溶血弧菌耐热直接溶血素的DAS-ELISA方法。通过棋盘法对该方法的反应条件进行优化,建立标准曲线,并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。结果本实验制备的多克隆抗体亲和力可达1×10^(-8),使用该高亲和力抗体建立的DAS-ELISA方法灵敏度为78 ng/mL,定量范围为78~312 ng/mL;与创伤弧菌溶细胞毒素(Vibrio vulnificus hemolysin,VVH)、产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringensαtoxin,CPA)以及产气荚膜梭菌ε毒素(epsilon toxin,ETX)均无交叉反应;利用扇贝、花蛤和魁蚶制备海鲜模拟样本,在上述3种模拟样本内添加重组蛋白构建标准曲线,评价本方法复杂基质中检出能力时发现灵敏度均并未发生改变;同时在上述3种模拟样本中添加菌液上清评价本方法检测天然毒素能力,检出率为100%。结论成功构建了一种用于副溶血弧菌耐热直接溶血素检测的DAS-ELISA方法,该方法特异性强、灵敏度高,适用于复杂基质检测,有望开发成副溶血弧菌耐热直接溶血素快速诊断试剂盒,具有良好的应用前景。
关键词
耐热直接溶血素
多克隆抗体
DAS-ELISA
Keywords
thermostable direct hemolysin
polyclonal antibody
DAS-ELISA
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于镧系高敏荧光的生物毒素现场快速检测方法的研究
刘军波
金志颖
白雪
欣
万伟
杨浩
李岩伟
吴俊清
章健
高姗
王景林
《军事医学》
CAS
2021
4
原文传递
2
基于微针的经皮免疫的应用现状及研究进展
李月
王菁
金志颖
万伟
白雪
欣
胡宸艺
李岩伟
辛文文
康琳
杨浩
王景林
高姗
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
原文传递
3
浅谈沥青路面画层摊铺的质量控制
贾士通
王艳
白雪
欣
《内蒙古林业调查设计》
2005
0
下载PDF
职称材料
4
副溶血弧菌耐热直接溶血素DAS-ELISA检测方法的建立
白雪
欣
胡宸艺
金志颖
万伟
李月
王菁
李岩伟
高姗
王景林
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
下载PDF
职称材料
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