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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及其分子流行病学分析 被引量：387
1
作者 童光志 周艳君 +4 位作者 郝晓芳 田志军 仇华吉 彭金美 安同庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期323-327,共5页
为了弄清2006年在我国南方一些猪场暴发的一种以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病的病因,我们从12个省市48个发病猪场采集临床样品进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的... 为了弄清2006年在我国南方一些猪场暴发的一种以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病的病因,我们从12个省市48个发病猪场采集临床样品进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的分离鉴定和分子流行病学分析。结果显示从48个猪场样品中均检测出了PRRSV,通过完整的ORF5和部分Nsp2基因序列比较分析发现来自12个省市不同猪场的PRRSV高度同源,而且在Nsp2基因上都有两个相同位点的缺失;从分离的15株PRRSV中选择湖南分离株HuN4人工感染5头60日龄的健康猪,结果5头猪分别在7 d～21 d内全部死亡,感染猪的临床症状和现地所见十分相似。本次试验结果表明新出现的以Nsp2基因部分缺失为特征的PRRSV对猪是高致病性的,可能是2006年大部分猪场暴发"高热综合症"的主要病因。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 高热综合症 分子流行病学
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猪伪狂犬病病毒新流行株的分离鉴定及抗原差异性分析 被引量：193
2
作者 彭金美 安同庆 +7 位作者 赵鸿远 刘益民 陈家锃 冷超粮 孙艳 常丹 田志军 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-4,共4页
2011年以来我国多个省份的规模化猪场发生了新生仔猪出现神经症状和死亡的现象,为确定其是否为猪伪狂犬病病毒(PRV)感染所引发,我们利用PCR方法从死亡的新生仔猪脑组织中扩增PRV的gE基因,发现被检猪场均存在PRV野毒感染。gE基因序列分... 2011年以来我国多个省份的规模化猪场发生了新生仔猪出现神经症状和死亡的现象,为确定其是否为猪伪狂犬病病毒(PRV)感染所引发,我们利用PCR方法从死亡的新生仔猪脑组织中扩增PRV的gE基因,发现被检猪场均存在PRV野毒感染。gE基因序列分析表明,从5个省14个猪场的病料中扩增的gE基因高度同源,与以往发表的相关序列比对显示,这些分离株均属于一个相对独立的分支。病料接种Vero细胞能够产生典型的细胞病变,将命名为PRV HeN1分离株接种小鼠能够引起瘙痒、死亡等伪狂犬病症状,并且对小鼠的LD50(102.37TCID50)显著低于经典强毒PRV双城株(103.83TCID50)。此外,中和试验结果显示,PRV Bartha k61活疫苗免疫猪仅能诱导对HeN1分离株低水平的中和抗体,而HeN1分离株能够诱导较高水平的中和抗体,并具有更强的交叉中和能力。根据本实验结果推测,近期各猪场流行的PRV可能存在一定的抗原变异。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 鉴定 抗原差异
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR鉴别诊断方法的建立 被引量：62
3
作者 郝晓芳 周艳君 +5 位作者 田志军 韦天超 安同庆 彭金美 华荣虹 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期704-709,共6页
