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生物科学专业综合改革和创新人才培养实践 被引量:22
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作者 李娘辉 周云龙 +6 位作者 张松 李东风 王安利 林正眉 李昊 高峰 《高校生物学教学研究(电子版)》 2015年第4期8-11,共4页
本文介绍了华南师范大学生物科学专业综合改革和创新人才培养的研究和实践。着重从改革生物科学专业人才培养方案,构建经济社会发展和国家基础教育需要的生物科学专业课程体系;改革教师培养和使用机制,加强教学团队建设;改革生物学课程... 本文介绍了华南师范大学生物科学专业综合改革和创新人才培养的研究和实践。着重从改革生物科学专业人才培养方案,构建经济社会发展和国家基础教育需要的生物科学专业课程体系;改革教师培养和使用机制,加强教学团队建设;改革生物学课程教学内容,加强国家级新教材和精品教材建设;改革教学方式和方法,深化教学研究;强化实践教学环节,改革创新实践教学;加强教学管理的改革,提升教学管理水平;建立创新人才培养模式,大力提升人才培养质量和水平等方面进行了讨论。 展开更多
关键词 生物科学专业 专业综合改革 创新人才培养
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人鼻咽癌细胞株中类肿瘤干细胞的分离、培养及鉴定 被引量:20
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作者 关小芳 文忠 +4 位作者 牟少凤 张宏征 谢民强 郭梦和 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1461-1464,共4页
目的检测CD133在人鼻咽癌细胞株SUNE中的表达以及CD133+肿瘤细胞的体外增殖、分化情况,并对其进行类肿瘤干细胞的鉴定。方法采用免疫荧光细胞化学技术及流式细胞仪检测鼻咽癌细胞株SUNE中CD133的表达情况以及CD133+细胞体外分化能力;免... 目的检测CD133在人鼻咽癌细胞株SUNE中的表达以及CD133+肿瘤细胞的体外增殖、分化情况,并对其进行类肿瘤干细胞的鉴定。方法采用免疫荧光细胞化学技术及流式细胞仪检测鼻咽癌细胞株SUNE中CD133的表达情况以及CD133+细胞体外分化能力;免疫磁珠分选技术纯化CD133+肿瘤细胞;MTT法检测CD133+细胞的体外增殖能力,并将其与CD133-及未分选细胞进行比较。结果鼻咽癌细胞株SUNE中有0.35%的微量细胞呈CD133+表达;免疫磁珠富集的CD133+肿瘤细胞在无血清培养基中悬浮生长,并可以形成肿瘤细胞球,具有很强的自我更新和繁殖能力,且在3、5、7 d的紫外吸光度(A)值分别为0.317±0.007、0.370±0.002、0.558±0.004,均高于相同条件下未分选细胞和CD133-细胞(P<0.05);CD133+细胞在含血清培养基中的比例逐日下降,至培养的第12天,由第1天的89.67%下降至0.37%。结论CD133可作为鼻咽癌类干细胞的标志之一。鼻咽癌细胞株SUNE中存在类肿瘤干细胞,并具有自我更新和分化能力。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 鼻咽肿瘤 细胞培养技术 免疫磁珠分选 CD133
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脂肪来源间充质干细胞调控变应性鼻炎小鼠T细胞免疫状态的研究 被引量:12
3
作者 李冠雪 刘艳慧 +3 位作者 文忠 张沈华 杨柯柯 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期50-56,共7页
目的 探讨脂肪来源间充质干细胞(adipose—derivedstemceils,ADSC)对变应性鼻炎(allergicrhinitis,AR)小鼠辅助性T细胞(Th)、调节性T细胞(Treg)的调节作用及其机制。方法取Balb/c小鼠60只,采用随机数字表法随机分为6组(分... 目的 探讨脂肪来源间充质干细胞(adipose—derivedstemceils,ADSC)对变应性鼻炎(allergicrhinitis,AR)小鼠辅助性T细胞(Th)、调节性T细胞(Treg)的调节作用及其机制。方法取Balb/c小鼠60只,采用随机数字表法随机分为6组(分组表示为:致敏/激发/处理),分别为实验组1(OVA/OVA/高剂量ADSC)、实验组2(OVA/OVA/低剂量ADSC)、实验组3(0VA/OVA/磷酸盐缓冲液PBS)、实验组4(OVA/OVA/0)、对照组1(PBS/PBS/0)和对照组2(O/O/0)。常规分离提取小鼠ADSC,卵清蛋白(ovalbumin,OVA)联合氢氧化铝构建AR小鼠模型,尾静脉注射CM-Dil标记的ADSC(高剂量组:3×10^6;低剂量组:1×10^6)连续3d,48h后处死,酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)检测血清中自细胞介素(interleukin,IL)4、IL-6、IL-10和叮干扰素(Y interferon,IFN-y)的水平,反转录聚合酶链反应(reversetranscriptasepolymerasechainreaction,RT—PCR)检测脾脏中上述各细胞因子mRNA的表达,荧光显微镜下观察ADSC在AR模型鼠鼻黏膜中的迁移分布,鼻黏膜HE染色观察嗜酸粒细胞浸润情况。以SPSS13.0软件进行统计学处理。结果成功分离培养并鉴定小鼠ADSC。AR模型小鼠症状学评分与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。实验组1与实验组4相比,血清IL4、IL-6水平下调[组1:(17.95±7.78)、(27.51±5.93)pg/ml;组4:(56.82±9.12)、(70.034-7.22)pg/m1],IFN-1、IL-10水平上调[组1:(367.74±、13.79)、(417.10±72.40)p∥ml;组4:(199.464-11.25)、(122.50±15.57)pgZml],差异均有统计学意义(P值均〈0.01)。实验组1与实验组2相比,血清IL-4、IL.6水平下调[组1:(17.95±7.78)、(27.51±5.93)pg/ml;组2:(41.57±12.27)、(56.21±9.23)pg/m1],IFN-1、IL-10水平上调[组1� 展开更多
