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肺炎球菌疫苗研究进展 被引量：9
1
作者 田生和 徐葛林 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 2005年第6期257-260,共4页
7价肺炎球菌结合疫苗(PCV)已证明对儿童肺炎球菌菌血症有预防作用,亦能降低儿童肺炎总发病率,对降低儿童耳炎总发病的作用有限,但疫苗上市后监测显示其作用被低估。目前正在研制11价或更高价PCV。获准使用的成人23价肺炎球菌多糖疫苗(P... 7价肺炎球菌结合疫苗(PCV)已证明对儿童肺炎球菌菌血症有预防作用,亦能降低儿童肺炎总发病率,对降低儿童耳炎总发病的作用有限,但疫苗上市后监测显示其作用被低估。目前正在研制11价或更高价PCV。获准使用的成人23价肺炎球菌多糖疫苗(PPV)被证明对成人肺炎球菌菌血症有预防作用,但成人无肺炎球菌菌血症性肺炎的发病率仍较高,目前试图改进成人肺炎球菌疫苗,包括肺炎球菌结合疫苗和蛋白疫苗。 展开更多
关键词 肺炎球菌 免疫机制 结合疫苗 多糖疫苗
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日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因在大肠杆菌的表达 被引量：5
2
作者 田生和 段凯 +3 位作者 赖建平 王大坤 郑宏 石磊 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第5期15-17,共3页
目的　克隆并表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因以制备血吸虫疫苗候选分子。方法　利用 Ｐ Ｃ Ｒ 技术扩增日本血吸虫大陆株的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 基因， 经 Ｂａｍ Ｈ Ｉ和 Ｅｃｏ Ｒ Ｉ双酶切后定向克隆于原核表达质粒 Ｐ Ｅ Ｇ Ｘ２ － Ｔ... 目的　克隆并表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因以制备血吸虫疫苗候选分子。方法　利用 Ｐ Ｃ Ｒ 技术扩增日本血吸虫大陆株的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 基因， 经 Ｂａｍ Ｈ Ｉ和 Ｅｃｏ Ｒ Ｉ双酶切后定向克隆于原核表达质粒 Ｐ Ｅ Ｇ Ｘ２ － Ｔ， 并在大肠杆菌进行表达研究。结果　获得目的基因克隆， 在大肠杆菌可诱导表达约４４ｋ Ｄ 的融合蛋白， 该重组抗原能被慢性血吸虫病人血清特异性识别。结论　成功地表达了一种血吸虫疫苗候选抗原， 为进一步研究打下基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 疫苗 大肠杆菌
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细胞ELISA法的建立及应用 被引量：3
3
作者 田生和 王大坤 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1992年第1期27-29,共3页
应用刀豆素蛋白A为结合剂将细胞结合于酶标板的细胞ELISA法(C-ELISA),检测几种抗细胞膜抗原单抗和筛选抗细胞膜抗原单抗,均显示具有较好的特异性和重复性。在筛选杂交瘤上清时,该法较间接免疫荧光法敏感、简便。
关键词 刀豆素蛋白A 细胞ELISA 单克隆抗体
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人TRAIL细胞外段基因在大肠杆菌中的表达及其包涵体的复性 被引量：3
4
作者 田生和 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期114-116,共3页
目的　在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段 (sTRAIL)基因 ,并研究其包涵体的复性。方法　应用RT- PCR法从正常人外周血单核细胞中获得sTRAIL的编码基因 ,将其克隆到原核表达载体pBV2 2 0 ,于大肠杆菌DH5α中通过... 目的　在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段 (sTRAIL)基因 ,并研究其包涵体的复性。方法　应用RT- PCR法从正常人外周血单核细胞中获得sTRAIL的编码基因 ,将其克隆到原核表达载体pBV2 2 0 ,于大肠杆菌DH5α中通过温控诱导表达 ;将包涵体进行变性和复性处理后 ,采用离子交换层析纯化表达产物 ,并经Dotblot及MTT试验鉴定。结果　通过温度诱导 ,目的基因主要以包涵体形式高效表达 ,包涵体蛋白经梯度透析法复性可获得具有抗肿瘤活性的重组人sTRAIL。结论　已获得大量纯化重组人sTRAIL ,为开发新型抗肿瘤制剂奠定基础。 展开更多
关键词 TRAIL 包涵体 复性 高效表达 细胞外 目的基因 大肠杆菌 诱导表达 纯化 离子交换层析
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双特异性抗体的研究进展 被引量：1
5
作者 田生和 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 1994年第1期12-15,共4页
近年来双特异性抗体(BsAb)在免疫学诊断和导向免疫治疗方面已得到广泛研究,其制备方法也在不断改进,包括化学交联法、杂交瘤融合法及基因克隆法。本文综述BsAb的制备原理、方法及研究现状,并展望其应用前景。
关键词 抗体 双特异性 研究进展
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抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段单克隆抗体的制备 被引量：1
6
作者 潘勇兵 田生和 +1 位作者 李国喜 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第12期1213-1215,共3页