2006年5月以来,我国部分猪场暴发了一种以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染性疾病,经病原分离及分子流行病学分析证明是由一种带有nsp2部分缺失的、对猪呈高致病性的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory ... 2006年5月以来,我国部分猪场暴发了一种以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染性疾病,经病原分离及分子流行病学分析证明是由一种带有nsp2部分缺失的、对猪呈高致病性的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的。本实验参考GenBank发表的以及本实验室分离鉴定的PRRSV的nsp2基因序列,在nsp2缺失区的两端的保守区设计并合成了一对引物,建立了一种PRRSV的RT-PCR检测方法。该方法扩增高致病性PRRSV基因组时可获得230bp的片段,扩增经典型PRRSV时则获得320bp的片段,根据RT-PCR产物大小可将二者区分开来。通过大量临床病料的检测,并配合PCR产物测序验证,结果表明该方法简便、快速、特异,可以鉴别高致病性PRRSV,为进一步的PRRS流行病学研究提供了重要的技术手段。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 基因缺失 RT-PCR 鉴别诊断
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2014年~2019年PRRSV主要流行毒株在我国的变化 被引量：42
4
作者 张洪亮 张文立 +14 位作者 许浒 宋帅杰 赵静 相丽润 冷超粮 李真 刘春晓 汤艳东 陈家锃 彭金美 王倩 安同庆 童光志 蔡雪辉 田志军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期512-516,共5页
为了研究2014年至2019年PRRSV在我国的流行变化情况,本研究分别检测了2014年6月~2019年8月全国17个省、市和自治区及某大型养猪集团2007份和338份疑似PRRSV感染的病料。结果显示,共检出PRRSV阳性病料650份,测定了486株ORF5基因、441株n... 为了研究2014年至2019年PRRSV在我国的流行变化情况,本研究分别检测了2014年6月~2019年8月全国17个省、市和自治区及某大型养猪集团2007份和338份疑似PRRSV感染的病料。结果显示,共检出PRRSV阳性病料650份,测定了486株ORF5基因、441株nsp2基因和122株全基因组序列。遗传演化分析显示,2014年~2019年共检测到6种基因亚型的PRRSV,分别是I型PRRSV、HP-PRRSV、NADC30-like PRRSV、NADC34-like PRRSV、QYYZ-like PRRSV和RespPRRS MLV-like PRRSV。经统计分析显示,2016年以前除检测到1株NADC30-like PRRSV外,其余全部是HP-PRRSV;2016年后HP-PRRSV检出比率逐渐降低,NADC30-like PRRSV检出比率逐渐升高,且2016年后已超过HP-PRRSV,成为我国主要的流行株。QYYZ-like PRRSV的检出数量增多,其广泛流行于我国的华南地区。其它类型的PRRSV检出比率较低,呈现散发或局部流行。此外,近年来,PRRSV的细胞嗜性已经发生明显变化,绝大多数的病毒株无法在体外分离培养。因此,我国养殖企业针对PRRSV流行株的变化应及时调整防控策略,同时加大对PRRSV生物学特性变化机制的研究。本研究对了解我国PRRSV的流行状况及防控具有重要的指导意义。 展开更多
关键词 PRRSV NADC30-like PRRSV 主要流行毒株 细胞嗜性
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呼吸科医院感染的控制和预防 被引量：41
5
作者 刘东 田志军 《实用护理杂志》 北大核心 2002年第1期62-63,共2页
关键词 医院感染 控制 预防 呼吸科 调查分析
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猪繁殖与呼吸综合征病毒Taq Man-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用 被引量：29
6
作者 韦天超 田志军 +8 位作者 安同庆 周艳君 肖燕 姜一峰 郝晓芳 张善瑞 彭金美 仇华吉 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期944-948,991,共6页
本研究设计针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因的特异性引物和Taq Man荧光探针,建立了一种检测PRRSV的快速、敏感、特异和重复性好的Taq Man荧光定量RT-PCR方法。该方法在检测101拷贝/μL～107拷贝/μL模板范围内具有良好的线... 本研究设计针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因的特异性引物和Taq Man荧光探针,建立了一种检测PRRSV的快速、敏感、特异和重复性好的Taq Man荧光定量RT-PCR方法。该方法在检测101拷贝/μL～107拷贝/μL模板范围内具有良好的线性关系,比常规RT-PCR更敏感,可分别检测? 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 荧光定量RT-PCR 病毒含量