关键词 鼻炎 变应性 脂肪来源间充质干细胞 Th1/Th2细胞免疫平衡 调节性T细胞
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鼻内镜口腔途径选择性切除儿童肥大腺样体的手术技巧及疗效分析 被引量:12
4
作者 文忠 +6 位作者 谢民强 龚剑 王军旗 李冠雪 杨柯柯 张沈华 李彩凤 《中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志》 2012年第6期430-433,共4页
目的探讨鼻内镜下经口腔电动吸切选择性切除儿童肥大腺样体手术方式及疗效分析。方法对有多种典型临床症状(包括打鼾、鼻塞、流脓涕、听力下降、口颌面部及生长发育畸形等)的56例腺样体肥大患儿,全麻下开口器撑开口腔并拉起软腭,经口腔... 目的探讨鼻内镜下经口腔电动吸切选择性切除儿童肥大腺样体手术方式及疗效分析。方法对有多种典型临床症状(包括打鼾、鼻塞、流脓涕、听力下降、口颌面部及生长发育畸形等)的56例腺样体肥大患儿,全麻下开口器撑开口腔并拉起软腭,经口腔插入70°鼻内镜显露鼻咽部肥大的腺样体,采用弯头正反向切割吸引刀头,明视下选择性吸切阻挡后鼻孔区的肥大腺样体部分,其余腺体组织保留,并与传统的盲刮法(79例)及鼻内镜下全切除法(25例)进行疗效比较。结果本组全部患儿术后l~3天打鼾症状基本消失,未见术后并发症。手术创伤轻,出血少,患儿恢复快,经随访1~6个月,鼻部阻塞症状消失及明显改善49例(占87.5%),13例有耳部症状者治愈及明显好转者9例(占69.2%)。而对照组盲刮法鼻症状改善有效率(62%),术后反应较重,出血较多;全切法有效率(84%),出血较多,术后反应较重。结论采用鼻内镜经口明视下选择性吸切阻挡后鼻孔区的肥大腺样体部分,具有手术在明视下操作,术腔较宽敞、安全有效、微创、出血少及术后恢复快等优点,在众多的手术方法中是一种较为理想的选择术式。 展开更多
关键词 儿童腺样体肥大 腺样体选择性切除术 鼻内镜外科学
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人鼻咽癌CD133^+干细胞的生物学特性及意义 被引量:11
5
作者 王海丽 文忠 +2 位作者 钟品能 王军旗 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第6期1007-1010,共4页
背景:有研究表明肿瘤细胞株中存在肿瘤干细胞,是肿瘤复发、转移的根源,但人鼻咽癌细胞株CNE-2中肿瘤干细胞的表达及生物学特性至今少有报道。目的:观察人鼻咽癌CD133+干细胞生物学特性及意义。方法:采用流式细胞仪检测人鼻咽癌细胞株CN... 背景:有研究表明肿瘤细胞株中存在肿瘤干细胞,是肿瘤复发、转移的根源,但人鼻咽癌细胞株CNE-2中肿瘤干细胞的表达及生物学特性至今少有报道。目的:观察人鼻咽癌CD133+干细胞生物学特性及意义。方法:采用流式细胞仪检测人鼻咽癌细胞株CNE-2中CD133的表达情况。免疫磁珠分选技术获得人鼻咽癌CD133+干细胞,分别采用无血清培养法、CCK-8法、平板克隆形成试验及裸鼠体内成瘤实验检测CD133+干细胞的体外增殖及体内成瘤能力,并将其与CD133-及未分选鼻咽癌细胞进行比较,以了解CD133+干细胞的生物学特性。结果与结论:免疫磁珠富集的CD133+细胞在无血清培养基中呈悬浮生长,并可以形成肿瘤干细胞球。CD133+细胞与CD133-细胞比较具有较高的克隆形成能力(P<0.01);CD133+细胞在裸鼠体内的成瘤率高于CD133-细胞(P<0.05)。结果证实,鼻咽癌CD133+干细胞能在体外分离培养,形成干细胞球,增殖能力强,在裸鼠体内具有极强的成瘤能力。 展开更多
关键词 鼻咽癌 肿瘤干细胞 增殖 生物学特性 干细胞培养
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变应性鼻炎患者主要鼻部症状与体内组胺及白三烯D4含量的相关性研究 被引量:9
6
作者 张鑫雨 +3 位作者 文忠 李冠雪 王会刚 陈芳 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2016年第13期1025-1028,共4页
目的:探讨变应性鼻炎(AR)患者主要鼻部症状与血清和鼻分泌物中组胺及白三烯D4(LTD4)含量的相关性,为AR的个体化治疗开辟新领域。方法:选取2014-01-2015-06期间收治的108例AR患者,按主要鼻部症状评分(喷嚏、流涕等)分成组胺症状组(喷嚏组... 目的:探讨变应性鼻炎(AR)患者主要鼻部症状与血清和鼻分泌物中组胺及白三烯D4(LTD4)含量的相关性,为AR的个体化治疗开辟新领域。方法:选取2014-01-2015-06期间收治的108例AR患者,按主要鼻部症状评分(喷嚏、流涕等)分成组胺症状组(喷嚏组)及白三烯症状组(鼻塞组),采用ELISA法测定AR患者血清和鼻分泌物中组胺和LTD4含量,分析症状与组胺及LTD4水平的相关性。结果:AR患者喷嚏积分为5.58±2.59,与血清和鼻分泌物中的组胺含量均呈正相关(r=0.79、0.78,均P<0.05),但与LTD4无明显相关性。鼻塞积分为5.34±2.36,与血清和鼻分泌物中的LTD4含量均呈正相关(r=0.74、0.72,均P<0.05),与组胺无明显相关性。血清中组胺及LTD4含量为(8.39±4.07)ng/ml和(0.356±0.155)ng/ml,分别与鼻分泌物中二者含量[(5.06±2.47)ng/ml及(0.215±0.092)ng/ml]呈正相关(r=0.99、0.98,均P<0.01)。结论:AR患者血清和鼻分泌物中的组胺水平升高与喷嚏组症状呈现高度一致性变化,血清和鼻分泌物中LTD4的含量升高与鼻塞组症状呈现高度一致性变化。 展开更多
