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基于多重PCR的呼吸道病毒纳米孔测序快速检测的方法学研究 被引量：1
1
作者 申业壮 刘冉 +6 位作者 尹晓尧 胡曼东 张雅薇 何昆 周涛 李卫华 解现星 《军事医学》 CAS CSCD 2023年第11期823-828,共6页
目的通过对多重PCR扩增条件的优化和纳米孔测序中病原微生物检测特异性及灵敏度的评价,建立一种由多重PCR和纳米孔测序技术相结合的检测技术体系,满足对呼吸道病毒现场快速检测鉴定的需求。方法首先针对呼吸道病毒设计特异性引物,其次优... 目的通过对多重PCR扩增条件的优化和纳米孔测序中病原微生物检测特异性及灵敏度的评价,建立一种由多重PCR和纳米孔测序技术相结合的检测技术体系,满足对呼吸道病毒现场快速检测鉴定的需求。方法首先针对呼吸道病毒设计特异性引物,其次优化PCR扩增条件,建立快速测序体系,最后对不同浓度的病原体进行扩增与测序鉴定,评价检测体系的灵敏度。结果优化后的多重PCR检测体系在退火温度为55℃、引物添加浓度为0.1µmol/L时,可同时检出25种呼吸道病毒,检测灵敏度可达1×104拷贝/ml,整体检测时间在4 h以内。结论该方法简单快捷,能够实时获取扩增片段的序列信息,特异性强,灵敏度较高,有望为呼吸道病原体的快速筛选和现场检测鉴定提供有力技术支撑。 展开更多
关键词 呼吸道病毒 多重PCR 纳米孔测序 快速检测 特异性
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多重PCR和纳米孔测序结合检测消化道病原体方法及其评价 被引量：1
2
作者 刘冉 尹晓尧 +6 位作者 申业壮 张雅薇 胡曼东 李卫华 张学敏 何昆 解现星 《军事医学》 CAS CSCD 2023年第8期590-595,共6页
目的建立多重PCR和纳米孔测序相结合的检测方法,为实现消化道病原体现场高灵敏度快速检测奠定基础。方法通过设计消化道病原体特异性引物,验证引物特异性,优化多重PCR扩增条件,构建快速建库测序体系,对病原体的检测灵敏度进行评价。结... 目的建立多重PCR和纳米孔测序相结合的检测方法,为实现消化道病原体现场高灵敏度快速检测奠定基础。方法通过设计消化道病原体特异性引物,验证引物特异性,优化多重PCR扩增条件,构建快速建库测序体系,对病原体的检测灵敏度进行评价。结果建立的12种消化道病原体多重PCR检测体系可以对所有靶序列进行有效扩增。经测序检测,当引物池中每条引物浓度为0.1μmol/L时,12种病原体混合DNA模板和3种轮状病毒A、B、C的混合RNA样品检测灵敏度均可达到103拷贝/ml。结论该方法可在短时间内完成消化道病原体的鉴定,提升突发公共卫生事件中现场病原体检测效率,有望在疫情防控中发挥重要作用。 展开更多
关键词 纳米孔测序技术 多重PCR 消化道病原体 病原体检测 灵敏度
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基于激光扫描共聚焦显微镜的蛋白质相分离研究方法
3
作者 赵明 韩秋影 +6 位作者 李卓欣 赵冰 申业壮 王凯 徐欣 於宇 夏天 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期113-121,共9页
激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)具有高分辨率、高对比度和可定量测量等优势,其在细胞及组织成像等方面的广泛应用极大地推动了生命科学领域的发展。相分离的研究极度依赖显微成像技术,本文着重总结了基于激光扫描共聚焦显微镜的相分离研究... 激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)具有高分辨率、高对比度和可定量测量等优势,其在细胞及组织成像等方面的广泛应用极大地推动了生命科学领域的发展。相分离的研究极度依赖显微成像技术,本文着重总结了基于激光扫描共聚焦显微镜的相分离研究方法,并探讨了相分离研究的难点,为相关研究人员了解蛋白质相分离及显微镜在相分离领域的应用提供了参考,也为开展相分离研究提供了技术依据。 展开更多
关键词 相分离 共聚焦显微镜 蛋白质
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机器人辅助腹腔镜前列腺切除术后耻骨上引流与尿道引流对比的meta分析
4
作者 徐博文 张桐桐 +4 位作者 薛春源 申业壮 张凯玥 曲思凤 智绪亭 《微创泌尿外科杂志》 2019年第6期390-398,共9页
目的:比较机器人辅助腹腔镜前列腺切除术(RARP)术后使用耻骨上膀胱引流(SPC)还是使用经尿道引流(UC)两种方式,旨在为临床选择提供更新的证据。方法:由两名研究人员独立检索截止至2018年12月的PubMed、Embase、Medline、Scopus、Ebscohos... 目的:比较机器人辅助腹腔镜前列腺切除术(RARP)术后使用耻骨上膀胱引流(SPC)还是使用经尿道引流(UC)两种方式,旨在为临床选择提供更新的证据。方法:由两名研究人员独立检索截止至2018年12月的PubMed、Embase、Medline、Scopus、Ebscohost、中国期刊全文数据库(CNKI)和万方数据库(WanFang Data),以确定对RARP术后使用SPC和UC进行比较的研究。对所纳入研究进行meta分析,所有分析均使用Review manager 5(Cochrane Collaboration,China)进行。结果:共纳入10个研究,3组证据等级为1b的随机对照研究,4组回顾性研究和3组前瞻性非随机对照研究,总计1209例患者(SPC组:623例,UC组:586例)。虽然SPC组与UC组在术后整体疼痛[POD1(MD=0.18,P=0.78),POD3(MD=0.29,P=0.46),POD6(7)(MD=-0.31,P=0.08)]方面差异无统计学意义。但在POD6(7)天的阴茎疼痛方面,SPC组疼痛评分低于UC组(MD=-1.05,P<0.001)。SPC组术后总体并发症发生率高于UC组(RR=2.15,P=0.02),术后6周、12周尿失禁方面两组差异无统计学意义。组间尿潴留(RR=1.16,P=0.67)及膀胱痉挛(RR=0.68,P=0.36)的发生率均差异无统计学意义。而在术后尿路感染发生率方面,UC组高于SPC组,差异有统计学意义(RR=0.44,P=0.04)。结论:与UC组相比,SPC组能够减轻置管不适,且不会增加主要并发症的发生率。因此RARP术后使用SPC应该是一种安全有效的选择。 展开更多
关键词 机器人辅助腹腔镜前列腺切除 耻骨上引流 尿道引流 系统综述 META分析
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