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第三方物流企业服务创新:物流金融 被引量：27
7
作者 孟超 田志军 《理论界》 2006年第9期52-53,共2页
从国际范围来讲,像UPS等都已经开展了物流金融业务,甚至还收购了银行来拓展金融业务,因此对于国内企业来讲,进行物流金融方面的探索很有必要。甚至从某种意义上说,未来的物流企业谁能掌握金融服务,谁就能成为最终的胜利者。
关键词 物流金融 资金流 物流
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2016年我国部分地区类NADC30新亚群猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异分析 被引量：32
8
作者 张洪亮 张晶 +12 位作者 李真 张文立 刘春晓 陈家锃 相丽润 冷超粮 彭金美 王倩 白云 安同庆 童光志 蔡雪辉 田志军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期675-680,共6页
为了解类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）在我国新的流行特点，本研究根据GenBank中美国2012年提交的PRRSV NADC30株全基因组序列设计合成8对引物，通过RT-PCR的方法对本实验室2016年从4个省搜集的临床样品中检测到的15株类NADC3... 为了解类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）在我国新的流行特点，本研究根据GenBank中美国2012年提交的PRRSV NADC30株全基因组序列设计合成8对引物，通过RT-PCR的方法对本实验室2016年从4个省搜集的临床样品中检测到的15株类NADC30 PRRSVs株进行了全基因组测序，并且结合参考株进行了序列分析。NSP2推导氨基酸的序列比对表明，15株PRRSVs均具有aa323～aa433＋aa484＋aa505～aa523 （111＋1＋19） 131个氨基酸缺失的分子特征；经RDP4和Simplot生物学软件分析表明，15株PRRSVs中14株为重组病毒株，参与重组的亲本病毒株为PRRSV NADC30株，提供重组基因片段的病毒株为HP-PRRSV或以VR2332为代表的经典PRRSV株，这些类NADC30重组病毒株的重组位置、重组的基因片段及重组片段长度均具有多样性，而且重组的位置多位于编码非结构蛋白或次要结构蛋白的基因区域；全基因组遗传演化分析表明，这些病毒株远离国内之前流行的HP-PRRSV，同源性仅为83.4 %～87.2 %，而与其它的类NADC30病毒株位于一个相对独立的分支，以上结果均表明这类病毒株已形成了一个新的亚群，命名为5亚群。本研究中不同地区PRRSV的核苷酸同源性差异较大，仅为88.6 %～99.6 %，并且只有2个病毒株可以感染PAM和MARC-145细胞。本研究表明，以基因缺失和基因重组多样性为主要特征的5亚群PRRSV已在我国流行，其生物学特性有待进一步研究。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 类NADC30 缺失 重组 5亚群
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可乐宁快速无成瘾性戒毒治疗的效能评估研究 被引量：28
9
作者 姜佐宁 郭松 +4 位作者 郑福山 王建 吴艳梅 田志军 尹健 《中国药物依赖性通报》 CSCD 1993年第1期6-18,共13页
通过对可乐宁与美沙酮不同戒毒效能的比较及可乐宁对于不同等级戒断症状戒毒效能的研究,可以看出可乐宁对于海洛因成瘾者的戒毒治疗是一种有效的方法。它对于各级别戒断症状都有明显的作用。由于可乐宁本身不具成瘾性,所以它是一种值得... 通过对可乐宁与美沙酮不同戒毒效能的比较及可乐宁对于不同等级戒断症状戒毒效能的研究,可以看出可乐宁对于海洛因成瘾者的戒毒治疗是一种有效的方法。它对于各级别戒断症状都有明显的作用。由于可乐宁本身不具成瘾性,所以它是一种值得推广的戒毒治疗药物。其应用剂量以1 mg·d^(-1)左右为宜,个别戒断症状较严重的病例可将剂量提高到1.5 mg·d^(-1),或于戒毒治疗第1,2 d分别给于阿片片剂100 mg和50 mg,以提高戒断症状缓解速度。当可乐宁服用较大剂量时应加强护理,随时观察血压和脉搏的变化。避免突然直立而引起的直立性虚脱。在用药的前3 d,嗜睡、头晕、乏力等症状比较突出,但随剂量逐渐减少,这些症状也随之缓解。可乐宁戒毒治疗的突出不良反应是低血压,虽加用较小剂量三环类抗抑郁药和中药生脉饮,但尚未能得到满意效果,对此在今后的工作中需进一步进行研究并加以解决,以提高戒毒者耐受能力,使可乐宁戒毒治疗方法更加完善。 展开更多