关键词 鼻炎 变应性 组胺 白三烯 相关性
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结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤临床特征分析 被引量:7
7
作者 陈芳 +3 位作者 王会刚 李冠雪 王晓琪 文忠 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2017年第5期327-333,共7页
目的:探讨结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤的临床诊疗特征及其影响因素,为临床个体化治疗提供依据和经验。方法:回顾性分析2009-12-2016-07期间收治的25例结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤患者的临床资料,包括临床表现、血清EBV-DNA检测、影像学检查、Ann... 目的:探讨结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤的临床诊疗特征及其影响因素,为临床个体化治疗提供依据和经验。方法:回顾性分析2009-12-2016-07期间收治的25例结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤患者的临床资料,包括临床表现、血清EBV-DNA检测、影像学检查、Ann-Arbor分期、病理、治疗方法及预后等。所有患者均由病理确诊并进行标准、规范及系统的治疗。采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验进行单因素生存分析,Cox模型进行多因素分析并对影响预后的临床因素进行危险性评估。结果:25例患者中ⅠE+ⅡE期15例(60%),1年、3年总生存率(OS)分别为100%、100%;ⅢE+ⅣE期10例(40%),1年、3年OS分别为40.0%、26.7%,两者间OS差异有统计学意义(P=0.000)。采用单独放疗3例,1年、3年OS分别为100%、100%;单独化疗6例,1年、3年OS分别为53.6%、35.7%;放疗联合化疗综合治疗模式16例,1年、3年OS分别为84.6%、84.6%。3种治疗模式之间OS差异有统计学意义(P=0.027),且单独化疗者预后最差。进一步的多因素Cox回归模型结果显示,病程、B症状、EBV-DNA拷贝数阳性、治疗模式与该患者的预后转归关系密切(P=0.006、0.003、0.010、0.040)。结论:结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤侵袭性强,总体预后较差。Ann-Arbor分期、治疗模式、病程、B组症状、EBV-DNA拷贝数阳性与结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤的预后有密切关系。对早期局限于鼻腔的患者可单独放疗,疗效较好;对侵袭范围较大或晚期患者宜首选放疗加化疗为主的联合治疗模式。 展开更多
关键词 结外NK/T细胞淋巴瘤 鼻型 肿瘤分期 治疗 预后
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晚期鼻腔鼻窦腺样囊性癌21例临床特征分析 被引量:6
8
作者 王会刚 +3 位作者 陈芳 李冠雪 王晓琪 文忠 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期847-852,共6页
目的探讨发生于鼻腔鼻窦晚期腺样囊性癌的临床特征、治疗方法、预后及影响因素。方法分析2007年2月~2016年5月入住我院的21例晚期鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者的临床资料,包括临床表现、临床分期、病理、治疗方法、局部复发、远处转移及预后... 目的探讨发生于鼻腔鼻窦晚期腺样囊性癌的临床特征、治疗方法、预后及影响因素。方法分析2007年2月~2016年5月入住我院的21例晚期鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者的临床资料,包括临床表现、临床分期、病理、治疗方法、局部复发、远处转移及预后等,并结合文献进行诊疗特征分析。采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验进行单因素生存分析,COX模型对影响预后的临床因素进行多因素分析。结果 21例患者中,实体型占比小于30%的有10例(47.6%),1、3、5年总生存率分别为100%、100%、71%,实体型占比大于等于30%的有11例(52.4%),1、3、5年总生存率分别为70%、40%、10%,两者差异有统计学意义(P=0.02),且实体型占比大于等于30%的患者预后较差。Log-rank检验及全变量模型下协变量的生存曲线表明病理分型对预后具有显著影响,T3期预后略优于T4期,源发于上颌窦略优于蝶窦,手术及放化疗综合治疗优于单纯手术及单纯放化疗。多因素Cox回归模型分析结果显示,病理分型、病程与预后关系密切(P=0.045、0.028)。结论鼻腔鼻窦腺样囊性癌发病率较低,症状表现无特异性,部分患者病程较长,多发鼻窦内,尤其是上颌窦,早期诊断较困难,等到就诊时多为晚期。晚期患者以手术结合术后放化疗的综合治疗方式为主。病理分型、病程、发病部位、分期、治疗方式、周围神经侵袭,手术切缘阳性,术后放疗剂量不足60 Gy可能是影响晚期腺样囊性癌患者预后的因素。 展开更多