目的制备抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)的单克隆抗体。方法用重组sTRAIL免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,捕获ELISA筛选阳性克隆,制备腹水抗体。间接ELISA测定单抗效价,并进行单抗亚类、特异性鉴定及杂交瘤... 目的制备抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)的单克隆抗体。方法用重组sTRAIL免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,捕获ELISA筛选阳性克隆,制备腹水抗体。间接ELISA测定单抗效价,并进行单抗亚类、特异性鉴定及杂交瘤细胞染色体和单抗识别位点分析。将杂交瘤细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后,检测细胞培养上清的效价。结果3株杂交瘤细胞分泌的单抗均为IgG1型,腹水单抗效价均高于10-6,杂交瘤细胞染色体数介于94～98条之间,均识别sTRAIL分子上线性表位。细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后的上清效价保持稳定。结论已成功制备了3株可稳定分泌抗sTRAIL单克隆抗体的杂交瘤细胞,为TRAIL的定性定量检测及组织表达分析奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 胞外区 单克隆抗体 捕获ELISA
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用自制抗HRP－抗HBc双特异性单克隆抗体检测抗HBc的初步应用
7
作者 田生和 王大坤 +2 位作者 巫山 袁雪 陈善华 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1995年第4期203-205,共3页
用杂交瘤融合法建立了抗ＨＲＰ－抗ＨＢｃ双特异性单克隆抗体（ＢｓＡｂ）杂交－杂交瘤细胞系，它分泌的腹水抗体经ＦＰＬＣ－离子交换层析梯度盐洗脱呈现三个主峰，抗体活性检测表明依次为抗ＨＲＰ、ＢｓＡｂ及抗ＨＢｃ。试用ＢｓＡｂ... 用杂交瘤融合法建立了抗ＨＲＰ－抗ＨＢｃ双特异性单克隆抗体（ＢｓＡｂ）杂交－杂交瘤细胞系，它分泌的腹水抗体经ＦＰＬＣ－离子交换层析梯度盐洗脱呈现三个主峰，抗体活性检测表明依次为抗ＨＲＰ、ＢｓＡｂ及抗ＨＢｃ。试用ＢｓＡｂ－ＨＲＰ复合物检测乙肝病例血样，与市售试剂盒初步比较，效果满意。 展开更多
关键词 亲本杂交瘤 BsAb ELISA 单克隆抗体
原文传递
免疫球蛋白单个转换区在类别转换时基因突变的研究
8
作者 田生和 木下和生 本庶佑 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期822-825,共4页
目的:观察在免疫球蛋白的类别转换(CSR)过程中单个转换区(S区)的基因重组情况。方法:通过构建包含单个S区(FS-α2)基因序列的人工载体,使目的基因位于四环素敏感的启动子下游,并转染到一株能够在体外诱导CSR反应的B淋巴细胞系,经细胞因... 目的:观察在免疫球蛋白的类别转换(CSR)过程中单个转换区(S区)的基因重组情况。方法:通过构建包含单个S区(FS-α2)基因序列的人工载体,使目的基因位于四环素敏感的启动子下游,并转染到一株能够在体外诱导CSR反应的B淋巴细胞系,经细胞因子诱导CSR后,用PCR扩增目的基因,再进行序列分析以观察此S区基因的变异及其依赖的因素。结果:在细胞因子的诱导下,单个S区基因在CSR时可以出现基因变异包括点突变、序列缺失及序列插入等变化,并且当抑制上游启动子时,S区基因变异显著下降,表明S区基因重组受控于基因转录。结论:CSR重组机制在单个S区中同样发挥作用。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 类别转换 转换区 突变
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细菌内同源重组构建人p21^(WAF1)基因重组腺病毒
9
作者 邹昌勇 杨京生 +1 位作者 全家妩 田生和 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期336-339,共4页
目的构建人p21WAF1基因重组腺病毒载体,并在293细胞中包装制备重组腺病毒。方法将人p21WAF1基因亚克隆连接到腺病毒转移质粒pshuttle-cmv,得到阳性重组转移质粒psh-p21。先将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化BJ5183菌,筛选得到AdBJ5183菌,再... 目的构建人p21WAF1基因重组腺病毒载体,并在293细胞中包装制备重组腺病毒。方法将人p21WAF1基因亚克隆连接到腺病毒转移质粒pshuttle-cmv,得到阳性重组转移质粒psh-p21。先将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化BJ5183菌,筛选得到AdBJ5183菌,再将PmeⅠ线性化的psh-p21转化AdBJ5183菌,经细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒pAdp21。经PacⅠ和BstXⅠ酶切及PCR鉴定,将正确的重组腺病毒质粒pAdp21转染293细胞包装病毒,用RT-PCR和PCR鉴定重组腺病毒及其稳定性。结果所构建的重组腺病毒质粒pAdp21,经PCR鉴定,可扩增出约500bp的片段,与预期大小相符。转染293细胞可包装成p21WAF1基因重组腺病毒,经电镜观察,具有典型的腺病毒特征。结论已成功地构建了重组腺病毒质粒pAdp21,并制备出重组腺病毒rAdp21。 展开更多
关键词 腺病毒 同源重组 P21^WAF1基因
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