关键词 戒毒治疗 可乐宁 成瘾性 评估研究 效能 三环类抗抑郁药 戒断症状 海洛因成瘾者 治疗药物 应用剂量 症状缓解 加强护理 较大剂量 症状比较 不良反应 耐受能力 治疗方法 美沙酮 直立性 低血压 生脉饮 小剂量 戒毒者
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电气化铁路接触网防风技术研究 被引量：25
10
作者 田志军 《建设机械技术与管理》 2007年第7期100-103,共4页
　　大风自然气候在我国内陆新疆、甘肃、内蒙古等省区均有分布,沿海地区则是台风多发区.地处新疆的兰新线、南疆线电气化改造及东南沿海铁路(如温福、福厦、厦深客运专线),大风对列车运行安全及铁路设施的影响突显,接触网作为铁路沿线... 　　大风自然气候在我国内陆新疆、甘肃、内蒙古等省区均有分布,沿海地区则是台风多发区.地处新疆的兰新线、南疆线电气化改造及东南沿海铁路(如温福、福厦、厦深客运专线),大风对列车运行安全及铁路设施的影响突显,接触网作为铁路沿线露天设置、无备用的牵引供电设施,其防风安全问题亦开始得到重视.…… 展开更多
关键词 电气化铁路接触网 接触线 承力索 受电弓 牵引电器 挡风墙 风速 定位器
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不同兵种训练伤流行病学调查 被引量：25
11
作者 田志军 贺卫萍 黄伟峰 《西北国防医学杂志》 CAS 2011年第3期199-201,共3页
目的:了解步兵、炮兵和特训兵三兵种平时训练伤流行病学特征,为防治伤病提供科学依据。方法:参照《中国人民解放军军事训练伤诊断分类标准》,对1 613例训练伤从兵种、年龄、损伤时间、损伤部位及性质进行比较分析。结果:①步兵年均训练... 目的:了解步兵、炮兵和特训兵三兵种平时训练伤流行病学特征,为防治伤病提供科学依据。方法:参照《中国人民解放军军事训练伤诊断分类标准》,对1 613例训练伤从兵种、年龄、损伤时间、损伤部位及性质进行比较分析。结果:①步兵年均训练伤发生率为4.9%,炮兵2.5%,特训兵5.2%,步兵、特训兵与炮兵比较,差异显著(P<0.05);②全年训练伤发病率以7月份最高;③发生于18～22岁组的训练伤为59.5%,高于其他年龄组;④急性创伤性损伤以骨折多见,慢性疲劳性损伤以腰部劳损多见,训练伤发生率步兵、特训兵以下肢损伤最高,炮兵以腰部损伤最高。结论:步兵和特训兵比炮兵更易发生训练损伤,三兵种的慢性疲劳性损伤发生率均高于急性损伤。 展开更多
关键词 训练伤 流行病学 调查
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食管癌术后急性呼吸衰竭的治疗 被引量：23
12
作者 张志庸 戈烽 +3 位作者 李单青 李泽坚 朱忠信 田志军 《中华胸心血管外科杂志》 CSCD 北大核心 1995年第5期277-278,共2页
分析10例食管癌术后急性呼吸衰竭的发病特点和治疗。强调高龄、长期吸咽、慢性肺部疾患以及术后有胸内并发症者容易发生。多出现于术后48～72h内。除辅助通气外,彻底清除呼吸道内分泌物,控制肺内感染,早期发现并处理胸内其它病变是抢救... 分析10例食管癌术后急性呼吸衰竭的发病特点和治疗。强调高龄、长期吸咽、慢性肺部疾患以及术后有胸内并发症者容易发生。多出现于术后48～72h内。除辅助通气外,彻底清除呼吸道内分泌物,控制肺内感染,早期发现并处理胸内其它病变是抢救成功的关键。术前肺功能检查需结合临床综合分析。对食管癌术后急性呼吸衰竭,预防比治疗更重要。 展开更多
关键词 呼吸衰竭 辅助通气 食管肿瘤 外科手术
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表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性评价 被引量：14
13
作者 王云峰 智海东 +5 位作者 王玫 仇华吉 周艳君 田志军 张绍杰 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期426-429,共4页