关键词 鼻腔鼻窦 腺样囊性癌 晚期 综合治疗 预后
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外周血循环hTERT mRNA和CK19 mRNA的表达与鼻咽癌肿瘤微转移的相关性研究 被引量:6
9
作者 付新洒 曹彦洋 +7 位作者 李冠雪 陈芳 王晓琪 杨梦雪 蔡智谋 钟庆雯 文忠 《重庆医学》 CAS 2018年第24期3166-3169,3173,共5页
目的探讨鼻咽癌患者外周循环血人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA和细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达与肿瘤微转移的相关性。方法采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)定量检测44例鼻咽癌患者治疗前后外周循环血hTERT mRNA及CK19mRNA定量表达,并分析... 目的探讨鼻咽癌患者外周循环血人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA和细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达与肿瘤微转移的相关性。方法采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)定量检测44例鼻咽癌患者治疗前后外周循环血hTERT mRNA及CK19mRNA定量表达,并分析其与临床病理特征的关系,同时以20例健康体检者作为对照。结果对照组外周血中CK19mRNA相对表达量为0.85±0.50,鼻咽癌患者外周血中CK19mRNA水平为10.97±4.60,差异有统计学意义(t=-14.39,P<0.01);健康体检者外周血中hTERT mRNA相对表达量为1.09±0.40,鼻咽癌患者外周血中hTERT mRNA水平为10.45±3.81,差异有统计学意义(t=-16.64,P<0.01)。鼻咽癌患者外周血hTERT mRNA和CK19mRNA的表达与临床分期、T分期、N分期、M分期有相关性(P<0.05)。治疗后鼻咽癌患者hTERT mRNA的表达量由10.75±3.81降低至5.46±2.00,而CK19mRNA的表达量(5.63±1.91)较治疗前(10.97±4.60)亦明显下降(P<0.01)。结论鼻咽癌外周血hTERT mRNA和CK19mRNA的表达有可能作为预测外周血肿瘤细胞微转移和判断疗效的指标之一。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 HTERT MRNA CK19 MRNA 实时荧光定量 外周血 微转移
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hTERT启动子调控TK基因靶向性杀伤鼻咽癌移植瘤的实验研究 被引量:5
10
作者 牟少凤 文忠 +3 位作者 郭梦和 谢民强 关小芳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期155-158,共4页
目的研究人端粒酶反转录酶(hTERT)基因核心启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦(HSV-TK/GCV)系统对鼻咽癌移植瘤的体内杀伤作用。方法采用培养细胞移植法,将人鼻咽癌细胞系C666-1接种于裸鼠腋部皮下,建立裸鼠人鼻咽癌移植瘤... 目的研究人端粒酶反转录酶(hTERT)基因核心启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦(HSV-TK/GCV)系统对鼻咽癌移植瘤的体内杀伤作用。方法采用培养细胞移植法,将人鼻咽癌细胞系C666-1接种于裸鼠腋部皮下,建立裸鼠人鼻咽癌移植瘤模型。将40只裸鼠随机分为5组:hTERTp/HSV-TK/PGL3/GCV组、CMV/HSV-TK/PGL3/GCV组、HSV-TK/PGL3/GCV组、GCV组及生理盐水组,每组8只。采用脂质体介导,进行瘤内直接注射,同时经腹腔给予GCV治疗,观察各组裸鼠生存状况及肿瘤相对体积、抑瘤率,并进行荷瘤裸鼠肝肾组织的常规病理检查。结果成功构建了C666-1裸鼠皮下移植瘤动物模型,hTERTp/HSV-TK/PGL3/GCV组移植瘤被明显抑制,抑瘤率达到45.51%,与HSV-TK/PGL3/GCV组、GCV组及生理盐水组(抑瘤率分别为5.52%、14.31%、0.03%)比较有显著性差异(P<0.01),肝肾病理检查发现,该组裸鼠肝肾均无明显病理学变化。CMV/HSV-TK/PGL3/GCV组的抑瘤率亦达到51.56%,但病理检查发现裸鼠出现肝肾毒性。结论hTERT启动子调控TK基因靶向治疗系统能够在体内特异性杀伤鼻咽癌移植瘤,而无明显全身毒副作用,是一种安全、有效的肿瘤靶向基因治疗系统,将为鼻咽癌临床基因治疗开辟新领域。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 肿瘤移植 HSV-TK基因 基因疗法 端粒 末端转移酶
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NLRs模式识别受体在变应性鼻炎患者发病中的作用和意义 被引量:5
11
作者 张沈华 刘艳慧 +4 位作者 李冠雪 杨柯柯 史欣 文忠 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2015年第15期1323-1328,共6页
