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靶向作用的一氧化氮供体及其相关药物 被引量：12
1
作者 张奕华 田季德 彭司勋 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期481-486,共6页
关键词 靶向作用 一氧化氮 一氧化氮供体 药物
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硝酸酯/齐墩果酸杂合物的合成及HepG2细胞凋亡抑制活性的研究 被引量：10
2
作者 陈莉 尚娟 +2 位作者 王志凤 张奕华 田季德 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1516-1522,共7页
为寻找疗效更好的抗肝炎药物,本文以齐墩果酸(OA)为先导化合物,设计、合成了系列硝酸酯类NO供体/OA杂合物(10a、10b、11a～11e和12a～12c),其结构经红外、质谱、核磁共振氢谱及元素分析确证。采用LDH法测定了目标化合物体外抗Fas介导的H... 为寻找疗效更好的抗肝炎药物,本文以齐墩果酸(OA)为先导化合物,设计、合成了系列硝酸酯类NO供体/OA杂合物(10a、10b、11a～11e和12a～12c),其结构经红外、质谱、核磁共振氢谱及元素分析确证。采用LDH法测定了目标化合物体外抗Fas介导的HepG2细胞凋亡活性,其中化合物12a的活性最强,其HepG2细胞凋亡抑制作用及NO释放量均与阳性对照NCX-1000相当。 展开更多
关键词 齐墩果酸 硝酸酯 一氧化氮 抗Fas介导的HepG2细胞凋亡
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重组小鼠白细胞介素4在大肠杆菌中的高效表达 被引量：1
3
作者 王锦娟 田季德 +2 位作者 李晨 姚智 陈慰峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期9-13,共5页
应用多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及 DNA 重组技术,我们成功地构建了重组小鼠 IL-4表达克隆,命名为 pBV-mIL4.该质粒含有 P_RP_L 串联启动子,合成 SD 序列和温度敏感的CIts857基因,并且去除了完整小鼠 IL—4 cDNA 中3... 应用多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及 DNA 重组技术,我们成功地构建了重组小鼠 IL-4表达克隆,命名为 pBV-mIL4.该质粒含有 P_RP_L 串联启动子,合成 SD 序列和温度敏感的CIts857基因,并且去除了完整小鼠 IL—4 cDNA 中3′侧翼非编码区,以原核系统高频使用的强终止密码子TAA 代替了原小鼠 IL-4基因的终止密码子 TAG,经 SDS-PAGE 及凝胶密度扫描分析,表达的重组小鼠 IL-4分子量约为14.2KDa,占总菌体蛋白量的25～30%.用 HT-2细胞株的~3H-TdR 掺入法测定表明:表达的重组小鼠 IL-4具有 TCGF 样活性,约每升细菌培养物可获1x10^7单位重组小鼠 IL-4,且这种 TCGF 样活性可被抗小鼠 IL-4单克隆抗体特异性中和.在大肠杆菌中表达具有生物活性的重组小鼠 IL-4,为其实验室研究及应用以及批量生产提供了可能. 展开更多
关键词 PCR 大肠杆菌 白细胞介素4
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pL启动子控制的人白细胞介素4表达 被引量：1
4
作者 田季德 夏晓明 +1 位作者 郭淑君 陈慰峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期135-138,共4页
利用高效表达载体及人工合成的寡核苷酸接头,构建了一个新的人rIL-4表达克隆pBMhIL4,在pL启动子的控制下,于大肠杆菌中表达完整的人rIL-4蛋白分子。表达产物以包涵体形式存在于大肠杆菌胞浆,SDS-PAGE分析表明表达的人rIL-4约占总菌体蛋... 利用高效表达载体及人工合成的寡核苷酸接头,构建了一个新的人rIL-4表达克隆pBMhIL4,在pL启动子的控制下,于大肠杆菌中表达完整的人rIL-4蛋白分子。表达产物以包涵体形式存在于大肠杆菌胞浆,SDS-PAGE分析表明表达的人rIL-4约占总菌体蛋白的5～10%,分子量约为15KD。抽提复性后具有较高的生物学活性,以其TCGF样活性检测每升菌液含人IL-4 1×10~6 U,改良的3.5 M盐酸胍加0.25%Triton X100裂解包涵体法具有更高的回收率和生物学活性。 展开更多
关键词 白细胞介素4 PL启动子 基因表达
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人白细胞介素6在大肠杆菌中的高效表达 被引量：1
5
作者 田季德 李晨 陈慰峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第6期331-336,共6页