为了检测表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因重组鸡痘病毒 (rFPV -ILTVgB)的稳定性 ,我们对重组病毒进行 6代和 16代克隆纯化 ,对纯化后的病毒通过转瓶连续培养传 2 0代。结果发现第 6代纯化病毒 (rFPV -ILTVgB -C6)在传代过程中有... 为了检测表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因重组鸡痘病毒 (rFPV -ILTVgB)的稳定性 ,我们对重组病毒进行 6代和 16代克隆纯化 ,对纯化后的病毒通过转瓶连续培养传 2 0代。结果发现第 6代纯化病毒 (rFPV -ILTVgB -C6)在传代过程中有白斑出现 ,说明病毒纯度不够 ;经过 16代纯化的病毒 (rFPV -ILTVgB -C16)对细胞的嗜性加强 ,病毒的效价进一步升高 ,2 0代传代后蓝斑率仍然为 10 0 % ,PCR的检测进一步证明插入的外源基因能在病毒的长期传代过程中稳定地遗传。抽取病毒细胞传代过程中的第 5 ,10 ,15 ,2 0代次的病毒翅膀内侧无血管处皮下接种 2周龄SPF鸡 ,2 0天后分为两组 ,分别用传染性喉气管炎病毒WG株和鸡痘病毒 10 2株攻击 ,结果不同代次的重组病毒均可以使免疫鸡抵抗传染性喉气管炎病毒和鸡痘病毒强毒的攻击。鸡体内病毒传代试验表明 ,重组病毒在接种部位仅存在 6天 ,之后就检测不到病毒 ,重组病毒通过SPF鸡连续传代 ,不存在病毒返祖的可能。由此可以得出一个结论 ,rFPV -ILTVgB在结构上和免疫原性上是稳定的 ,无论是在体外传代 ,还是在体内均可以稳定遗传 ,不存在因为接种重组疫苗而给免疫鸡群带来安全威胁的可能 ,完全可以作为疫苗毒株进行商品化开发。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 鸡痘 重组鸡痘病毒疫苗 遗传稳定性
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一株内源性猪细小病毒的分离与鉴定 被引量：12
14
作者 李昌文 仇华吉 +5 位作者 童光志 田志军 王玉春 韩孝成 刘红全 董齐 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期90-93,共4页
本研究从不明病毒污染的ＰＫ１５细胞培养物中分离到了一株猪细小病毒，从形态学、血清学、分子生物学几个方面对其进行了鉴定，同时克隆了该毒株ＶＰ２基因，并测定了其核苷酸序列。将该毒株命名为ＳＹ－９９株。
关键词 猪细小病毒 内源性病毒 PK15细胞系 VP2基因
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承力索张力对弓网受流质量影响研究 被引量：11
15
作者 汪吉健 田志军 +1 位作者 李会杰 梅桂明 《铁道学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期114-118,共5页
首先建立了弓网动力学模型。在其余参数均不变的基础上,研究了承力索张力对弓网受流质量的影响,并对各个工况进行了仿真。仿真结果表明,增大承力索张力可以减小弹性不均匀系数,增大反射系数,且接触压力与振幅呈不规则变化趋势。最后提... 首先建立了弓网动力学模型。在其余参数均不变的基础上,研究了承力索张力对弓网受流质量的影响,并对各个工况进行了仿真。仿真结果表明,增大承力索张力可以减小弹性不均匀系数,增大反射系数,且接触压力与振幅呈不规则变化趋势。最后提出了几个相应的建议。 展开更多
关键词 接触网 承力索 张力 弹性不均匀系数 反射系数 接触压力 抬升量
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株主要囊膜糖蛋白GP5的遗传变异分析 被引量：14
16
作者 安同庆 田志军 +6 位作者 肖燕 姜一峰 韦天超 彭金美 周艳君 仇华吉 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期851-856,共6页
为了探究高致病性猪蓝耳病病毒(HP-PRRSV)的遗传变异特征,本研究对GenBank中235株HP-PRRSV GP5序列的遗传进化、主要氨基酸基序、抗原性以及N-糖基化位点数量和位置的变异进行了分析。结果表明HP-PRRSV之间的同源性较高,与其他参考毒株... 为了探究高致病性猪蓝耳病病毒(HP-PRRSV)的遗传变异特征,本研究对GenBank中235株HP-PRRSV GP5序列的遗传进化、主要氨基酸基序、抗原性以及N-糖基化位点数量和位置的变异进行了分析。结果表明HP-PRRSV之间的同源性较高,与其他参考毒株相比,这些病毒处于一个相对独立的分支中,而且与经典疫苗株的亲缘关系较远。这有助于解释经典疫苗株对于HP-PRRSV为何起不到理想的免疫保护效果。在病毒的中和表位序列中存在着规律的点突变,同时抗原性比较显示HP-PRRSV与经典毒株之间存在着一定的差异。绝大多数的HP-PRRSV的N-糖基化位点在数量上多一个,而且位置要向羧基端平移2个氨基酸,从而使得中和表位两侧直接与糖链相连,可能会造成中和表位被糖侧链所遮掩,本研究由此推测减弱中和抗体对HP-PRRSV的有效识别,促进病毒逃避机体体液免疫。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征 GP5 序列分析 遗传变异 糖基化
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PRRSV变异株活疫苗和灭活疫苗免疫特性的研究 被引量：17