目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域(NLRs)样模式识别受体家族Nod1、Nod2及Nalp3在变应性鼻炎(AR)患者发病中的作用和意义。方法:分别采用Real-Time RT-PCR、免疫组织化学及Western blot检测Nod1、Nod2、Nalp3蛋白在AR患者下鼻甲组织中的... 目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域(NLRs)样模式识别受体家族Nod1、Nod2及Nalp3在变应性鼻炎(AR)患者发病中的作用和意义。方法:分别采用Real-Time RT-PCR、免疫组织化学及Western blot检测Nod1、Nod2、Nalp3蛋白在AR患者下鼻甲组织中的表达,以鼻中隔偏曲(NSD)患者下鼻甲黏膜作为对照,分别通过Western blot检测观察AR患者舌下脱敏治疗6个月后外周血单个核细胞中Nod1的改变,通过ELISA检测观察外周血IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ的变化。结果:3种Nods样受体在AR及NSD组鼻黏膜组织中均有表达,且主要表达于鼻黏膜上皮细胞、腺体上皮、炎性细胞(如浆细胞、嗜酸粒细胞)。但在AR组中Nod1mRNA及蛋白表达均低于NSD组(P<0.05),Nalp3mRNA及蛋白表达均高于NSD组(P<0.05);2组中Nod2mRNA、蛋白比较差异无统计学意义。脱敏治疗后6个月,Nod1表达改变与外周血IL-10的改变呈负相关(r=-0.88,P<0.05);Nod1表达改变与外周血IL-6的改变呈正相关(r=0.57,P>0.05)。结论:1Nod1、Nod2及Nalp3在2组组织中均有表达,但AR组Nod1表达低于NSD组,Nalp3高于NSD组,说明Nod1、Nalp3可能参与AR的发病。2舌下脱敏治疗6个月后,Nod1表达降低,其表达降低与外周血IL-10的改变呈负相关,提示Nod1可能通过调控IL-10变化参与舌下脱敏治疗机制。 展开更多
关键词 Nods样模式识别受体 鼻炎 变应性 变应原舌下特异性免疫治疗 细胞因子
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鼻咽癌患者外周血端粒酶hTERT mRNA的定量检测及其临床意义 被引量:5
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作者 付新洒 +2 位作者 李冠雪 张鑫雨 文忠 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期894-897,共4页
目的定量检测鼻咽癌患者外周血中端粒酶逆转录酶催化亚单位(h TERT)m RNA的表达,并探讨其在鼻咽癌中的诊断及治疗意义。方法采用实时荧光定量PCR技术(QPCR)检测33例鼻咽癌患者治疗(放疗或化疗)前后血浆中h TERT m RNA的表达,并分析其与... 目的定量检测鼻咽癌患者外周血中端粒酶逆转录酶催化亚单位(h TERT)m RNA的表达,并探讨其在鼻咽癌中的诊断及治疗意义。方法采用实时荧光定量PCR技术(QPCR)检测33例鼻咽癌患者治疗(放疗或化疗)前后血浆中h TERT m RNA的表达,并分析其与临床病理因素的关联,以24例健康志愿者作为对照。结果结果显示,健康志愿者血浆中h TERT m RNA相对表达量为0.95±0.37,鼻咽癌患者血浆中h TERT m RNA含量达到10.75±4.29(P<0.05)。鼻咽癌患者血浆中h TERT m RNA的表达与年龄、性别无统计学差异(P>0.05),而与临床分期、T分期及N分期有显著性差异(P<0.05)。早期患者(Ⅰ、Ⅱ期),放疗后其表达量3.43±1.42较治疗前5.60±2.33明显下降;晚期患者(Ⅲ、Ⅳ期)诱导化疗及放疗后其表达量较治疗前12.68±3.08分别降为10.68±2.48、3.13±1.69(P<0.05)。结论鼻咽癌患者血浆中h TERT m RNA的表达明显升高,放化疗能够有效抑制该基因的表达,而且该基因的含量与肿瘤的临床分期、大小及淋巴结浸润范围等临床病理因素密切相关,从而提示检测鼻咽癌患者外周血中h TERT m RNA的含量,有可能为鼻咽癌患者早期诊断及疗效判断提供重要信息。 展开更多
关键词 鼻咽癌 血浆 实时荧光定量 HTERT MRNA
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囊泡分子免疫病理学改变对鼻内镜术后鼻腔黏膜上皮预后转归的影响 被引量:5
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作者 王军旗 文忠 +5 位作者 王海丽 钟品能 杨柯柯 李冠雪 张沈华 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期394-398,共5页
目的:探讨囊泡分子免疫病理学改变对鼻内镜术后鼻腔黏膜上皮预后转归的影响。方法:依EPOS标准选取40例(80侧)慢性鼻窦炎、鼻息肉患者为研究对象,根据术后对囊泡处理方式的不同分为囊泡刮除(右侧)和不刮除(左侧);依据囊泡数量及大小分为... 目的:探讨囊泡分子免疫病理学改变对鼻内镜术后鼻腔黏膜上皮预后转归的影响。方法:依EPOS标准选取40例(80侧)慢性鼻窦炎、鼻息肉患者为研究对象,根据术后对囊泡处理方式的不同分为囊泡刮除(右侧)和不刮除(左侧);依据囊泡数量及大小分为轻度组(44侧,单侧术腔囊泡数目≤5个且囊泡直径均≤5mm)及中重度组(36侧,单侧术腔囊泡数目>5个或囊泡数目≤5个而囊泡直径>5mm)。鼻内镜下比较轻度组、中重度组术后鼻黏膜上皮化情况;用苏木精-伊红染色及透射电镜观察囊泡的病理形态学变化;免疫组织化学法比较术后不同时间各组(术后1~3周、6~8周及11~14周)和对照组(下鼻甲黏膜、鼻息肉)转化生长因子β1(TGFβ1)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。