应用PCR和重组DNA技术,结合人工合成寡核苷酸引物,成功地构建成人白细胞介素6高效表达克隆,命名为pBMhIL6,使人rIL-6编码基因受控于P_RP_L串联启动子和人工合成SD序列,且以TAA终止密码子代替原人IL-6的TAG,在E.coli中获得人rIL-6的高效... 应用PCR和重组DNA技术,结合人工合成寡核苷酸引物,成功地构建成人白细胞介素6高效表达克隆,命名为pBMhIL6,使人rIL-6编码基因受控于P_RP_L串联启动子和人工合成SD序列,且以TAA终止密码子代替原人IL-6的TAG,在E.coli中获得人rIL-6的高效表达。SDS-PAGE和凝胶密度扫描分析证明表达的人rIL-6蛋白占E.coli总菌体蛋白的28%,分子量为21KDa,Western Blot证明其能特异地与抗IL-6 McAb结合。人rIL-6诱导表达动力学研究表明在42℃条件下诱导6小时,表达达峰值。不同菌株表达人rIL-6及其生长状态影响研究提示以E.coli DH5a生长菌密度至0.7时,人rIL-6诱导表达产率较高。以7TD1细胞株~3HTdR法测定表达的人rIL-6的HPGF活性为5×10~6u/L菌液。 展开更多
关键词 人IL-6 基因表达 大肠杆菌
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人白细胞介素4单克隆抗体的研制及其鉴定 被引量：1
6
作者 姚智 庞学文 +2 位作者 郭淑君 田季德 陈慰峰 《北京医科大学学报》 CSCD 1991年第3期167-169,共3页
应用脾内免疫法免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合,获得两株分泌IgG型抗人白细胞介素4单克隆抗体的杂交瘤细胞。用间接ELISA法可测出的抗原量100pg/ml;抗体的效价细胞培养基上清达1:16,腹水达1:1×10^(-5)。对E.coli表达的重组IL_4、商... 应用脾内免疫法免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合,获得两株分泌IgG型抗人白细胞介素4单克隆抗体的杂交瘤细胞。用间接ELISA法可测出的抗原量100pg/ml;抗体的效价细胞培养基上清达1:16,腹水达1:1×10^(-5)。对E.coli表达的重组IL_4、商品化的IL_4及天然IL_4呈阳性反应,与E.coli蛋白及重组IL_1、IL_2、IL_3、IFNa及TNFa无交叉反应。 展开更多
关键词 白细胞介素 单克隆抗体 研制 鉴定
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白细胞介素6受体的研究现状 被引量：1
7
作者 田季德 范雯 陈慰峰 《国外医学（免疫学分册）》 北大核心 1991年第4期177-180,共4页
IL6是一种多功能的细胞因子。IL6的多种生物学功能均由IL6R 及其信号传导系统所介导。本文主要就IL6R 的分子结构、信号传导机制、IL 6 R的分布和IL6R 的表达调控特性等方面介绍了IL6R 的研究现状。
关键词 白细胞介素6 受体
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霍乱毒素B亚单位基因的克隆和表达
8
作者 田季德 徐兆炜 +1 位作者 高庆申 刘延清 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期332-337,共6页
用DNA重组技术构建CT-B表达性质粒pXB1及进一步修饰的pXB2,使CT-B基因在大肠杆菌中得到较高水平的表达(280～350ng/ml),且有71.5％分泌率。表达动力学研究阐明,克隆子培养24h产物收率较高。一定浓度的Mg^(2+)、L-组氨酸和天冬酰胺能刺激... 用DNA重组技术构建CT-B表达性质粒pXB1及进一步修饰的pXB2,使CT-B基因在大肠杆菌中得到较高水平的表达(280～350ng/ml),且有71.5％分泌率。表达动力学研究阐明,克隆子培养24h产物收率较高。一定浓度的Mg^(2+)、L-组氨酸和天冬酰胺能刺激CT-B的表达。GM1-ELISA、CHO细胞测毒结合间接免疫荧光检测和家兔肠段结扎试验证实,表达的CT-B能与游离的或活细胞膜上的GM1受体结合,但无细胞和肠段毒性。这种细胞测毒结合免疫荧光序贯试验,为客观证实CT-B的生物学活性开拓了新途径。 展开更多
关键词 霍乱毒素 B亚单位 基因克隆
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霍乱肠毒素基因的表达调控
9
作者 田季德 徐兆炜 刘延清 《国外医学（微生物学分册）》 北大核心 1989年第4期162-166,共5页
本文综述了近年来霍乱肠毒素(CT)基因表达调控的研究进展,阐明了霍乱肠毒素及其基因的分子特征和基因表达不同水平诸因素调控的本质与机理,CT基因的表达依赖基因结构的完整性;RS_1序列诱导CT基因的放大效应;CT基因的转录受到启动子上游... 本文综述了近年来霍乱肠毒素(CT)基因表达调控的研究进展,阐明了霍乱肠毒素及其基因的分子特征和基因表达不同水平诸因素调控的本质与机理,CT基因的表达依赖基因结构的完整性;RS_1序列诱导CT基因的放大效应;CT基因的转录受到启动子上游直接重复序列和Tox^R位点的正性调控和htx位点的影响;CT-A和CT-B基因的SD序列在翻译水平调控CT基因的表达;许多营养、生理和其它因素也影响CT基因的表达。 展开更多
关键词 霍乱 肠毒素 基因表达调控
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