17
作者 李丽琴 蔡雪辉 +8 位作者 刘永刚 王淑杰 石文达 徐敏 荣福龙 武佳斌 徐明明 田志军 胡守萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期468-472,共5页
为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株疫苗的免疫机理和明确PRRSV变异株活疫苗和灭活疫苗各自的免疫特性,本实验分别采用PRRSV变异株(HuN4)活疫苗和PRRSV变异株(JXA1)灭活苗免疫PRRSV抗原和抗体阴性的健康断奶仔猪,免疫后21... 为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株疫苗的免疫机理和明确PRRSV变异株活疫苗和灭活疫苗各自的免疫特性,本实验分别采用PRRSV变异株(HuN4)活疫苗和PRRSV变异株(JXA1)灭活苗免疫PRRSV抗原和抗体阴性的健康断奶仔猪,免疫后21d用PRRSV变异株HuN4强毒攻毒,ELISA方法检测血清中PRRSV特异的抗体水平及TNF-α、IFN-α、IL-1、IL-6和CRP细胞因子水平,荧光定量RT-PCR方法检测病毒血症的发生和持续情况,并取主要器官进行病理组织学观察。结果表明:HuN4活疫苗组免疫后14d便可检测到PRRSV特异性抗体,攻毒后5d各细胞因子水平升高,攻毒后21d病毒血症完全消失,免疫后各器官没有明显病理变化,攻毒后临床症状和各组织器官病理变化轻微;JXA1株灭活苗组免疫期间没有检测到PRRSV特异性抗体,攻毒后5d～9d各细胞因子水平升高,攻毒后病毒血症持续存在,免疫后各器官有轻微病理变化,攻毒后临床症状和各组织器官病理变化比HuN4活疫苗组严重,但比对照组明显减轻。本实验表明,HuN4活疫苗能够快速有效的激发机体的体液免疫反应,在抵抗PRRSV变异株HuN4强毒攻毒时,临床症状明显优于JXA1灭活苗。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 PRRSV变异株(HuN4)活疫苗 PRRSV变异株(JXA1)灭活苗
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表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒疫苗的安全性试验与最小免疫剂量测定 被引量：12
18
作者 王云峰 智海东 +5 位作者 王玫 仇华吉 周艳君 田志军 张绍杰 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期441-444,共4页
将表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因的重组鸡痘病毒 (rFPV_ILTVgB)通过鸡胚成纤维细胞培养 ,加入适当的保护剂制成冻干疫苗。取 3批冻干疫苗 ,生理盐水稀释后分别经翅内侧无血管处皮下接种 14日龄和 5 0日龄SPF鸡 ,接种剂量为 5... 将表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因的重组鸡痘病毒 (rFPV_ILTVgB)通过鸡胚成纤维细胞培养 ,加入适当的保护剂制成冻干疫苗。取 3批冻干疫苗 ,生理盐水稀释后分别经翅内侧无血管处皮下接种 14日龄和 5 0日龄SPF鸡 ,接种剂量为 5× 10 6 PFU ,接种后 3天出现局部反应 ,5天局部肿胀达到最大 ,接种鸡无其它全身反应 ,精神、食欲以及发育等均不受影响 ,说明重组病毒对试验鸡是安全的。取其中的 2 0 0 0 0 3批疫苗 ,用生理盐水作 2 10 -2 ～ 2 10 -5稀释后 ,翅内侧无血管处皮下接种 4 0日龄SPF鸡 ,免疫后 4周分别攻击传染性喉气管炎病毒WG株和鸡痘病毒 10 2株 ,结果表明 ,重组病毒对试验鸡翅内侧皮下接种能产生良好的免疫力 ,在接种剂量为 2 10 -2 ～ 2 10 -40 .1ml/鸡的范围内可以使全部试验鸡产生局部反应 ,当接种剂量为 2 10 -50 .2ml/鸡时可以使部分试验鸡 ( 5 /15 )产生局部反应 ,鸡体对重组疫苗的最小反应剂量为 2 10 -40 .1ml(相当于 10 0 0PFU)。攻毒试验结果进一步证明 ,当接种剂量为 2 10 -40 .1ml(相当于 10 0 0PFU)时可以使免疫鸡产生可靠免疫力 ,抵抗传染性喉气管炎病毒WG株强毒和鸡痘病毒 10 2株的攻击 ,降低鸡群的发病率和病死率。这些结果说明 。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎 鸡痘 重组鸡痘病毒疫苗 最小免疫剂量 安全性试验
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猪IFN-γ mRNA TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：12