结果:病理学观察发现,囊泡上皮基膜不连续、间质水肿、炎细胞浸润、病理性腺体增多;超微结构显示,囊泡微管结构出现异常,线粒体减少;分子免疫学结果显示,在术后1~3周、6~8周及鼻息肉组织中TGFβ1的表达明显高于术后11~14周及下鼻甲黏膜组织(P<0.05);术后6~8周及鼻息肉组织囊泡中VEGF的表达明显高于术后1~3周、11~14周及下鼻甲黏膜组织(P<0.05)。中重度组囊泡刮除较不刮除鼻黏膜更快上皮化,与轻度组比较平均时间缩短1.5周(P<0.05),轻度组囊泡刮除和不刮除对术腔黏膜上皮化的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论:囊泡是鼻内镜术后有可能经历的阶段,其出现可能提示是鼻腔黏膜术后对炎症存在的反映,存在病理形态学改变及VEGF、TGFβ1的高表达,VEGF、TGFβ1术后的动态变化可以成为鼻内镜术后鼻腔黏膜预后转归的监测指标之一。术后对中重度囊泡进行清除有利于鼻腔黏膜的恢复和愈合。 展开更多
关键词 囊泡 鼻黏膜 预后 转归 内镜术 炎症因子
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人鼻咽癌CD133+干细胞对肿瘤多药耐药作用的研究 被引量:5
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作者 杨柯柯 +3 位作者 文忠 王海丽 张沈华 李冠雪 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第18期1385-1390,共6页
目的:探讨鼻咽癌CD133+干细胞中ABCG2表达情况及CD133+干细胞对肿瘤多药耐药的作用。方法:免疫磁珠分选、纯化鼻咽癌CD133+肿瘤干细胞,采用无血清培养、CCK-8法、平板克隆及裸鼠体内成瘤实验鉴定此肿瘤干细胞生物学特性;采用逆转录聚合... 目的:探讨鼻咽癌CD133+干细胞中ABCG2表达情况及CD133+干细胞对肿瘤多药耐药的作用。方法:免疫磁珠分选、纯化鼻咽癌CD133+肿瘤干细胞,采用无血清培养、CCK-8法、平板克隆及裸鼠体内成瘤实验鉴定此肿瘤干细胞生物学特性;采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组化检测分选前后的ABCG2/BCRP变化;采用CCK-8法比较分选前后鼻咽癌细胞的耐药情况。结果:成功分选并鉴定CD133+鼻咽癌干细胞;RT-PCR结果显示,耐药基因ABCG2在CD133+干细胞中表达灰度值为2.27±0.09,明显高于CD133-(0.69±0.01)和未分选细胞(1.00±0.00),F=886.99,P<0.01;CCK8结果显示,顺铂、紫杉醇和依托泊苷对CD133+鼻咽癌细胞的耐药明显增加,耐药指数分别为23.874、5.520和5.670,P均<0.01,而氯丙嗪的耐药指数为1.082,差异无统计学意义,P=0.488。结论:CD133+干细胞参与鼻咽癌多药耐药,靶向ABCG2联合氯丙嗪有可能成为克服肿瘤多药耐药新途径。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 肿瘤干细胞 CD133+ 肿瘤多药耐药 ABCG2 氯丙嗪
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广东省西樵山不同林分类型枯落物持水特性的研究 被引量:4
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作者 郑柔燕 何固 +2 位作者 林正眉 梁美凤 《广东林业科技》 2012年第1期35-40,共6页
对广东省西樵山4种不同林分类型枯落物进行的研究表明:1)4种林分类型枯落物总储量大小顺序为:生态林﹥景观林﹥珍贵阔叶林﹥常绿阔叶林;2)4种林分类型枯落物持水量、持水速率与浸水时间的动态变化规律基本相似。持水量随浸水时间增加呈... 对广东省西樵山4种不同林分类型枯落物进行的研究表明:1)4种林分类型枯落物总储量大小顺序为:生态林﹥景观林﹥珍贵阔叶林﹥常绿阔叶林;2)4种林分类型枯落物持水量、持水速率与浸水时间的动态变化规律基本相似。持水量随浸水时间增加呈上升趋势,但当浸泡8 h之后,趋势变缓;不同林分类型持水速率在0~2 h最快,在4~6 h后逐渐减缓,6 h后明显减缓;3)不同树种林下枯落物有效拦蓄率范围为160.05%~182.57%,有效拦蓄量大小顺序为:生态林﹥景观林﹥珍贵阔叶林﹥常绿阔叶林,枯落物的拦蓄量与枯落物总储量和枯落物的持水特性相关。 展开更多
关键词 西樵山 林分类型 枯落物 持水特性
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端粒酶抑制因子PinX1基因在鼻咽癌细胞中的表达及作用效应分析 被引量:4
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作者 赖肖芬 +1 位作者 文忠 钱宇虹 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2011年第3期161-166,共6页
目的探讨PinX1基因在鼻咽癌细胞中的表达及其作用效应分析。方法构建包含全长人PinX1基因序列的质粒载体pEGFP-C3-PinX1及PinX1的小干扰RNA,PinX1-FAM-siRNA。脂质体法转染人鼻咽癌5-8 F细胞,采用RT-PCR检测PinX1基因和端粒酶催化亚单位... 目的探讨PinX1基因在鼻咽癌细胞中的表达及其作用效应分析。方法构建包含全长人PinX1基因序列的质粒载体pEGFP-C3-PinX1及PinX1的小干扰RNA,PinX1-FAM-siRNA。脂质体法转染人鼻咽癌5-8 F细胞,采用RT-PCR检测PinX1基因和端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA的表达;分别采用Stretch PCR、MTT及流式细胞仪检测肿瘤细胞端粒酶活性、增殖能力及凋亡改变。结果成功构建PinX 1基因质粒载体及合成其小干扰RNA。转染鼻咽癌5-8 F细胞后,PinX1 mRNA的表达水平显著提高,hTERT mRNA的表达水平下降了2 9.9%,端粒酶活性显著降低,肿瘤细胞增殖能力受到抑制,诱导鼻咽癌细胞凋亡率从未转染的19.27%±0.76%增加至转染后的49.73%±2.70%(P<0.05);转染PinX1基因的小干扰RNA(PinX1-FAM-siRNA),结果显示PinX1 mRNA的表达水平下降70%,而鼻咽癌5-8 F细胞的增殖能力、端粒酶活性和hTERT的表达以及细胞凋亡率未受到显著影响。结论外源PinX1基因可在鼻咽癌细胞中高表达,显著抑制该肿瘤细胞中端粒酶活性及其hTERT mRNA表达,抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导肿瘤细胞凋亡增加。沉默鼻咽癌细胞中PinX1基因后,PinX1基因的抑制性功能相应地受抑制。施加正反调节因素后的结果表明PinX1基因是一个潜在的端粒酶活性抑制剂,可能通过靶向抑制端粒酶途径来影响肿瘤的发生发展,本研究将为鼻咽癌的靶向基因治疗开辟新领域。 展开更多
关键词 鼻咽癌 PinX1基因 小干扰RNA 端粒酶 凋亡
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生命学科卓越人才培养的研究与实践 被引量:4
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作者 李娘辉 黄儒强 +3 位作者 周云龙 郑思春 徐杰 《高校生物学教学研究(电子版)》 2013年第3期25-27,共3页
本文介绍了华南师范大学生命科学学院教学团队在卓越教师、卓越工程技术人才、卓越农林人才培养的模式探讨。着重从建立新型的完整的人才培养方案,建立教学团队培养和提升教师教学水平的管理机制,构建以基础性、新颖性、需要性为原则的... 本文介绍了华南师范大学生命科学学院教学团队在卓越教师、卓越工程技术人才、卓越农林人才培养的模式探讨。着重从建立新型的完整的人才培养方案,建立教学团队培养和提升教师教学水平的管理机制,构建以基础性、新颖性、需要性为原则的教学内容,创建启发式、探究式、讨论式、参与式的教学方法,创建卓越人才培养的科研创新平台,构建学生学习课程多元化的评价方式等方面进行了讨论。 展开更多
关键词 生命学科 卓越人才培养
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鼻咽癌细胞中增强型表达载体调控TK基因与端粒酶活性关系的研究 被引量:2
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作者 文忠 +2 位作者 钱宇虹 牟少凤 关小芳 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期168-173,共6页
目的:探讨人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因核心启动子和原核增强子CMV联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦系统对TK基因的活性改变及与鼻咽癌细胞中端粒酶活性的关系。方法:将改良构建后的增强型载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CM... 目的:探讨人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因核心启动子和原核增强子CMV联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦系统对TK基因的活性改变及与鼻咽癌细胞中端粒酶活性的关系。方法:将改良构建后的增强型载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer及单启动子载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp(作为对照组)分别转染端粒酶阳性的人鼻咽癌5-8F细胞株及对照组细胞人乳腺癌MCF-7细胞(端粒酶阳性)及正常人血管内皮ECV细胞(端粒酶阴性),采用荧光显微镜下观察其TK基因绿色荧光蛋白表达,实时荧光定量PCR方法检测转染细胞中TK基因mRNA定量表达差异,TRAP银染法检测肿瘤细胞转染前后端粒酶活性改变并分析TK基因表达与端粒酶活性之间的关系。结果:①增强型表达载体转染鼻咽癌5-8F细胞及乳腺癌MCF-7细胞均有很强的荧光表达及TK基因的mRNA表达,比单启动子pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp及ECV细胞绿色荧光要强。实时荧光定量PCR显示,增强型载体组A值亦较对照组明显增高。②转染增强型载体(加GCV)后TRAP银染法检测鼻咽癌5-8F细胞端粒酶活性较转染前明显降低,但转染正常对照细胞后活性无变化。③加入GCV后,pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer对鼻咽癌5-8F细胞及乳腺癌MCF-7细胞体外增殖均有明显抑制作用,高于单启动子组pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp及空载体组pGL3-basic-EG-FP3及空白对照组,而pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer转染ECV细胞无明显抑制作用。结论:hTERT启动子及CMV增强子可明显增强TK基因活性,并可导致该种肿瘤细胞端粒酶活性降低,靶向杀灭该种肿瘤细胞,但这种由TK基因介导的端粒酶活性抑制机制尚不清楚。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 增强型表达载体 TK基因 端粒酶