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作者 韦天超 田志军 +5 位作者 周艳君 安同庆 肖燕 彭金美 姜一峰 童光志 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期168-172,共5页
为建立一种检测猪γ-干扰素（IFN-γ）的荧光定量RT—PCR方法，针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilin A（CyPA）的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针，以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18T-CyPA为标准品，进行实时荧光定... 为建立一种检测猪γ-干扰素（IFN-γ）的荧光定量RT—PCR方法，针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilin A（CyPA）的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针，以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18T-CyPA为标准品，进行实时荧光定量RT-PCR检测，并构建猪IFN-γ mRNA和CyPA的荧光定量RT—PCR标准曲线。结果表明，建立的方法在1×10^1～1×10^7copies／μL模板范围内具有良好的线性关系，相关系数产均高达0．999，扩增效率均高于99．0％；可检测至少为100 copies的阳性标准品。该方法具有快速、敏感性高、特异性强和重复性好等特点，可应用于临床样品的检测。 展开更多
关键词 猪 IFN-Γ 荧光定量RT-PCR TaqMan荧光探针
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带BAC质粒的重组伪狂犬病毒的构建及其体外生长特性研究 被引量：15
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作者 彭金美 王瑜 +4 位作者 田志军 周艳君 陈瑾 安同庆 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期10-15,共6页
本研究通过基因克隆技术以伪狂犬病病毒(PRV)弱毒疫苗株Bartha K61株的部分TK基因作为同源重组序列,以绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为筛选标记,构建了带LoxP位点的pUCTKAB-EGFP质粒,将pBeloBACII线性化后插入到pUCTKAB-EGFP中构建了转移载... 本研究通过基因克隆技术以伪狂犬病病毒(PRV)弱毒疫苗株Bartha K61株的部分TK基因作为同源重组序列,以绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为筛选标记,构建了带LoxP位点的pUCTKAB-EGFP质粒,将pBeloBACII线性化后插入到pUCTKAB-EGFP中构建了转移载体pUCTK-EGFP-BACII。将PRV基因组和转移载体共转染Vero细胞,利用同源重组在Bartha K61株的TK基因中插入了BAC质粒和绿色荧光蛋白筛选标记,经过11轮噬斑纯化和鉴定证实获得了带BAC质粒的重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC。通过噬斑试验和一步生长曲线测定等方法对重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC的生长特性进行研究,结果发现带有BAC质粒及筛选标记的重组病毒rv-PRVBAC在体外细胞培养中的增殖速度与亲本毒Bartha K61株相比没有明显差别,说明大的基因片段的插入没有影响重组病毒在体外的繁殖速度。重组病毒rv-PRVBAC在Vero细胞上盲传18代,其绿色荧光蛋白仍能够稳定表达,通过PCR鉴定可以检测到插入的外源片段和插入位点两侧的病毒基因序列,表明所获得的重组病毒rv-PRVBAC得到了稳定遗传。本研究成功获得了带BAC质粒的重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC,为进一步开展PRV的细菌人工染色体的构建奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 Bartha K61株 BAC 重组病毒
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