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增强型胸苷激酶基因表达载体的构建及其杀伤鼻咽癌细胞的实验研究 被引量:3
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作者 文忠 +2 位作者 钱宇虹 关小芳 牟少凤 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期414-419,共6页
目的 探讨改良构建人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit promoter,hTERT)启动子及巨细胞病毒原核(cytomegalovirus,CMV)增强子联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(thymidine kinase,TK)的增强型表达载体在鼻咽... 目的 探讨改良构建人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit promoter,hTERT)启动子及巨细胞病毒原核(cytomegalovirus,CMV)增强子联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(thymidine kinase,TK)的增强型表达载体在鼻咽癌细胞体内外实验中的靶向杀伤效应及体内应用的安全性评价.方法 以pGL3-basic空载体为模板,分别酶切连接hTERT启动子、CMV增强子及TK基因构建靶向性增强型表达载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTERTp-CMV(以hTERT单启动子调控TK基因表达载体作为对照组),转染端粒酶阳性的人鼻咽癌5-8F细胞及用做对照组的人乳腺癌MCF-7细胞和端粒酶阴性的正常人脐静脉内皮细胞ECV-304,分别采用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达差异、实时荧光定量PCR检测转染后TK基因mRNA表达差异、TeloChaser法检测上述细胞中的端粒酶活性、四甲基偶氮唑蓝(MTt)联合Boyden小室实验分析增强型载体对鼻咽癌细胞增殖及侵袭抑制的作用.将鼻咽癌细胞接种于裸鼠腋部皮下,构建裸鼠鼻咽癌移植瘤模型,研究增强型载体对裸鼠移植瘤的体内生长抑制作用及对全身的毒副反应情况.结果 ①成功改良构建hTERT/CMV双调控TK基因的增强型表达载体.②转染增强型载体组及单启动子载体组的鼻咽癌5-8F细胞均有绿色荧光表达,但前者荧光数量及强度均较后者强,对照组端粒酶阳性的乳腺癌细胞也有很强的荧光表达,而ECV-304细胞几乎无绿色荧光表达.实时荧光定量PCR结果显示,增强型载体组的TK基因mRNA表达量是单启动子组的2-5倍.③ TeloChaser法结果显示,两种肿瘤细胞(5-8F细胞、MCF-7细胞)端粒酶活性均为阳性,正常对照ECV-304细胞端粒酶活性为阴性.④MTT联合Boyden小室侵袭实验结果显示,增强型表达载体对5-8F细胞体外增殖及侵袭力均有明显抑制作用.相对细胞存活率为37.0%,较对照组明显低(P〈0.01).⑤体内实验结 展开更多
关键词 胸苷激酶 鼻咽肿瘤 巨细胞病毒 端粒 末端转移酶
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Nod1与Nod2模式识别受体在鼻息肉发病中的作用 被引量:3
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作者 张沈华 +3 位作者 文忠 李冠雪 杨柯柯 史欣 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2013年第3期192-195,共4页
目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域(nucleotide binding oligomerization do main,NOD)模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)Nod1、Nod2在鼻息肉发病中的作用。方法分别采用免疫组织化学及Western-blot检测Nod1、Nod2蛋白在20... 目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域(nucleotide binding oligomerization do main,NOD)模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)Nod1、Nod2在鼻息肉发病中的作用。方法分别采用免疫组织化学及Western-blot检测Nod1、Nod2蛋白在20例鼻息肉组织中的表达,同时以19例正常下鼻甲黏膜作对照;ELISA检测鼻息肉组织和下鼻甲黏膜组织中白细胞介素4(IL-4)的含量。结果 Western-blot结果提示:鼻息肉组织Nod1表达高于对照组,两组Nod2无明显差异。免疫组织化学示两种模式受体在两组中均有表达,主要表达于黏膜上皮细胞、腺体上皮、炎性细胞(如嗜酸性粒细胞)中,但Nod1在鼻息肉中表达强于对照组(P<0.05),Nod2在两组中的表达差异无统计学意义。ELISA检测示鼻息肉组织匀浆液IL-4高于正常下鼻甲黏膜组织,(P<0.05)。结论在鼻息肉组织中,Nod1表达增强,说明Nod1有可能参与鼻息肉的发病。 展开更多
关键词 Nods样模式识别受体 鼻息肉 发病机制
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